电针足三里对慢性不可预见性抑郁症大鼠多器官损伤的作用及其机制

目的:探讨电针足三里对慢性不可预见性应激大鼠多内脏器官损伤的作用。方法:将雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组(对照组)、慢性应激组(应激组)、慢性应激非经非穴电针刺激组(非穴组)、慢性应激足三里电针刺激组(足三里组)和慢性应激氟西汀治疗组(氟西汀组)。采用慢性不可预见性应激法造模后,非穴组和足三里组给予电针刺激,氟西汀组给药,每天1次3周;经Open-field行为测试,解剖观察、H-E染色和免疫组化法等进行统计学分析。结果:与应激组相比,足三里组和氟西汀组大鼠的行为明显改善;应激组大鼠出现胃腺和食管黏膜上皮萎缩,肺出现灶状充血,肺组织间炎症细胞增多,20%～30%出现肺脓肿现象;足三里组和氟西汀组胃腺、食管黏膜上皮和肺组织病变减轻,未见肺脓肿发生,5-羟色胺(5-HT)免疫反应增强,阳性细胞数目增多;足三里组与应激组相比具有显著性差异。结论:电针足三里对慢性不可预见性抑郁症大鼠多器官损伤具有改善作用,其机制可能与电针的刺激效应,调节了神经通路,并促进了周围器官的5-HT合成有关。     

家兔视网膜脱离状态下玻璃体NGF水平及视网膜细胞动态观察

目的 :研究视网膜脱离状态下玻璃体内源性神经生长因子 (NGF)水平及视网膜细胞的动态变化 ,为视网膜脱离的治疗提供实验依据。方法 :健康青紫兰家兔制备视网膜脱离模型 ,模型制备后 8h ,1d ,4d ,7d ,14d以夹心酶免疫反应方法检测玻璃体NGF的水平 ,同时制备视网膜光镜、电镜标本 ,观察视网膜细胞的动态变化。统计学方法采用方差分析、秩和检验和直线相关分析。结果 :①家兔正常玻璃体NGF的水平为 (16 48± 2 5 2 )ng/L。视网膜脱离后 8h玻璃体NGF水平已增加 ,1d后达正常水平的 12 6倍 ;脱离后第 4d为正常水平的 4倍 ;第 14d降至正常水平。②视网膜脱离后第 4～ 7d变性及凋亡视细胞数增加 ,与玻璃体NGF水平显著负相关。③视网膜脱离 7d后神经节细胞层的厚度与玻璃体NGF水平显著正相关。结论 :NGF对视网膜细胞可能具有保护作用 ,提示外源性NGF可应用于治疗视网膜脱离     

8-Br-cAMP对人白血病HL-60细胞生长、分化及有关基因表达的影响

目的　观察 8 Br cAMP对HL 6 0细胞生长、分化及其相关基因的调节。方法　组织化学、原位杂交和完整细胞RNA斑点印迹。结果　 8 Br cAMP作用 2 4h ,HL 6 0细胞c fos癌基因和p2 1waf1抑癌基因表达明显升高 ,c myc癌基因表达明显降低 ;8 Br cAMP作用 48h ,HL 6 0细胞生长、增殖明显受抑制 ,并向中性粒细胞方向分化。结论　 8 Br cAMP可调整HL 6 0细胞生长、分化及相关癌基因和抑癌基因的表达 ,抑制HL 6 0细胞的生长 ,促进HL 6 0细胞的分化     

诱导分化的人食管癌细胞DNA聚合酶β和碱基切除修复功能的改变

目的：了解诱导分化的食管癌细胞中DNA聚合酶β和碱基切除修复功能的变化.方法：采用全反式维甲酸（ATRA）和二甲亚砜（DMSO）诱导人食管癌Eca109细胞分化,应用原位杂交、碱基切除修复功能（BER）测定方法分别检测细胞po1B基因的表达和BER功能的变化.结果：ATRA、DMSO作用5 d后可以诱导Eca109细胞分化.随着Eca109细胞的分化,polβ基因的表达降低,BER恢复.结论：ATRA、DMSO可下调Eca109细胞polβ基因的表达,恢复BER活性使其趋向正常细胞分化.     

老年小鼠腹腔巨噬细胞HSP70、iNOS及iNOSmRNA表达的意义

目的 :通过观察老年小鼠腹腔巨噬细胞热休克蛋白 (HeatshockproteinHSP) 70、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)及其基因 (iNOSmRNA)的表达 ,探讨老年机体免疫功能低下及易发心脑血管疾病的机制。方法 :取老年小鼠及成年小鼠各 10只 ,采用免疫组化技术检测HSP70的表达 :采用组织化学检测iNOS的活性 :采用原位杂交技术检测iNOSmRNA的表达 ,所有斑点印迹用薄屠扫描仪进行扫描 ,并对扫描值进行统计学处理。结果 :老年小鼠HSPT0 ,iNOS及iNOSmRNA的表达为 4 .34± 1.5 7、3.0 3± 1.2 8及 5 .89± 1.90 ,成年小鼠HSP70、iNOS及iNOSmRNA的表达为 7.13± 2 .12、5 .5 7土 1.36及 12 .39土 2 .6 8,两组相比有显著差异 ,P <0 .0 1。结论 :提示老年机体易发心脑血管疾病、肿瘤及其它疾病的机制之一可能与体内HSP70、iNOS及iNOSmRNA的表达下降有关     

