双歧杆菌胞壁蛋白诱导人肠腺上皮细胞β-防御素2(hBD-2)mRNA的表达

目的 :检测双歧杆菌对人肠腺上皮细胞 β 防御素 2基因的激活作用及其活性组分。方法 :应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)法和Northern杂交检测HT 2 9细胞hBD 2mRNA的表达 ;采用超声破碎细胞、超速离心、蛋白萃取等方法分离双歧杆菌胞壁蛋白质成份。结果 :RT PCR和Northern杂交分析显示 ,在正常培养条件下HT 2 9细胞无可见的hBD 2mRNA表达信号 ,但在双歧杆菌菌体、细胞壁和胞壁蛋白刺激下均检测出显著的hBD 2mRNA表达。结论双歧杆菌能诱导人肠腺上皮细胞hBD 2基因的表达 ,双歧杆菌胞壁蛋白可能是其诱导作用的活性组分。双…     

人膀胱粘膜抗菌多肽的部分纯化及抗菌活性研究

以５％乙酸冲洗正常人膀胱，获得膀胱粘膜酸溶性提取物。电泳凝胶琼脂糖弥散法抗菌实验分析表明，膀胱粘膜酸溶性提取物中有一条主蛋白带（称之为ＨＢＰ）对致病性大肠杆菌ＭＬ－３５Ｐ株有抗菌活性。以超滤方法对膀胱粘膜酸溶性提取物进行分离纯化，获得分子量低于１×１０~４的超滤纯化样品，其中主要含ＨＢＰ。琼脂糖弥散法抗菌实验结果表明，超滤纯化样品对大肠杆菌ＭＬ－３５Ｐ株、绿脓杆菌ＡＴＣＣ２７８５３株、金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ２５９２３株及血链球菌Ｓ_３４Ｓｒ株均有很强的抗菌活性。采用Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ｐＡＧＥ鉴定，超滤纯化样品主要显示为两条分子量分别为６．７×１０~３和８．５×１０~３的多肽。研究结果首次提示，人膀胱粘膜内存在抗菌活性很强的内源性抗生肽，是膀胱抗感染防御的主要因素。     

兔中性粒细胞防御素对HL—60细胞毒性及对病毒的直接灭活作用

本研究从新西兰家兔腹腔渗出中性粒细胞溶酶体内提取酸溶性组分，经制备性ＡＵ－ＰＡＧＥ获得纯化的防御素（ＮＰ１和ＮＰ２），ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定分子量为３ｋｄ左右。以ＨＬ－６０细胞作靶细胞，当ＮＰ１或ＮＰ２在１００μｇ／ｍｌ浓度时，可杀死６０％以上的ＨＬ－６０细胞。ＮＰ１（２６０μｇ／ｍｌ）还可直接灭活单纯疱疹病毒Ｉ型和乙型流感病毒，分别使病毒感染滴度降度９８．２％和９０％。本研究结果提示，中性粒细胞可     

RT-PCR法检测HNP1基因在气管上皮细胞转染后的表达

采用脂质体转染法将人中性粒细胞防御素（ Ｈ Ｎ Ｐ１ ）的 ｃ Ｄ Ｎ Ａ 重组真核表达质粒ｐ Ｂａｂｅ Ｎｅｏ Ｈ Ｎ Ｐ１导入无血清培养的人和兔的气管粘膜上皮细胞,利用逆转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ）法,在核酸水平检测 Ｈ Ｎ Ｐ１ 在气管上皮细胞的表达。结果：在人和兔的转染上皮细胞中均可检测到 Ｈ Ｎ Ｐ１ｍ Ｒ Ｎ Ａ 的表达,而在未转染的上皮细胞中 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ检测结果呈阴性。这一结果与作者先前用免疫组化法在蛋白质水平上检测的结果一致,并证明ｐ Ｂａｂｅ Ｎｅｏ Ｈ Ｎ Ｐ１ 转染至气管粘膜上皮细胞后能得到有效表达。     

大鼠β-防御素rBD-1cDNA克隆

为开展β－防御素基因表达调控分子机制及其转基因防治粘膜感染的研究,作者克隆了大鼠β－防御素ｒＢＤ－１ ｃＤＮＡ。从大鼠肾脏组织提取ＲＮＡ,采用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增大鼠β－防御素ｒＢＤ－１ｃＤＮＡ,并重组到ｐＧＥＭ－Ｔ Ｅａｓｙ 载体,经限制性内切酶谱分析和ＤＮＡ序列测定,证实所克隆的ｃＤＮＡ片段为大鼠β－防御素ｒＢＤ－１ ｃＤＮＡ。     

猪源致病性沙门氏菌四环素耐药基因tetC的PCR扩增及序列分析

本研究对16株猪致病性沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测，结果表明，沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性，耐药率达100％。对四环素耐药基因tetC进行PCR扩增，结果在12株沙门氏菌的质粒上扩增出特异性产物，与药敏试验结果阳性符合率75％，具有较高的检出率；序列分析结果表明tetC的核苷酸同源率较高，达97．7％～98．7％，建立tetC基因的PCR检测技术，为沙门氏菌对四环素耐药性的分子流行病学监测提供了有效的途径。     

青黛散抗溃疡性结肠炎的作用研究

目的：探讨青黛散抗实验性溃疡性结肠炎的作用。方法：采用三硝基苯磺酸法制备大鼠溃疡性结肠炎模型，HE染色制作病理切片，对其抗实验性溃疡性结肠炎作用进行评价。结果：病理组织学检查表明青黛散有效改善了溃疡性结肠炎。结论：青黛散可有效对抗实验性结肠性溃疡炎。     

胃液培养检查在早产儿早期细菌感染诊断中应用研究

目的分析胃液培养检查在早产儿早期细菌感染诊断中应用的临床结果,探讨早产儿早期细菌感染的有效诊断措施。方法选择同期具有围生期感染高危因素早产儿65例,均在出生1h内开奶前行胃液培养检查并记录结果,结合上述早产儿临床体征与其他实验室检查结果分为感染组(n=32例)和未感染组(n=33例),比较并分析两组早产儿胃液培养检查情况。结果两组早产儿胃液培养阳性率比较,差异具有高度统计学意义(P<0.01),感染组显著高于未感染组;胃液培养具有较高的特异性、敏感性、阳性预测值与阴性预测值。感染菌株以革兰氏阴性杆菌为主,其次为革兰氏阳性球菌。结论对早产儿应积极进行胃液培养检查,这对早产儿早期细菌感染诊断具有重要的临床意义。     

锌硒宝片治疗厌食症98例疗效探讨

观察锌硒宝片治疗厌食患儿的疗效,探讨缺锌与厌食的关系.采取随机分组方法,用锌硒宝片治疗98例患儿和葡萄酸锌口服液60例患儿进行对比.结果表明,锌硒宝片疗效显着优于葡萄碳酸锌口服液,且无1例出现不良反应.提示小儿厌食与缺锌关系密切,小儿生长发育阶段缺锌现象较普通,经常补充锌,可减少和避免缺锌现象发生.