交感性眼炎13例的临床分析

交感性眼炎是眼球穿通伤、内眼手术和激光损伤所引起的一种非坏死性肉芽肿性的自身免疫性疾病 ,可导致双眼盲目。本病的转归和预后有赖于早期诊断和恰当的早期治疗。本文就我院自 1987年 1月至 1999年 6月收治的眼球穿通伤 85 6例 ,其中发生交感性眼炎 13例 ,占 1 5 2 % ,现报告如下。1　临床资料1 1　本文 13例交感性眼炎中 ,男 9例 ,女 4例 ,年龄 11～ 5 7岁 ,以 2 0～ 35岁为多 ,共 6例 ,占 46 2 %。1 2　致伤因素 :铁屑穿通伤、球内异物 4例 ,爆炸伤 2例 (炸药、鞭炮各 1例 ) ,石块伤、剪刀、菜刀、铁丝、注射针头 (废用 )、树杈各 1例…     

结直肠腺癌CXCR4 CXCL12 Fascin和E-cadherin表达与淋巴结转移的相关性研究

目的:探讨CXCR4、CXCL12、Fascin及E-cadherin在结直肠腺癌(CRC)中表达及其与淋巴结转移的相关性.方法:采用免疫组织化学方法检测126例CRC组织CXCR4、CXCL12、Fascin和E-cadherin在蛋白水平上的表达情况,同时对57例伴有局部淋巴结转移病例的原发癌和其相应淋巴结转移癌上述标志物的表达情况进行对比分析,探讨其表达与淋巴结转移的相关性.结果:CXCR4、CXCL12和Fasein在结直肠腺癌中的阳性表达率分别为41.27%、81.75%和47.62%,均明显高于正常结直肠黏膜组织(15.00%、35.00%和15.00%,P均<0.05).转移组病例Fascin和CXCR4蛋白阳性表达率明显高于未转移组病例(57.89%vs 39.13%和50.88%vs 33.33%,P<0.05).E-cad-herin在结直肠腺癌组织中阳性表达率明显低于正常黏膜组织(17.46%vs 80.00%,P<0.05).转移组结直肠癌组织E-cadherin阳性表达率明显低于无转移组(8.77%vs 23.19%,P<0.05).结直肠腺癌CXCR4阳性表达与肿瘤浸润深度及临床分期密切相关(P<0.05),Fascin阳性表达与肿瘤组织学分级及临床分期均密切相关(P<0.05),而E-cad-herin阳性表达与肿瘤组织学分级密切相关(19<0.05).淋巴结转移癌组织CXCR4、CXCL12和Fascin表达均显著高于其相应原发癌(P<0.05).结论:CXCR4、CXCL12、Fascin和E-cadherin的表达变化及其相互作用可能与结直肠癌淋巴结转移有关.     

hsa-miR-223表达载体构建及其对靶基因ARTN的调控

目的：构建hsa-miR-223真核表达载体, 并在人食管癌细胞KYSE-150中验证hsa-miR-223对靶基因artemin （ARTN）的调控作用。方法： 以基因组DNA为模板, RT-PCR扩增包括hsa-miR-223前体序列在内的基因序列, 并将其克隆到载体pCD?NA3.1 （+） 上, 通过实时定量PCR方法检测hsa-miR-223在人胚肾HEK293细胞中的表达。根据生物信息学预测软件TargetScan、mirBase和PicTar对hsa-miR-223靶基因进行预测, 将靶基因ARTN的3'UTR区融合到pMIR荧光素酶基因下游, 通过双荧光素酶报告基因检测hsa-miR-223对靶基因ARTN的3'UTR区的调控作用。将pCDNA3.1-miR-223表达质粒转染人食管癌细胞KYSE150, 通过Western blot检测对ARTN蛋白表达的影响。结果： 成功构建hsa-miR-223表达载体pCDNA3.1-miR-223。实时定量 PCR 验证表明 pCDNA3.1-miR-223 在人胚肾 HEK293 中能够明显地过表达成熟 miR-223。生物信息学预测 ARTN 是hsa-miR-223的靶基因, 并构建融合ARTN的3'UTR区表达质粒pMIR-ARTN, 在此基础上对ARTN的3'UTR “种子区” 进行定点突变。双荧光素酶报告基因分析表明hsa-miR-223能够作用于ARTN的3'UTR。Western blot法进一步证实ARTN是miR-223的靶基因。结论： hsa-miR-223作用于ARTN的3'UTR可在转录后水平上调控ARTN蛋白的表达。     

