丹参预处理对肝脏缺血再灌注后胃肠激素的影响

目的探讨丹参预处理对肝脏缺血再灌注后胃肠激素的影响。方法前瞻性研究2010年5月至2012年5月广州军区武汉总医院收治的32例肝病患者,对所有患者行肝部分切除术,术中行第一肝门阻断。按随机数字表法将32例患者分为2组：缺血再灌注组（IR组,15例）和丹参预处理组（SM组,17例）,两组患者均在术中行肝部分切除,以P6ngle法行第一肝门阻断约15～20min,IR组术前3d给予30mL／d生理盐水静脉滴注,SM组术前3d给予丹参注射液30mL／d静脉滴注;12例开腹手术而未行肝门阻断者作为阴性对照组（s0组）;5例健康志愿者作为正常对照组（CO组）。分别测定各组胃动素、胆囊收缩素、血管活性肠肽、胰泌素水平变化情况。多组比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD—t检验。结果c0组胃动素水平为（347±14）μg/L,SO组术后24、48、72h胃动素水平分别为（324±13）μg/L、（345±12）μg/L和（345±13）μg/L,IR组分别为（307±10）μg/L、（316±9）μg/L和（338±13）μg/L,SM组分别为（313±7）μg/L、（337±12）μg/L和（345±12）μg/L。s0组术后24h胃动素水平显著低于c0组（t=5．25,P〈0．05）;IR组术后24、48、72h胃动素水平显著低于同时相点sO组（t=10．05,8．09,2．07,P〈0．05）;SM组胃动素表达水平在术后24、48h显著低于SO组（t=9．83,2．28,P〈0．05）,但是至术后72h与S0组比较,差异无统计学意义（t=0．36,P〉0．05）;SM组胃动素表达水平在术后24、48、72h显著高于IR组（t=3．80,7．10,2．35,P〈0．05）。CO组胆囊收缩素水平为（2．53±0．06）μg/L,SO组24、48、72h胆囊收缩素水平分别为（3．28±0．09）μg/L、（2．52±0．09）μg/L和（2．54±0．16）μg/L,IR组分别为（4．34±0．21）μg/L、（3．63±0．31）μg/L和（3．25±0．09）μg/L,SM组分别为（3．71±0．28）μg/L、（3．28±0．11）μg/L和（2．53±0．09）μg/L。SO组术后24h胆囊收缩素水平显著高于c0组（t=4．33,P〈0．05）;IR组术后24、48、72h胆囊收缩素水平显著高于同时相点的s0组（t=9．32,5．37,2．16,P〈0．05）;SM组胆囊收缩素表达水平在术后24、48h显著高于s0组（t=7．21,3．42,P〈0．05）,但是至术后72h与S0组比较,差异无统计学意义（t=0．29,P〉0．05）。SM组胆囊收缩素表达水平在术后24、48、72h显著低于IR组（t=5．62,4．63,3．57,P〈0．05）。CO组血管活性肠肽水平为（11．8±1．6）μg/L,SO组术后24、48、72h血管活性肠肽水平分别为（21．5±3．8）μg/L、（12．2±1．6）μg/L和（11．9±1．7）μg/L,IR组分别为（29．7±4．1）μg/L、（22．9±4．2）μg/L和（18．8±2．8）μg/L,SM组分别为（22．4±4．1）μg/L、（16．4±2．3）μg/L和（12．1±1。6）彬L。s0组术后24h血管活性肠肽水平显著高于C0组（t=3．59,P〈0．05）;IR组患者血管活性肠肽表达水平在术后24、48、72h显著高于同时相点S0组（t=6．35,3．22,2．36,P〈0．05）。SM组患者血管活性肠肽表达水平在术后24、48h显著高于s0组（t=5．04,2．33,P〈0．05）,但是至术后72h与s0组比较,差异无统计学意义（t=0．18,P〉0．05）。SM组患者血管活性肠肽表达水平在术后24、48、72h显著低于IR组（t=4．27,3．87,2．45,P〈0．05）。CO组胰泌素水平为（75±5）μg/L,SO组术后24、48、72h胰泌素水平分别为（98±6）μg/L、（76±4）μg/L和（76±4）μg/L,IR组分别为（129±6）μg/L、（102±8）μg/L和（89±6）μg/L,sM组分别为（104±8）μg/L、（90±6）μg/L和（74±4）μg/L。S0组术后24h胰泌素水平显著高于CO组（t=3．27,P〈0．05）;IR组患者胰泌素表达水平在术后24、48、72h显著高于同时相点s0组（t=5．20,2．94,1．77,P〈0．05）。SM组患者胰泌素表达水平在术后24、48h显著高于s0组（t=4．16,2．54,P〈0．05）,但是至术后72h与SO组比较,差异无统计学意义（t=0．23,P〉0．05）。SM组患者胰泌素表达水平在术后24、48、72h显著低于IR组（t=5．13,4．32,2．87,P〈0．05）。结论肝门阻断所致胃肠道淤血可导致同期胃动素表达下调,胆囊收缩素、血管活性肠肽、胰泌素表达上升;丹参可能通过改善微循环、减轻胃肠道水肿,改善胃肠运动功能,间接影响胃肠激素的分泌表达。     

