罗汉果果实、茎叶总黄酮的含量测定

目的:建立罗汉果果实、茎叶提取物中总黄酮的含量测定方法.方法:利用分光光度法,以山奈苷为对照,氯化铝为显色剂,在检测波长为393 nm下测定其总黄酮含量.结果:回归方程为Y=0.389 6X +0.009 7(r =0.999 8),山奈苷在0.1～0.4 mg-ml-1范围内线性关系良好,其平均回收率为97.27％,RSD=2.33％(n=6).结论:此方法简便、灵敏、准确、可靠性强,可用于测定罗汉果果实、茎叶提取物中总黄酮的含量,为其质量控制提供了检测方法.     

桂枝-生姜药对SFE-CO2萃取物体外抗甲型流感病毒（H1N1）及GC/MS研究

目的:探讨桂枝-生姜药对超临界CO2萃取物抗甲型H1N1流感病毒(2009流行株)的有效成分,以期诠释其药效物质基础。方法:采用超临界CO2萃取法提取桂枝-生姜药对的有效物质部位,通过细胞病变效应(CPE)与噻唑蓝(MTT)比色法对其抗甲型H1N1流感病毒感染狗肾细胞(MDCK)的作用进行比较研究,并用GC/MS技术分析鉴定其化学成分。结果:桂枝-生姜超临界CO2萃取物对甲型H1N1流感病毒具有一定抑制作用,且成明显的量-效关系,其半数抑制浓度(IC50)为63.6μg·mL-1,治疗指数(TI)为1.2,阳性对照药利巴韦林对流感病毒直接灭活作用的IC50为453.2μg·mL-1,TI为1.0;从桂枝-生姜药对的超临界CO2萃取物中分离鉴定出55个成分,占成分含量的97.29%,其桂皮醛占62.85%,2-甲氧基肉桂醛占16.03%,邻苯二甲酸二异辛酯占7.99%,主要为醛、酮、烯、酯类化合物。结论:桂枝-生姜药对超临界CO2萃取物具有一定的抗甲型H1N1流感病毒作用,作用形式为直接灭活,且成剂量依赖性。     

新老工艺的金玄痔科熏洗散4种成分含量比较

目的:建立测定金玄痔科熏洗散(JZXS)及新工艺制备的金玄痔科熏洗散(AIG)中绿原酸、咖啡酸、金丝桃苷和木犀草素的HPLC分析方法。方法:采用Venusil XBP C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温30℃;流速1.0mL·min-1;流动相:乙腈-0.4%磷酸水溶液,梯度洗脱;进样量10μL;检测波长为335 nm。结果:绿原酸、咖啡酸、金丝桃苷、木犀草素的线形范围分别和回归方程分别为0.760～4.560μg(r=0.999 9),Y=2 254.9 X+131.66;0.058～0.348μg(r=0.999 9),Y=3 610.8X+7.913 5;0.046～0.276μg(r=0.999 9),Y=1 446.7 X+2.124 3;0.024～0.144μg(r=0.999 9),Y=2 344.5 X-0.716 2;JZXS平均加样回收率(n=5)分别为97.4%(RSD=1.8%),98.6%(RSD=2.3%)和97.8%(RSD=2.9%);AIG平均加样回收率(n=5)为97%(RSD=1.2%),97.3%(RSD=2.5%),98.2%(RSD=2.7%)和96.9%(RSD=1.9%)。结论:该方法专属性好,准确度高,为进一步完善JZXS的质量标准提供了科学依据,并为该传统制剂二次开发为创新中药品种奠定了基础。     

菝葜抗炎活性部位的血清药物化学研究

摘要目的对菝葜抗炎活性部位进行血清药物化学研究,探讨菝葜药效物质基础。方法建立菝葜提取物高效液相色谱（HPLC）分析法,通过HPLC图分析比较空白血清、含药血清、菝葜提取物的成分的差异,确定菝葜提取物大鼠灌胃后血中移行成分。结果在菝葜提取物含药血清中发现了45种入血成分,其中25种为原型成分,20种可能为原型成分的代谢产物。结论45种入血成分可能是菝葜的体内直接作用物质,对其进行深入研究将有助于阐明菝葜的药效物质基础及药效机制。     

菝葜中抗炎活性成分的虚拟筛选

目的利用分子对接技术对菝葜中抗炎活性成分进行虚拟筛选,通过计算机模拟方式寻找最有合成价值的分子化合物。方法选取中药菝葜中18个化学成分作为配体,11个与炎症密切相关的靶标作为受体,包括腺苷酸活化蛋白激酶、过氧化物酶体增长物激活体、丝裂原活化蛋白激酶、磷酸二酯酶抑制剂、环氧合酶1、环氧合酶2、脂氧合酶、基质金属蛋白酶、诱导型一氧化氮合酶、磷脂酶A2、巨噬细胞移动抑制因子,将二者进行分子对接。结果从18个菝葜所含化合物分子与11个炎症相关靶标的分子对接中筛选出6个分子作为候选化合物,分别是:花旗松素、山奈酚-7-O--D-葡萄糖苷、槲皮素3-O--L-鼠李糖苷、白藜芦醇、薯蓣皂苷和菝葜皂苷元。选择其中的花旗松素进行验证实验,取得了很好表现。结论本方法对辅助发现菝葜中抗炎活性成分起到了积极推动作用。     