子宫内膜样腺癌中mTOR和eIF4E蛋白表达及临床意义

目的 探讨mTOR和eIF4E蛋白在子宫内膜样腺癌发生中的作用和临床意义.方法 采用免疫组化EliVision方法分别检测17例增殖期宫内膜、64例子宫内膜增生性病变和44例子宫内膜样腺癌中mTOR和eIF4E蛋白的表达情况.结果 mTOR在增殖期子宫内膜和单纯性增生宫内膜中均无强阳性表达,复杂性增生宫内膜和子宫内膜样腺癌中mTOR强阳性表达率分别为23.40%和52.27% ,明显高于增殖期子宫内膜和单纯性增生宫内膜(P<0.05).子宫内膜样腺癌中mTOR的强阳性表达率明显高于复杂性增生宫内膜和复杂性非典型增生中的宫内膜(P<0.05).子宫内膜样腺癌中mTOR强阳性表达与肿瘤分化程度密切相关,Ⅱ、Ⅲ级子宫内膜样腺癌的强阳性表达率明显高于Ⅰ级(72.41% vs 13.33%,P<0.05).而与TNM分期和淋巴结转移均无相关性(P>0.05).eIF4E蛋白在增殖期宫内膜,单纯性增生宫内膜,复杂性增生宫内膜,子宫内膜样腺癌中的阳性表达率分别为52.94%,73.68%,85.11%和90.91%.复杂性增生宫内膜和子宫内膜样腺癌中eIF4E蛋白的阳性表达均明显高于其它各组(P<0.05),但两者差异无显著性(P>0.05).eIF4E与子宫内膜样腺癌分化程度、TNM分期和有无淋巴结转移均无相关性(P>0.05).结论 mTOR、eIF4E蛋白在复杂性增生宫内膜和子宫内膜样腺癌中表达明显增强,提示两者可能在子宫内膜样腺癌发生中发挥一定作用.     

JNK、p-JNK在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的表达及意义

目的探讨JNK、p-JNK在大肠管状腺瘤癌变过程中的作用。方法采用免疫组化检测87例腺瘤伴不同程度异型增生及癌变组织中JNK和p-JNK的表达。结果 JNK、p-JNK在正常黏膜、腺瘤伴异型增生及癌变中的阳性表达率均呈增高趋势,JNK和p-JNK在腺瘤伴异型增生和癌变组中的阳性表达率均高于正常黏膜组;JNK和p-JNK的表达存在一致性。结论随着腺瘤异型增生程度的增高及癌变的出现,JNK呈逐渐增高趋势,JNK在大肠腺瘤癌变过程中可能起一定作用。     

miR-181a真核表达载体的构建及鉴定

目的: 构建miR-181a真核表达载体,获得食管癌细胞TE11在其中稳定表达的细胞系,为研究miR-181a的功能以及其在食管癌细胞TE11中的作用机理奠定基础。方法: 根据miR-181a成熟序列在基因组中的位置及其上下游250个碱基序列,以293T细胞基因组DNA为模板设计PCR引物,扩增包含miR-181a前体的序列,连接到线性化的pMD18-T Simple载体中,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后亚克隆到pcDNA3. 1 ( + )中,并对重组质粒进行双酶切和测序分析;鉴定完全正确的重组质粒转染食管癌细胞TE11,用G418 ( 350 mg/L )筛选4周获得miR-181a稳定表达细胞系TE11-miR-181a,提取TE11-miR-181a细胞总RNA,用real-time PCR鉴定pcDNA3. 1 ( + )-miR-181a可在真核细胞中稳定过表达。结果: 成功构建了miR-181a的真核表达载体,并获得了在TE11细胞中稳定表达重组质粒的细胞系TE11-miR-181a。结论: miR-181a真核表达载体在食管癌细胞TE11中稳定高表达,为进一步研究miR-181a在食管癌细胞TE11中的功能及基因调控机制奠定了基础。     