谷氨酰胺强化营养支持治疗重症急性胰腺炎疗效的Meta分析

目的 系统评价谷氨酰胺强化营养支持治疗重症急性胰腺炎（SAP）的疗效.方法 以“glutamine”、“severe acute pancreatitis＂、“SAP”、“谷氨酰胺”、“重症急性胰腺炎”等为检索词检索PubMed、Embase、HighWire、Cochrane Central Register of Controlled Trials、万方数据库、中国期刊全文数据库（CJFD）、中国生物医学文献数据库（CBM）.检索时间为各数据库建库至2014年3月.最终纳入常规治疗对比谷氨酰胺强化营养支持治疗SAP疗效的随机对照试验,再由2名研究者独立筛查文献和提取数据,并进行文献质量评价,用RevMan 5.2软件进行Meta分析.所纳入研究中SAP的诊断标准为“Atlanta修订标准”或“中华医学会外科学分会胰腺外科学组SAP诊断与治疗指南”.计数资料采用相对危险度（RR）及95％可信区间（95％ CI）进行分析,计量资料采用标准均数差（SMD）及95％CI进行分析.采用I2对异质性进行定量分析.结果 共纳入符合标准的文献10篇,均为前瞻性随机对照研究.累计样本量433例,其中行常规治疗患者218例（对照组）,行谷氨酰胺强化营养支持治疗患者215例（实验组）.Meta分析结果显示：与对照组比较,实验组SAP患者Alb水平显著升高、C反应蛋白水平显著降低、住院时间显著缩短（SMD=1.00,-0.93,-0.71,95％CI：0.50～1.50,-1.25～-0.61,-1.10～-0.32,P＜0.05）,并发症发生率和病死率显著降低（RR =0.56,0.34,95％CI：0.41 ～0.77,0.15～0.76,P＜0.05）,且不增加患者住院费用（SMD =0.03,95％CI：-0.88 ～0.95,P＞0.05）.结论 谷氨酰胺强化营养支持治疗较常规治疗SAP的疗效具有一定优势.     

