小鼠H—2D^d基因的克隆及其逆转录病毒表达载体的构建

目的：构建BALB／c小鼠H－2D^d基因的逆转录病毒表达载体。方法：采用反转录PCR从BALB／c小鼠脾细胞基因组中，扩增H－2D^d的编码基因，插入克隆载体pGEM-T中。经EcoR I和Xho I双酶切后，亚克隆法于逆转录病毒载体pMSCV的相应酶切位点，构建pMSCV-H2D^d重组表达质粒，并经双酶切和序列测定鉴定。结果：用EcoR I和Xho I双酶切鉴定证实，克隆基因正确插入载体pMSCV。克隆H－2D^d的编码基因经序列测定证实，与献报道完全一致。结论：成功构建小鼠H－2D^d编码基因的逆转录病毒载体，为进一步研究MHC分子在移植免疫中的作用及临床移植的基因治疗应用奠定了基础。     

胰岛素样生长因子1在神经特异性再生中的作用机制

目的 研究胰岛素样生长因子1（IGF－1）对神经元p75受体表达的影响，探讨IGF－1在神经特异性再生中的作用机制。方法 在体外培养神经元培养基中加入不同浓度的重组IGF－1，用粘附式细胞仪检测神经元表面神经生长因子p75受体的表达。结果 IGF－1作用后神经元p75受体的表达增加，细胞表面p75受体的增加与IGF－1的浓度在一定范围内呈现量效关系。结论 IGF－1在体外培养条件下可增加神经细胞表面p75受体的表达，IGF－1的神经营养作用机制可能与p75受体表达上调有关。     

基因转移技术在诱导移植免疫耐受中的应用策略

近年来器官移植已经取得重要进展，移植前的组织配型、供体的预处理以及移植部位的选择等手段明显减轻了移植免疫排斥反应，各种免疫制剂的长期应用进一步控制了排斥反应。但由于无关人群中，HLA相同的个体十分罕见，而免疫抑制目前的方法有许多明显的副作用，慢性移植排斥也没     

MHC I类基因逆转录病毒表达载体的构建及其在造血细胞中的表达

目的：构建BALB/c小鼠MHC I类基因的逆转录病毒表达载体并探讨该基因在C57BL/6小鼠造血细胞中，并用逆转录聚合酶链反应和流式细胞仪检测转染后基因的表达。结果：用EcoR I和XhoI双酶切鉴定证实，H2D^d基因正确插入载体pMSCV。重组逆转录病毒感染的C57BL/6小鼠造血细胞整合了BALB/c小鼠的H2D^d基因，且能转录为mRNA，在其细胞膜上有H2D^d分子的表达。结论：成功构建小鼠H-2D^d编码基因的逆转录病毒载体，该基因已稳定地整合进C57BL/6小鼠造血细胞的基因组内，且在细胞中得到表达。     

重组人胰岛素样生长因子-1分离纯化工艺的建立

目的：建立重组人胰岛素生长因子－1（rhIGF-1)大肠杆菌表达后的高效分离纯化工艺，以便获得高纯度的重组蛋白。方法：已构建好的表达载体转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导进行表达，将离心收集到的菌体用超声破壁，破壁菌液离心分离，收集上清液，进行阴离子交换层析，疏水层析和分子筛纯化，得到最终纯品，蛋白纯度用SDS－PAGE鉴定，ELISA法检测rhIGF-1含量，检测纯化后重组蛋白的生物学活性。结果：用大肠杆菌BL21表达rhIGF-1以可溶性形式存在胞浆中，经3步rhIGF-1分离纯化工艺，其工艺流程可获得具有生物学活性的高纯度rhIGF-1，为产业化及临床应用奠定基础。     

抗神经生长因子抗体对SD大鼠股骨发育的作用

目的:研究周围神经系统发育和调节功能对骨发育的影响。方法:将抗神经生长因子抗体经腹腔注射到新生SD大鼠体内,抑制周围神经系统的发育和调节功能,2d注射1次,持续两周,处理前后称量体重,处死大鼠后取全长股骨和坐骨神经。坐骨神经行Loyez髓鞘染色观察,股骨进行发育情况大体测量,并行生物力学检测。结果:药物处理对大鼠生理状态和运动能力无明显影响,处理前后处理组与对照组体重比较差异无显著性意义(P>0.05);处理组股骨冠状面中段皮质直径较对照组大(P<0.05),中径/长度比值也是处理组较大(P<0.05);生物力学检测处理组和对照组最大压应力和脆性比较均差异无显著性意义(P>0.05);坐骨神经轴突密度比较,两组差异无显著性意义。结论:采用抗神经生工因子(NGF)抗体抑制周围神经系统发育和调节功能,处理组大鼠下肢长骨的外径发育较快,但所承受最大压应力并无明显提高,说明骨皮质相对较薄,此外应力曲线斜率接近说明矿物/有机物比 例接近,提示该变化可能是发育过程中破骨细胞的功能相对活跃,导致成骨细胞代偿性成骨增多。     

胰岛素样生长因子Ⅰ在危重症中的作用研究进展

 目的：对胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)在临床的治疗作用不断被认识，但对于其在危重症中的应用尚未引起足够重视，为让大家了解这方面的国外进展情况作此综述。方法：总结近几年国外文献，从危重症患者的IGF-Ⅰ变化及IGF-Ⅰ在危重症中的治疗价值、应用前景3方面综述了主要的有关研究进展，并作展望。结果：危重症患者给予外源性IGF-Ⅰ能减少蛋白质的分解代谢，增强肝脏及肌肉摄取外源性氨基酸和葡萄糖，还能改善创伤机体肝代谢的多项指标和改善创伤后产生的免疫抑制，有助于加速临床康复。结论：IGF-Ⅰ将会在危重症的治疗中起重要作用。