活化性杀伤细胞免疫球蛋白样受体阳性的NK细胞对靶细胞的杀伤作用

Objective To study the killing effects of the killer cell immunoglobutin-like receptors (KIR) KIR2DS1-positive natural killer (NK) cells against acute, myeloid leukemia (AML) target cells, and to explore the KIR, human leucocyte antigen-Cw, and Cw loci (HLA-Cw) of NK cells, and, HLA-Cw of target cells mismatches destruction mechanism. Methods High-purified NK cells separated by DNYAL bead negative selection from healthy donor peripheral blood were taken as effector cells, and the freshly isolated bone marrow mononuclear cells from newly diagnosed AML patients as target cells. The anti-CD158a, CD158b monoclonal antibody was used to block inhibitory KLR receptors of NK cells (such as: KIR2DL1, KIR2DL2, KIR2DL3). The NK cells cytotoxicities against target cells before and after KIR blockades were detected by MTT reduction assay in vitro. Polymerase chain reaction and sequence specific primers (PCR-SSP) genotyping techniques were used to detect HLA-Cw, KIR gene of the healthy donors and patients. NK cells and target cells were divided into group C1 (expressing HLA-Cw 01, 03, 07, 08, 12, 14, 16 alleles), C2 group (expressing HLA-Cw 02, 04, 05, 06, 15, 17, 18 alleles) and the C1/C2 group (co-expressing the alleles in C1 group and C2 group) based on HLA-Cw. Results The purity of NK cells analyzed by flow cytometry was (90.8±6.08)%, and the killing effects of NK cells were significantly enhanced after inhibitory KIR blockades (t=-3.00, P=0.005). The cell lysis in C1 group, KIR2DS1+ NK cells against C2 group target cells (57.37±1.40)% was significantly higher than that against C1 group (44.19±4.67) % and C1/C2 group (36.77±6.56)% target cells (F= 11.87, P = 0.021), furthermore the differences in cell lysis among the above three groups become more evident after the inhibitory KIR blockades (F = 18. 72, P=0. 009). Conclusions The activity of NK cells was increased after the inhibitory KIR blockades, and the killing activities of KIR2DS1+ NK cells were higher than KIR2DS1 NK cells. The incompatibility between KIR, HLA-Cw of NK cells and HLA-Cw of target cells mediated NK alloactivation, realizing "missing self" recognition, and enabling NK cells cytotoxieity against targets.     

非体外循环冠状动脉旁路移植术的血流动力学研究

目的：分析非体外循环冠状动脉旁路移植术中血流动力学的变化。方法：2000年6月至2001年1月，连续32例病人接受非体外循环冠状动脉旁路移植术，术中、术后对各吻合血管的血流动力学指标进行持续监测。全组完成前降支吻合32例、右冠状动脉26例、回旋支28例、对角支8例。结果：本组死亡例。行前降支冠状动脉吻合时血流动力学指标无明显变化。右冠状动脉吻合时影响右心功能。回旋支及对角支冠状动脉吻合时对血流动力学有明显的影响，导致平均肺动脉压（MPAP）、肺毛细血管楔压（PAWP）、中心静脉压（CVP）明显升高，每搏指数（SVI）及左室每搏功指数（LVSWI）有明显下降；心排指数（CI）有一定的下降趋势。行主动脉近心端吻合时尽管已无心脏搬动，但MPAP、SVRI及肺循环阻力指数（PVRI）仍较诱导后有明显升高，CI有明显下降。术毕及术的2、6、16h各血流动力学指标趋于正常，CI有明显改善。结论：非体外循环冠状动脉旁路移植行前降支及右冠状动脉吻合时对血流动力学影响较小，回旋支及对角支冠状动脉吻合时对血流动力学有明显的影响，术毕及术后2、6、16h各血流动力学指标趋于正常，心脏功能有明显改善。     

RNA干扰沉默PPARγ基因对小鼠骨髓基质干细胞成脂与成骨分化潜能的影响

目的 观察RNA干扰沉默PPAγ基因对小鼠骨髓基质干细胞成脂与成骨分化潜能的影响.方法 针对小鼠PPARγ基因,构建短发夹RNA(shRNA)真核表达载体并转染小鼠骨髓基质干细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹沉淀(Wetem-blot)观察PPARγ的基因沉默效果.分别在成脂及成骨诱导培养基条件下,诱导培养14 d,采用油红O(Oil Red O)染色及茜素红染色鉴定分化结果.并与空载体转染组和未转染组比较.结果 测序证实成功构建PPARγ的shRNA真核表达载体pSilencer-shPPARγ,转染小鼠骨髓基质干细胞后,PPARγ基因表达在转录水平和翻译水平都显著受到抑制,与两对照组相比,抑制率分别为92%和90%.成脂及成骨诱导分化后,shPPARγ转染组小鼠骨髓基质干细胞的成骨分化率为56.46%±1.92%,明显高于pSilencer-neo空载体转染组和未转染组(P<0.01);成脂分化率为19.24%±0.98%,显著低于pSilencer-shPPARγ-neo空载体转染组和未转染组(P<0.01).结论 RNA干扰沉默PPARγ基因后,可增强小鼠骨髓基质干细胞的成骨分化潜能,抑制其成脂分化潜能.     