内皮抑素转基因治疗裸鼠人肝癌的实验研究

目的构建表达人内皮抑素的重组真核表达载体,研究阳离子脂质体介导转染内皮抑素基因对裸鼠人肝癌生长的抑制作用。方法将含有IL-2信号肽和人内皮抑素基因全长cDNA插入真核表达载体pcDNA3.0产生重组质粒pCD-sEndo,脂质体Dosper介导将pCD-sEndo质粒转染至人肝癌细胞株SMMC-7721,RT-PCR和Western blot检测内皮抑素的表达。建立裸鼠人肝癌模型,按随机数字表法随机分成4组,分别瘤内注射Dosper+pCD-sEndo(Dosper+pCD-sEndo组)、Dosper+pcDNA3.0(Dosper+pcDNA3.0组)、Dosper(Dosper组)和生理盐水(生理盐水组),分时段测量肿瘤的体积;注射结束后1周处死动物,切取肿瘤,免疫组化检测肿瘤组织微血管密度(MVD),TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡指数(AI)。结果成功构建携带人内皮抑素基因和IL-2信号肽的真核表达质粒pCD-sEndo并经酶切鉴定证实;体外转染内皮抑素基因的SMMC-7721细胞,RT-PCR可以检测到内皮抑素mRNA表达,Western blot显示转染细胞培养液中有内皮抑素蛋白表达,而转染空白质粒者中没有;体内实验中,Dosper+pCD-sEndo组裸鼠肿瘤生长受抑,于第12 d起明显小于Dosper+pcDNA3.0组、Dosper组和生理盐水组(P<0.05)。Dosper+pCD-sEndo组平均MVD为6.2±2.5,明显低于生理盐水组(32.8±6.4)、Dosper组(27.8±6.4)和Dosper+pcDNA3.0组(25.5±5.5),P<0.05;Dosper+pCD-sEndo组肿瘤细胞平均AI为24.5±7.3,生理盐水组、Dosper组和Dosper+pcDNA3.0组分别是7.6±2.5、9.5±3.0和11.2±3.6,前者明显高于后三者(P<0.05)。结论瘤内注射携带内皮抑素基因的阳离子脂质体,可减少裸鼠体内种植性人肝癌的微血管数目,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长。     

丹参用于肝切除围手术期预处理的临床研究

应用Ｆｕｒａ－２单细胞显微荧光探测技术观察活血去瘀中药丹参注射液对６８例肝叶／段切除病人肝缺血再灌注期肝细胞内游离钙浓度影响的临床研究，同期观察组织脂质过氧化自由基ＲＯＯ．电子自旋共振信号，肝细胞超微结构病理改变，及手术前后血清天门冬氨基转移酶线粒体同苛酶ｍ－ＡＳＴ活力变化。     

过氧化物诱导LO2细胞凋亡时Fas mRNA表达及Ca 2+ / 流变化的单细胞分析

目的　探讨过氧化物所致肝细胞凋亡时Fas基因表达与Ca2 流变化的相互关系。方法　应用全细胞膜片钳单细胞逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术进行H2 O2 诱导人类正常肝细胞LO2细胞FasmRNA表达的单细胞分析 ,应用全细胞膜片钳显微荧光单细胞胞浆游离钙浓度 ([Ca2 ]i)测量技术、流式细胞术、扫描电镜观察同期瞬时Ca2 流变化及早期凋亡 (Annexin V )细胞指数和细胞膜变化。结果　H2 O2 作用 2h单个LO2 细胞电泳图分析可见Fas1mRNA特异性扩增条带 ;单细胞Ca2 流测定R值明显增强 (P <0 .0 1,t=2 2 .2 42 4) ,[Ca2 ]i骤升为 1115nmol/L± 2 2 7nmol/L ,与对照组的149nmol/L± 2 3nmol/L比较差异有显著性意义 (P <0 .0 1,t=13.37) ,Annexin V 细胞指数亦明显上升 (P <0 .0 1,t=48.41) ,细胞膜起泡。结论　H2 O2 诱导LO2 细胞凋亡时细胞内Ca2 失衡可能导致Fas死亡基因的活化。     

