采收时间及加工方式对青钱柳叶化学成分含量及抗氧化和降血糖活性的影响

目的 比较不同采收时间、加工方式对青钱柳叶黄酮、三萜及多糖含量与体外抗氧化和降血糖活性的影响,为青钱柳的采收加工提供依据.方法 采用回流法提取青钱柳黄酮、三萜及多糖,紫外分光光度法检测含量;以青钱柳45％乙醇提取液清除DPPH·、OH·、ABTS+·能力以及对α-葡萄糖苷酶抑制能力为指标,评价青钱柳体外抗氧化活性与降血...     

Box-Behnken响应面法结合多指标综合评分法对青钱柳提取工艺的优化研究

目的 以总黄酮、总三萜及总多糖的提取率为指标,采用Box-Behnken响应面法优化青钱柳的提取工艺。方法 在单因素实验基础上,以乙醇体积分数、料液比、提取时间、温度为影响因素,以总黄酮、总三萜及总多糖的提取率总量所得的综合评分为评价指标,采用Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果 单因素试验结合Box-Behnken响应面法得到青钱柳最佳的提取工艺参数：乙醇体积分数45%,料液比1∶30,提取时间100min,温度60℃,提取次数3次;验证实验表明该工艺参数准确、可靠。结论 Box-Behnken响应面法结合多指标综合评分法可用于青钱柳的提取工艺优化,且所得最优提取工艺稳定、可行,可以为青钱柳的合理利用和资源开发奠定基础。     

指纹图谱及多成分定量结合化学模式识别法评价不同产地青钱柳质量

目的基于UPLC指纹图谱、多成分定量与化学模式识别相结合的方法,评价不同产地青钱柳质量,为其进一步开发利用提供依据。方法建立5个省20批不同产地青钱柳UPLC指纹图谱,确定共有峰,通过对照品比对指认3种化学成分并测定样品中含量;使用SPSS22.2、SIMCA软件进行聚类分析和主成分分析。结果选取了16个色谱峰作为指纹图谱的共有峰,通过聚类分析可将20批青钱柳分为6类,主成分分析与聚类分析结果基本一致;经主成分分析,5个主成分因子的累积方差贡献率为86.765%,通过主成分分析推测出产于湖北恩施的S14、S15药材样品的质量最好,产于江西修水的S4、S5、S8、S16次之;被指认的异槲皮苷、槲皮苷、阿福豆苷在20批样品中的质量分数分别为0.360%~0.884%、0.263%~1.097%、0.092%~0.403%,其中,S4、S8、S14、S15的主成分分析综合得分及3个成分含量总和均处在前4位,而S18、S20则均处在倒数前2位。结论指纹图谱、结合聚类分析及主成分分析可以更全面地评价青钱柳质量,异槲皮苷、槲皮苷、阿福豆苷可以作为青钱柳质量控制的指标性成分。     

不同产地茯苓对肾阳虚下焦水肿大鼠的利水渗湿作用研究

目的探讨不同产地茯苓对肾阳虚下焦水肿大鼠的利水渗湿作用。方法采用盐酸多柔比星与氢化可 的松联合注射的方法建立肾阳虚下焦水肿大鼠模型。将96 只造模成功大鼠随机分为模型组、阳性药组（金匮 肾气丸,2.1 g·kg-1）、10 批次不同产地茯苓水煎液组（S1~S10,7.5 g·kg-1）,另取8 只正常大鼠作为正常组,连 续灌胃给药21 d。观察记录大鼠的证候学表现及体质量变化;采用代谢笼测定大鼠24 h 尿量;采用生化试剂 盒测定24 h 尿蛋白（UP）及血清白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）水平;采用ELISA 法测定血清中抗利尿激素（ADH） 水平及肾髓质中水通道蛋白1（AQP1）、水通道蛋白2（AQP2）水平;采用层次分析法确定各单一指标对总药效 的权重,以总药效对不同产地茯苓进行聚类分析。结果与正常组比较,模型组大鼠的体质量、24 h 尿量、 血清白蛋白及总蛋白水平明显降低,24 h 尿蛋白、ADH 及AQP1、AQP2 水平明显升高,差异均有统计学意义 （P＜0.05,P＜0.01）。与模型组比较,10 批次不同产地茯苓可明显上调大鼠体质量（S1、S2、S4~S10）、24 h 尿量（S1~S10）、血清白蛋白（S1、S2、S4~S10）、总蛋白（S1、S4~S6、S8、S9）水平,明显下调24 h 尿蛋白 （S1~S10）、ADH（S1~S10）、AQP1（S1~S10）、AQP2（S1~S9）水平,差异均有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）。 聚类分析结果显示,10 批次不同产地茯苓被聚为3 大类,S2、S4 为一类,S3、S6、S7 和S8 为一类,S1、 S5、S9、S10 为一类。总药效的强弱排序为：阳性药（金匮肾气丸）＞湖北罗田（S2）、云南楚雄（S4）＞湖北恩施 （S3）、福建南平（S6）、河南商城（S7）、湖南怀化（S8）＞湖北英山（S1）、云南大理（S5）、安徽岳西（S9）、云南 丽江（S10）。结论不同产地茯苓对肾阳虚下焦水肿大鼠均可产生利水渗湿作用,可能与其调节AQP1 及 ADH-AQP2 相关通路有关,且其作用强弱存在产地差异。     