高频彩色多普勒超声在诊断多睾症中的应用价值

目的:探讨高频彩色多普勒超声在多睾症诊断中的价值。方法:回顾性分析我院超声诊断6例(其中5例经病理证实)多睾症患者,分析其声像图表现及临床情况。结果:6例多睾症患者均为三睾,其中4例多睾位于阴囊内,2例位于腹股沟并伴同侧斜疝。3例多睾症多余睾丸与附睾相连,1例多睾伴有附睾及输精管重复,2例无附睾及输精管与之相连。彩色多普勒血流显像:4例内部可见血流信号,2例多余睾丸内无血流信号显示。结论:多睾症有典型的声像图特征,高频彩色多普勒超声在其诊断中有重要意义。     

并发静脉癌栓的肾细胞癌中VEGF的表达及临床意义

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）的表达与肾细胞癌（RCC）并发静脉癌栓（VTT）的关系。方法：采用免疫组织化学MaxVision^TM快捷法检测57例并发或未并发VTT的RCC组织和10例远离肿瘤的正常肾组织中VEGF的表达状况。实验分为三组,A组：并发VTT的RCC组织27例;B组：未并发VTT的RCC组织30例;C组：远离肿瘤的正常肾组织10例。结果：VEGF在三组中的阳性表达率分别为81．5％、63．3％和20．0％,其中A组和C组差异有统计学意义（P〈0．01）,A组和B组差异无统计学意义（P〉0．05）,B组和C组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：VEGF的异常表达可能在RCC并发VTT的形成中发挥重要作用,以抑制VEGF蛋白及其受体作用的靶向治疗药物在RCC并发VTT的治疗中应有良好效果。     

急性吗啡暴露对大鼠前额叶皮质τ蛋白磷酸化及学习记忆的影响

目的探讨急性吗啡暴露对大鼠前额叶皮质τ蛋白磷酸化及学习记忆的影响。方法40只雄性SD大鼠随机均分成急性吗啡暴露组(M组)和对照组(C组)。M组单次腹腔注射吗啡(30 mg/kg),C组同法注射等量生理盐水。注射后2 h和24 h分别断头处死10只大鼠,免疫印迹技术检测前额叶皮质τ蛋白的磷酸化水平。后处死的大鼠于注射后2、4及24 h分别行水迷宫实验。结果M组注射后2 h时平台寻找时间显著长于C组(P<0.01)。M组大鼠前额叶皮质τ蛋白Ser396和Thr231位点的磷酸化水平于注射后2 h时显著高于C组(P<0.05)。结论急性吗啡暴露可致大鼠学习记忆功能可逆性减退,前额叶皮质τ蛋白过度磷酸化可能与其有关。     

椎间融合器联合椎弓根钉内固定治疗腰椎滑脱症

目的对后路椎间融合器联合椎弓根螺钉内固定治疗腰椎滑脱症的临床应用进行初步报告,探讨此项技术的手术要点和临床效果。方法自2005年1月至2008年5月,对13例腰椎滑脱患者采用椎间融合器联合椎弓根螺钉内固定治疗。随访6~38个月,平均25个月。结合临床症状改善程度、工作能力的恢复和X线片上植骨融合程度综合进行疗效评定。结果13例滑脱患者全部达到解剖复位,随访患者腰椎正侧位X线片,椎间融合满意,椎间高度、复位均未丢失,没有出现椎弓根螺钉松动、断裂情况。疗效优10例,良1例,可2例,优良率84.6%。结论通过腰椎后路一个切口行椎体间植骨融合、椎弓根螺钉内固定术,能对前柱和后柱同时起到稳定作用,有利于滑脱的复位和维持正常的腰椎前凸,符合腰椎的生物力学要求。充分减压后椎弓根螺钉内固定和椎间融合器治疗腰椎滑脱症复位效果满意,临床症状改善明显,融合率高,疗效好。     

下颈椎关节突关节解剖及生物力学研究进展

颈椎关节突关节（zygapophyseal joints）又称椎间小关节（facet joints），由相邻上、下颈椎关节突的关节面组成。双侧的关节突关节同前方的椎体及椎间盘一起构成颈椎的椎间关节，共同维持颈椎的稳定。近年来解剖学和生物力学研究表明，关节突关节损伤、退变是引起慢性颈痛的最常见原因之一，被喻为慢性颈痛的发动机。颈椎关节突关节增生退变也是引起颈椎不稳和神经根受压的重要原因。笔者就下颈椎关节突关节的解剖学和生物力学相关问题作一综述。     

小肝癌临床治疗研究最新进展

研究目前临床常见的几种对小肝癌的治疗模式,包括外科手术切除、肝移植、消融治疗、导管化疗栓塞、生物治疗、综合治疗这几种模式。旨在了解现阶段小肝癌的临床治疗手段,为下一阶段研究提供帮助。