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目的 分析洗涤方法和冻存温度对外周血单个核细胞(PBMC)内HCV RNA含量的影响.方法 收集同一天内17例血清HCV RNA阳性慢性丙型肝炎患者PBMC,随机分成A组(6例)和B组(11例),A组把细胞分成2份后分别采用常规法及改良法洗涤细胞5次,并留取每次洗涤液及细胞;B组采用改良法洗涤细胞后把细胞分成2份,分别作为新鲜组和-20℃冻存组,然后采用离心柱型RNA提取法和实时荧光定量聚合酶链反应(FQPCR)检测洗涤液和细胞中HCV RNA含量.结果 (1)洗涤完3次时,常规法有1份洗涤液HCV为阳性,改良法均为阴性;与第1次洗涤液相比,改良法再洗涤1次的病毒含量下降幅度明显高于常规法;(2)新鲜组与冻存组HCV RNA含量不存在明显差异.结论 洗涤PBMC以采用改良法洗涤3次为宜;-20℃简易冻存6周的PBMC标本仍可用于FQPCR检测. 相似文献
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以HBV.DNA作为指标对HBV感染状态的调查研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 以 H B V· D N A 作为 H B V感染的流行病学调查指标。方法 应用 P C R技术对10 976 例肝病患者血清中的 H B V· D N A 进行检测,并与其它乙肝病毒标志物( H B V M)尤其是 H Be Ag 进行对比分析。结果 H B V· D N A 阳性率(41.8% )明显高于 H Be Ag 阳性率(22.5% )。从 H B V· D N A 检出率的性别与年龄分布来看,男性组(45.4% )明显高于女性组(298% ),60 岁以上年龄组和20 岁以下年龄组阳性率较低(335% 、374% ),其它几个年龄组较高且较接近(417% 、430% 、440% 、424% )( P> 0.05)。不同类型肝病患者血清 H B V· D N A 的检测为:肝硬化组 H B V· D N A 阳性率最高(64.5% ),慢性肝炎组次之(57.1% ),急性肝炎组最低(25.6% )。结论 以 P C R技术检测 H B V· D N A 明显较其它乙肝病毒标志物敏感,它可进一步揭示 H B V 的传染源和传播途径,也更有利于临床对乙肝的诊断和治疗。 相似文献