不同产地白蔹中总酚酸以及没食子酸、原儿茶醛、儿茶素和白藜芦醇的含量测定

目的建立白蔹药材中总酚酸的含量测定方法,比较不同产地白蔹中总酚酸以及没食子酸、原儿茶醛、儿茶素和白藜芦醇的含量。方法超声波提取法提取白蔹总酚酸,采用紫外-可见分光光度法,以没食子酸为对照品,0.6%FeCl_3:0.9%K_3[Fe(CN)_6](1∶1)混合溶液为显色剂,在735 nm波长处进行测定;采用HPLC法测定不同产地没食子酸等4个成分的含量。结果总酚酸在0.1696~1.3568 g/m L(r=0.9993)浓度范围内线性关系良好,平均回收率为104.0%,RSD为2.713%(n=6)。不同产地白蔹中总酚酸含量在2.51%~3.73%范围内,以浙江产白蔹含量最高;不同产地白蔹的4个成分中儿茶素含量最高,白藜芦醇和原儿茶醛的含量较低,各个产地间含量差异较大。结论建立的总酚酸含量测定方法简单快捷、稳定、重现性好,该研究为完善现有白蔹质量评价体系及后续产品的开发提供参考。     

鳖甲抗肝纤维化活性多肽部位HPLC指纹图谱

目的:建立鳖甲抗肝纤维化活性多肽部位HPLC指纹图谱,全面完整地反映其内在化学信息,为鳖甲活性多肽部位的质量控制提供依据。方法:采用高效液相色谱法,ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.03%三氟乙酸梯度洗脱,检测波长220 nm,流速1 m L·min-1,柱温25℃。结果:建立了鳖甲抗肝纤维化活性多肽部位的HPLC指纹色谱,获得了13个共有峰;利用中药指纹图谱相似度评价软件进行相似度评价,10批样品的相似度均0.9,提示鳖甲活性多肽质量较稳定。结论:该方法准确可靠,精密度、重复性和稳定性良好,能有效控制鳖甲活性多肽部位的质量,为进一步药效研究、制剂研发提供质量保证。     

HPLC-ELSD法同时测定茯苓水溶性多糖中多种单糖

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)测定茯苓水溶性多糖中单糖含量的测定方法。方法:采用Shodex Asahipak NH2P-504E色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(81∶19);流速:1.0 ml·min^-1;柱温:35℃;进样量:50μl;ELSD参数:漂移管温度:70℃,喷雾管温度:30℃,载气流速:1.1 ml·min^-1。结果:岩藻糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖的进样量分别在1.18~3.68μg(r=0.9987)、4.26~13.33μg(r=0.9973)、7.09~22.18μg(r=0.9963)、8.43~26.35μg(r=0.9970)呈良好线性关系;平均加样回收率分别为100.64%,104.01%,106.10%,105.74%,RSD分别为3.70%,2.09%,1.78%,1.74%(n=6)。结论:该方法准确可靠、操作简便、分离效果好,适用于茯苓水溶性多糖中单糖的含量测定。     

均匀设计优选维药行气那尼花颗粒挥发油的β-环糊精包合工艺

目的:优化行气那尼花颗粒中挥发油的β-环糊精(β-CD)包合工艺.方法:采用饱和水溶液法制备行气那尼花颗粒挥发油β-CD包合物.以挥发油包合率和包合物收得率为综合评价指标,采用均匀试验考察挥发油与β-CD的比例、包合温度、包合时间对包合工艺的影响.应用XRD,DSC,IR,UV及TLC对制备的包合物进行表征.结果:最佳包合工艺为挥发油与β-CD比例1∶11,包合温度60℃,包合时间1h,挥发油包合率达96.84％.表征试验证实,挥发油β-CD包合物已经形成.结论:行气那尼花挥发油β-CD包合物制备工艺稳定可行,可推广于产业化应用.     

白蔹药效成分没食子酸抑制人肝癌HepG2细胞生长及作用机制研究

目的:探讨从白蔹抗肿瘤活性部位分离得到的没食子酸对人肝癌HepG2细胞生长的影响及其作用机制。方法:用不同浓度的没食子酸处理HepG2细胞,MTT法测定没食子酸对HepG2细胞生长增殖的抑制活性;采用Hochest染色、荧光显微镜、Annexin V-FITC/PI双标记法和流式细胞术观察凋亡细胞的形态结构变化以及定性、定量检测细胞凋亡;采用JC-1染色检测HepG2细胞线粒体膜电位变化情况。结果:没食子酸在12.5～200 mg·L-1对HepG2细胞生长有明显抑制作用,且呈一定的浓度依赖性;没食子酸能诱导HepG2细胞凋亡,降低细胞线粒体的膜电位。结论:没食子酸为白蔹抗肿瘤主要活性成分之一,通过降低细胞线粒体的膜电位而诱导细胞凋亡为其抗肿瘤作用机制之一。