板层鱼鳞病患者指甲内皮蛋白与TGase1酶的表达及其TGM1基因序列分析

目的观察板层鱼鳞病（LI）患者指甲转谷氨酰胺酶1（TGase1）与内皮蛋白的表达变化，分析其TGM1基因序列。方法分别自8例u患者（u组）和8例健康人（c组）的指甲中提取总蛋白进行SDS-PAGE电泳，分别采用免疫印迹及斑点印迹法检测内皮蛋白和TGase1。对LI组不同家系两个家族的2例患者血液进行TGM1基因序列分析。结果LI组指甲总蛋白SDS．PSGE电泳呈5条主带，即38、48、54、63、69kDa，而C组仅呈现前4条主带。LI组内皮蛋白主要定位于63、69kDa主带，C组内皮蛋白仅定位于63kDa主带。两组内皮蛋白及TGasel的灰度值（GSM）相比，P均〈0．05。2例u患者TGM1基因序列第8、12、13外显子皆有错义的点突变。结论LI患者的指甲内皮蛋白过度表达、TGase1低表达，TGM1基因序列异常。     

小分子干扰RNA逆转胃癌SGC7901/VCR细胞mdr1介导的多药耐药

目的研究小分子干扰RNA（siRNA）逆转胃癌多药耐药细胞亚系SGC7901／VCR mdr1介导的多药耐药效应。方法根据mdr1cDNA已知序列,设计并体外转录2条含21个核苷酸的siRNA（mdr1si2631和mdr1si3071）,转染SGC7901／VCR细胞,用RT-PCR检测mdr1基因mRNA的表达,免疫组织化学检测P-gp的表达,流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积,MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性。结果siRNA转染SGC7901／VCR细胞48h后,mdr1基因mRNA和P-gp的表达水平下降,细胞内阿霉素积累量增加,对阿霉素敏感性的相对逆转率各达79．59％及59．98％。结论siRNA可逆转SGC7901／VCR细胞mdr1介导的多药耐药。     

睡眠剥夺促进大鼠海马神经元凋亡及相关基因表达

探讨睡眠剥夺引起的神经元凋亡与相关基因表达的变化。采用TUNEL染色观察了快眼动睡眠剥夺大鼠海马神经元形态学变化,应用原位杂交、Western blot法检测了快眼动睡眠剥夺大鼠海马bcl-2,bax mRNA,MAPKs表达的变化。结果表明：快眼动睡眠剥夺大鼠海马CAl,CA3区神经元阳性凋亡细胞数明显增多,bcl-2,bax mRNA表达明显增强,ERK活性降低,JNK蛋白表达量较对照组明显增高。提示睡眠剥夺可引起大鼠海马神经元凋亡。与凋亡相关的bcl-2,bax mRNA基因表达及MAPKs活性的变化可能涉及神经元的凋亡机制。     

网滤和免疫实验技术分离人表皮干细胞群体的比较

目的:比较网滤法和免疫实验技术分离人表皮干细胞群体(SCP)的效果,并鉴定SCP的生物学特性.方法:对消化分离的人表皮单细胞悬液进行不同目数(240目、300目、350目)筛网过滤和ELISA及琼脂糖-4B(Sepharose-4B)柱层析的免疫实验技术分离SCP;以形态学、P63-免疫反应性(IR)/K19-IR生物标志和生物学特性进行SCP鉴定.结果:经300目/350目筛网过滤可分离出约50%的P63-IR细胞群体,应用2项免疫实验技术皆可分离出约90%的P63-IR/K19-IR的细胞群体;应用ELISA法分离出表皮细胞的接种数虽然低于仅经240目筛网过滤法,但表皮细胞融合时间却提前了5 d(P均＜0.05);而且融合后分化的表皮切片呈现复层,一些基层细胞呈现P63-IR阳性反应.结论:筛网过滤法分离效率虽较低,但操作简单;免疫实验技术分离效率较高,ELISA技术操作较方便,而Sepharose-4B柱层析技术较复杂.     

电针对家兔血小板细胞化学的影响

用细胞化学方法研究了电针对家兔痛阈、血小板计数、血小板亚群、血小板5—羟色胺含量以及血小板的单胺氧化酶、三磷酸腺苷酶、非特异性酯酶和酸性磷酸酶活性的影响。发现电针对家兔血小板5—羟色胺含量和一些酶的活性有一定程度的调整作用。电针后家免的痛阈、血小板5—羟色胺含量和所测定的酶活性增加。血小板5—羟色胺含量和痛阈水平之间呈正相关关系。这表明血小板5—羟色胺可作为针刺镇痛效应的一个有价值的客观指标。