肝门阻断再灌对肝组织Fas，穿孔素，bcl—2mRNA表达及丹参预处理的影响

目的探讨丹参对肝门阻断再灌后的肝组织Fas、穿孔素(perforin)、bcl-2mRNA表达的影响及意义.方法45例病人随机分为正常对照组(I组,5例),缺血再灌组(II组,20例),丹参处理组(III组,20例).II组、III组病人施行肝门阻断15min及肝叶(段)切除术.分别于再灌40min时应用逆转录多聚酶链反应技术结合图像分析处理检测肝组织Fas,perforin,bcl-2mRNA表达.结果I组肝组织Fas,perforinmRNA表达极弱(0.144±0.037;0.0160±0.032),bcl-2mRNA有表达(1.877±0.149);II组Fas,perforinmRNA表达明显增强(0.928±0.135;1.099±0.364),bcl-2mRNA表达较弱(0.240±0.090);III组Fas,perforinmRNA表达(0.347±0.081;0.454±0.0166)显著低于II组(P<0.01);而bcl-2mRNA表达(0.938±0.325)高于II组(P<0.01).结论肝缺血再灌可能触发细胞介导的细胞毒效应的两种主要方式(Fas和穿孔素途径)损伤靶细胞;而丹参可能因抗氧化作用和钙阻滞作用阻断Fas和穿孔素的交叉作用途径,稳定细胞膜、细胞器膜完整性,协同bcl-2基因表达,综合发挥细胞保护作用.     

肝胆管结石合并肝内感染灶的外科治疗（附62例报告）

目的 探讨肝胆管结石合并肝内感染灶的治疗方法。方法 回顾性分析2010年1月至2015 年12 月间,广州军区武汉总医院采用经皮经肝胆管引流（PTCD）、肝叶切除术治疗肝内胆管结石及肝内感染灶的62例病人的临床资料。结石及感染灶分布于双侧肝内胆管者12例（19.4%）,局限分布于左外叶10例（16.1%）,左半肝23例（37.1%）,右前叶1例（1.6%）,右后叶8例（12.9%）及右半肝8例（12.9%）。对脓肿直径>3 cm,在超声引导下经皮肝脓肿穿刺抽脓或穿刺置PTCD管引流。病情稳定,全身情况改善后行确定性手术,包括肝胆管结石病灶及脓肿切除或引流。结果 术后并发症发生率：切口感染9例（17.3%）、粘连性肠梗阻4例（6.5%）、胆漏2例（3.2%）、胆道出血1例（1.6%）、肝断面及膈下感染1例（1.6%）、严重腹腔感染1例（1.6%）,无肝功能衰竭。术后因为严重腹腔感染致全身多器官功能衰竭死亡1例（1.6%）。随访6个月至5年,随访率80.7%（50/62）。5年内疗效优良者占88.7%（55/62）,8.1%（5/62）病例因未行规则性肝切除,遗留病变的胆管,结石再发、胆道反复感染而需进一步手术处理。结论 遵循个体化原则,充分引流感染灶,同时或择期进行肝胆管结石并感染病灶切除是治疗肝胆管结石合并感染的最佳方案。     

缺血再灌注时的胰岛素抵抗现象

胰岛素抵抗是2型糖尿病、冠心病、高血压等慢性疾病的共同机制,以前胰岛素抵抗的研究主要关注于与这些慢性病之间的联系.近年来,胰岛素抵抗与缺血再灌注间的研究逐渐成为新点、热点之一,与患者的预后密切相关.本文根据文献报道,对两者之间的关系作一综述.     

急性非结石性胆囊炎的外科治疗

急性非结石性胆囊炎临床相对少见,发病人群特殊,具有起病急、进展快,胆囊坏疽、穿孔发生率高,病死率高的特点,及时诊断和正确行外科干预与预后密切相关。在该病的诊断中影像学检查特别是CT检查具有重要价值。在治疗中需根据病人的个体情况,遵从损伤控制理论,分别选用经皮经肝胆囊穿刺引流术或经腹腔镜（开腹）胆囊切除术,可达到较好的治疗效果。