HPLC法测定复方降脂颗粒中丹酚酸B和大黄酚的含量

目的:建立测定复方降脂颗粒中丹酚酸B和大黄酚含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent Eclipse XDB C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相分别为甲醇-乙腈-0.1%甲酸溶液(25∶10∶65,V/V/V)、乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,检测波长分别为286、284 nm。结果:丹酚酸B和大黄酚的进样量分别在1.91¹9.12、0.014 419.12、0.014 4⁰.144 0μg范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.999 8、0.999 9);二者精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;平均加样回收率分别为98.58%(RSD=0.97%,n=9)、97.71%(RSD=0.59%,n=9)。结论:该方法简单、准确、重复性好,可用于复方降脂颗粒的质量控制。     

氢化物—非色散原子荧光光谱法测定脑脉通冲剂中的砷含量

本文采用氢化物-非色散原子荧光光谱法测定了脑脉通冲剂中的砷含量,本方法简便、快速、准确,平均回收率为99.1％。     

菝葜抗炎有效部位群及其单体成分体外抗氧化活性研究

目的考察菝葜抗炎有效部位群及其单体的抗氧化作用,探讨菝葜抗炎作用的可能机制。方法采用DPPH自由基、羟自由基反应体系、FRAP法分别测定菝葜有效部位群及落新妇苷、花旗松素、槲皮素、芦丁、白藜芦醇、黄杞苷等6个单体成分的自由基清除能力和铁离子还原能力;建立H202诱导大鼠红细胞膜损伤模型,孵育后检测药物对红细胞溶血抑制率和红细胞悬液中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响。结果菝葜有效部位群及其6个单体成分均表现出抗氧化能力。在DPPH实验中,菝葜有效部位群和花旗松素的清除作用明显强于其他药物,IC_(50)分别为13.05 mg/L、11.83 mg/L,略弱于维生素C(Vit C)(IC_(50)为6.93 mg/L);在羟自由基清除率的测定中,菝葜有效部位群及其6个单体均表现出一定的清除作用,但弱于Vit C;在FRAP法中,槲皮素还原Fe~(3+)的能力最强(FRAP值(183.78±8.01)mmol/g),优于Vit C(FRAP值(85.69±4.98)mmol/g),其次为花旗松素(FRAP值(56.73±6.25)mmol/g);在H202诱导大鼠红细胞膜损伤实验中,与模型组比较,菝葜有效部位群、花旗松素、槲皮素及白藜芦醇对红细胞的溶血抑制率明显升高、红细胞悬液中MDA含量显著降低(P0.01)、SOD及GSH-Px活性显著升高(P0.01)。结论菝葜抗炎有效部位群及其6个单体均具有体外抗氧化作用,并对红细胞膜具有保护作用,推测菝葜抗炎效应与其抗氧化特性有关。     

菝葜抗炎有效部位群的效应成分研究

目的探讨菝葜抗炎有效部位群中落新妇苷、花旗松素、槲皮素、芦丁、白藜芦醇、黄杞苷、薯蓣皂苷、薯蓣皂苷元、菝葜皂苷元、甲基原薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷、纤维薯蓣皂苷的体外抗炎活性与免疫调节作用,为诠释菝葜的药效物质基础提供依据。方法采用脂多糖(LPS)刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7模型,酶联免疫法(ELISA)检测12个单体成分对白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)释放的影响,考察其抗炎活性;采用CCK-8法检测各成分对小鼠脾淋巴细胞体外增殖水平及ELISA检测LPS刺激脾淋巴细胞后各成分对白介素-2(IL-2)、TNF-α和干扰素-γ(IFN-γ)释放的影响,考察其免疫调节活性。结果在LPS诱导的RAW264.7细胞模型中,除白藜芦醇外,其余11种化合物对IL-6都有一定的抑制作用,而落新妇苷还呈现出双向调节作用;落新妇苷、槲皮素、白藜芦醇、原薯蓣皂苷、薯蓣皂苷及菝葜皂苷元6种化合物对IL-1β具有抑制作用;5种黄酮类单体及白藜芦醇对TNF-α的抑制作用极为显著,而6种皂苷类成分对TNF-α则有促进作用;在脾淋巴细胞模型中,12个单体成分对脾淋巴细胞均有明显的增殖作用,对相应的炎症因子也有明显的抑制作用。结论落新妇苷等12个单体成分均具有抗炎及免疫调节作用,可能是菝葜抗炎有效部位群发挥作用的的主要效应成分。     

神农消颗粒的质量标准研究

目的：建立神农消颗粒的质量标准。方法：采用薄层色谱法对处方中虎杖、半枝莲、重楼进行鉴别；应用薄层扫描法测定虎杖中大黄素的含量。结果：定性鉴别分离度好、专属性强；大黄素的含量测定线性范围为0．033～1．056μg(r=0．9998)，平均回收率为96．37％，RSD为3.74％。结论：该法简便、准确，可用于神农消颗粒的质量控制。