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目的 克隆人野生型parkin基因并构建真核表达载体pCDNA3.1—parkin,将重组质粒转染PC12细胞获得高表达人野生型parkin基因的PC12细胞克隆。方法 从胎脑组织中提取总RNA,用RT—PCR方法获得人野生型parkin基因的全长cDNA,插入pCR2.1—TA克隆载体中进行序列测定,测序正确后将其亚克隆至表达载体pCD—NA3.1,利用脂质体将重组质粒转染PC12细胞,经G418筛选获得抗性细胞克隆,采用RT—PCR和Western Blot方法鉴定人野生型parkin基因在PC12细胞中的过表达。结果 经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒,RT—PCR和Western Blot证明经G418筛选得到的转基因PC12细胞克隆中存在人野生型parkin基因的表达。结论 成功构建了人野生型parkin基因的真核表达载体,获得了稳定表达人野生型parkin基因的PC12细胞克隆,为进一步研究parkin的生物学功能以及parkin在帕金森病发病机制中的作用奠定了良好的基础。 相似文献
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<正> 少年型震颤性麻痹是一种临床上少见的家族遗传性苍白球变性疾病。其特点为发病年龄早,自觉全身无力,全身肌张力增强,伴有轻度上肢震颤,如不经治疗,症状多有逐渐加重趋势。笔者曾见3例,现报告如下: 例1:男性,21岁,农民。15岁时即感四肢无力,两手发抖,曾在当地医院检查诊断为甲亢,经治疗无效。1988年学建筑,因两手无力发抖不能工作遂来就诊。患者既往无脑炎病史。其姐患有同样疾病。神经系统检查,患者两上肢肌张力呈铅管样增强,以腕关节明显,而震颤轻微,双上肢向前平伸时可见有类似 相似文献
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血管内皮生长因子在糖尿病大鼠视网膜中的表达 总被引:13,自引:3,他引:10
目的 :利用糖尿病大鼠动物模型 ,通过大鼠视网膜中血管内皮生长因子 ( vascular en-dothelial growth factor,VEGF)的表达情况 ,探讨 VEGF在糖尿病视网膜病变 ( diabetic retinopa-thy,DR)发展过程中作用机理。方法 :复制链脲佐菌素 ( streptozocin,STZ)糖尿病大鼠动物模型 ,取不同组、不同时期大鼠视网膜 ,利用免疫组织化学及原位杂交方法 ,检测 VEGF蛋白质及 m RNA的表达情况。结果 :1正常对照组 ( M)、血糖恢复组及糖尿病 1个月组 ( M1)大鼠视网膜均无 VEGF蛋白质及 m RNA的阳性表达 ;2糖尿病 3个月组 ( M3 )未见 VEGF m RNA表达 ,而在内核层及节细胞层有 VEGF蛋白表达阳性 ( 34%) ,此表达与胶质纤维酸性蛋白 ( GFAP)染色阳性细胞相同 ;3糖尿病 5个月组 ( M5) VEGF m RNA表达阳性率为 67%,表达位于视网膜各层 ,内界膜中的表达与 GFAP免疫组化阳性分布相同 ,VEGF蛋白质表达强阳性 ( 89%) ,主要位于内核层、节细胞层的细胞及血管上。结论 :VEGF在 STZ大鼠视网膜中的表达与病程相关 ,而且 VEGF的产生存在着自分泌和旁分泌多种途径 相似文献
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两例严重烧伤女病人,在切痂术和覆盖大张打洞异性异体皮嵌植自体皮109d和507d后,对所取移植皮片中的异体真皮进行了体外成纤维细胞的培养和染色体核型分折,在染色体标本中,均找到了XY性染色体的细胞。表明:移植皮片中仍存有供体来源的细胞.结果提示异体真皮的长期存在,并不是全身性因素影响的结果,可能是被嵌入的自体皮岛所具有的一种局部保护性机制。 相似文献
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应用临床路径对孤立肾肾后性肾衰竭患者实施心理干预 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨对孤立肾肾后性肾衰竭患者实施心理干预的有效方法.方法 将心理干预措施制成临床路径,应用于23例孤立肾肾后性肾衰竭患者.在患者入院时发放临床路径表,并让患者及家属了解.责任护士按照临床路径表进行心理干预.结果 干预前后,患者SCL-90各因子比较,差异有显著性意义(均P<0.05).结论 应用临床路径对孤立肾肾后性肾衰竭患者实施心理干预,可有效改善患者的心理状态,减轻焦虑、抑郁等负性情绪. 相似文献
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753名健康青年HBsAg阳性率调查报告乐都县人民医院检验科吴家秀乙性肝炎是目前发病率较高的传染病,对人类健康威胁甚大,HBsAg阳性是重要的传染源。对HhsAg携带者尚未进行大规模普查,本人借征兵体检之机,从1990年~1993年对753名健康青年... 相似文献