miR-181a对人食管癌TE11细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的:通过构建miR-181a的真核表达载体,研究其对人食管癌TE11细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:以95C细胞基因组DNA为模板,扩增得到miR-181a前体序列,插入表达载体pcDNA3.1(+)克隆获得pcDNA3.1(+)-miR-181a。将真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-181a转染到TE11细胞中,并采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogentic quantitative-PCR,RFQ-PCR)对其表达情况进行验证。分别采用MTT法、细胞划痕法和Boyden小室法检测转染重组质粒pcDNA3.1(+)-miR-181a对TE11细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力的影响。结果:成功构建了插入miR-181a基因片段的真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-181a;RFQ-PCR检测结果表明,转染pcDNA3.1(+)-miR-181a的TE11细胞能够过表达成熟的miR-181a(P<0.05)。过表达miR-181a的TE11细胞增殖能力、迁移能力和细胞侵袭能力均明显增强。结论:miR-181a在TE11细胞中过表达能够增加细胞的增殖、迁移和侵袭能力,为进一步深入研究miR-181a在肿瘤中的作用机制提供了实验依据。     

脑星形细胞瘤中TIP30、VEGF和CD34的表达及其相关性研究

Objective To investigate the expression and relationship of TIP30(HIV-1 Tat interactive protein 2), vascular endothelial growth factor (VEGF) and MVD (detected by CD34) in the angiogenesis of human brain astrocytomas. Methods Expression of TIP30, VEGF and CD34 in 19 cases of normal brain tissue and 71 cases of astrocytoma were immunohistochemically examined with Elivision plus two-step method. Results The positive expression of TIP30 could be seen in cytoplasm of neuroglial cells and neurons of 19 normal brain tissues. The positive expression rate of TIP30 in 71 cases of astrocytoma was 33.80 % (24/ 71). The positive expression rate of TIP30 in astrocytoma of different grades was 52 % for grade Ⅱ, 34.78 % for grade Ⅲ and 13.04 % for grade Ⅳ. The positive expression rate of TIP30 in high grade (Ⅲ+Ⅳ) of astrocytoma was found significantly lower than that in low grade(Ⅱ) (χ2=5.71, P <0.05); The expression of VEGF and MVD detected by CD34 in astrocytomas were higher than that in normal brain tissue and increased as the tumor grade increased; In astrocytoma, the negtive correlation was found between the expression of TIP30 and VEGF (r=-0.428, P<0.05); no correlation was found between TIP30 and MVD(r=-0.065, P 0.05); the positive correlation was found between VEGF and MVD(r=0.684, P<0.01). Conclusion The positive expression rate of TIP30 in normal brain tissue is significantly higher than that in astrocytoma. The positive expression rate of TIP30 significantly decreases as the pathological grade of the astrocytoma increases; The expression of TIP30 and VEGF is negatively correlated in astrocytoma.     

has-miR-223表达载体构建及其对靶基因ARTN的调控

目的:构建hsa-miR-223真核表达载体,并在人食管癌细胞KYSE-150中验证hsa-miR-223对靶基因artemin(ARTN)的调控作用.方法:以基因组DNA为模板,RT-PCR扩增包括hsa-miR-223前体序列在内的基因序列,并将其克隆到载体pCD?NA3.1(+)上,通过实时定量PCR方法检测hsa-miR-223在人胚肾HEK293细胞中的表达.根据生物信息学预测软件TargetScan、mirBase和PicTar对hsa-miR-223靶基因进行预测,将靶基因ARTN的3'UTR区融合到pMIR荧光素酶基因下游,通过双荧光素酶报告基因检测hsa-miR-223 对靶基因ARTN 的3'UTR 区的调控作用.将pCDNA3.1-miR-223 表达质粒转染人食管癌细胞KYSE150,通过Western blot检测对ARTN蛋白表达的影响.结果:成功构建hsa-miR-223表达载体pCDNA3.1-miR-223.实时定量PCR 验证表明pCDNA3.1-miR-223 在人胚肾HEK293 中能够明显地过表达成熟miR-223.生物信息学预测ARTN 是hsa-miR-223的靶基因,并构建融合ARTN的3'UTR区表达质粒pMIR-ARTN,在此基础上对ARTN的3'UTR"种子区"进行定点突变.双荧光素酶报告基因分析表明hsa-miR-223能够作用于ARTN的3'UTR.Western blot法进一步证实ARTN是miR-223的靶基因.结论:hsa-miR-223作用于ARTN的3'UTR可在转录后水平上调控ARTN蛋白的表达.