膝关节不稳早期软骨下骨生化学和生物力学的变化

目的:了解膝关节不稳早期软骨下骨生化学和生物力学的变化。方法:复制兔膝关节不稳模型,利用Instron力学材料机进行胫骨髁软骨主要负重区相对应的软骨下骨的压迫实验,测定软骨下骨的压缩强度和压缩模量。同时测定软骨下骨的糖醛酸、羟脯氨酸和吡啶并林的含量。结果:软骨下骨的压缩强度和压缩模量在模型术后1周分别平均下降40%和33.7%,均与正常对照有非常显著差别(P<0.01)。但是随着时间的延长,软骨下骨压缩强度和压缩模量却呈现逐渐增高的趋势。软骨下骨糖醛酸及羟脯氨酸含量在模型术后升高,而软骨下骨吡啶并林含量于模型术后1周却迅速下降69.4%。随后其含量逐渐上升。结论:膝关节不稳早期即可出现软骨下骨生物力学和生化学的改变,这可能与软骨下骨在异常应力下骨代谢的改变有关。     

取向性关节软骨细胞外基质源性支架对负载软骨细胞生物学行为的影响

目的：观察取向性关节软骨细胞外基质源性支架对负载软骨细胞的黏附、增殖、分布及排列的影响。方法：利用定向结晶及冷冻干燥技术制备猪关节软骨细胞外基质源性取向支架。分离、培养犬关节软骨细胞,接种在支架上体外培养,CCK-8试剂盒检测细胞在支架上的黏附和增殖,倒置显微镜、荧光显微镜、扫描电镜及H＆E染色观察软骨细胞在支架上的形态、分布和排列情况,并以接种在非取向支架上的软骨细胞的生物学特性作为对照。结果：软骨细胞在两种支架上均能较好的黏附生长,大部分细胞呈圆球形;但在取向支架上增殖比在非取向支架上快（P〈0.05）;并且在取向性支架上软骨细胞能沿着支架孔道的取向性生长,在支架内部分布均匀,类似天然软骨组织的柱状结构;而在非取向性支架内软骨细胞呈无序排列,分布不均匀,支架内部细胞数量较少。结论：取向性软骨细胞外基质源性支架利于软骨细胞黏附、增殖,能引导软骨细胞分布排列呈类似于天然软骨细胞的柱状排列方式,是一种较理想的软骨组织工程支架。     

四种热休克蛋白/肽混合物预防小鼠肉瘤发生、发展的作用研究

Objective To investigate the anti-tumor effects of the mixture of four heat shock protein/ peptides in mouse model for sarcoma. Methods The mixture of four subtype heat shock protein/peptides were extracted from mouse sarcoma cell line S180 and MCA-207 by molecular chromatography Sephacryl S-200HR and identified by SDA-PAGE and Western blot. Balb/c mice were immunized by the mixed heat shock protein/peptides with different dose, and then S180 and MCA-207 sarcoma cell line was wafted after vaccine in Balb/c or C57 mice. The disease-free survival and tumor growth inhibition rates were examined. Immune response eliciat by heat shock protein/peptides were detected. Sub-group of T lymphocyte was as-sessed by FACS; CTL by lactate dehydrogenase release assay anti IFN-γ by ELISPOT assay. Results The mixture of heat shock pretein/peptides and HSP-60, HSP-70, Gp-96 were isolated by chromatography and affinity chromatography separately. The mice vaccinated by the mixture of heat shock protein/peptides has the most protective results. In S180 model, the disease-free survival for tumor was 41.1%, the tumor growth inhibition rates was 83.3%. In MCA-207 model, the disease-free survival was 50.0%, the tumor growth inhi-bition rates was 79.0%. After immunization, CD8+, Nk cell, and IFN-γ were all increased. CTL was 42.4% (B/T-=40). Conclusion These animal vaccination/immunization strategies show that the mixture of heat shock protein/peptides as vaccine can induce immuno-activity against sarcoma and reduce tumor burden pro-phylactically, it may be possible to develop a specialized sarcoma vaccine for clinical treatments.     

四肢战伤高发生率、高伤残率特点及致残原因分析

 目的 分析四肢战伤发生率高、伤残率高的特点及其致残原因,提出战时四肢伤救治的措施。方法 以国内外既往十余次战争中发生的四肢战伤资料为研究对象,应用文献调研、专家咨询、统计描述、逻辑学归纳等方法,研究既往战争中四肢战伤发生率高、死亡率低、伤残率高的特点。结果 提出了减少四肢战伤伤残率的卫勤措施,包括强化火线抢救的时效性、早期进行伤道清创等。结论 有助于降低四肢战伤的致残率,恢复部队战斗力具有参考价值。     

缓慢自然复温冷冻干燥异体骨修复实验性骨缺损

作者首次采用缓慢自然复温的方法，对异体骨进行冷冻干燥。通过Ｘ线片和组织学方法了解其骨缺损修复能力，并与自体骨和新鲜异体骨对比。结果显示，冷冻干燥异体骨骨缺损修复能力与自体骨相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。新鲜异体骨与自体骨相比３周时无显著性差异（Ｐ＞０．０５），８周时有显著性差异（Ｐ＜０．０５），可能与免疫潜伏期有关。     

小切口漆关节粘连松解术后及连续被动活动治疗膝关节僵直

研究了治疗膝关节粘连僵直的最佳手段。方法：设计小切口膝关节粘连，僵直松解术后手术方式，手术方法，手术器械。该手术方式分为单侧小切口；内外两仙切口；及内外侧切口加关节后切口。切口可在髌骨上内上缘或髌骨外上缘及关节后侧分别做一长约２ｃｍ的切口，有髌股关节髌上囊及两侧股骨髁的粘连处进行分离。     

自体软骨细胞团块植入修复兔陈旧性关节软骨缺损的实验研究

目的 观察自体软骨细胞团块植入对兔关节软骨缺损的修复作用. 方法 24只成年新西兰大白兔48侧膝关节,随机分为三组(n=16)并制备双膝关节股骨滑车软骨缺损模型.空白对照组无特殊处理,骨膜移植组将骨膜覆盖缺损并缝合于缺损两侧的股骨髁上,实验组将自体软骨细胞团块植入缺损中.术后3、6个月分别取材(n=8),进行大体和组织学观察,修复组织行Wakitani评分并进行比较. 结果实验组共成功取材11个缺损关节,9个为透明软骨修复,2个因植入细胞生长状态差未修复;骨膜移植组修复组织为纤维软骨或纤维组织,修复组织薄,基质异染弱;空白对照组仅有少量纤维组织填充缺损底部.修复组织Wakitani评分:实验组3.82分,骨膜移植组6.71分,空白对照组9.23分,差异有统计学意义(F=5.96,P=0.00). 结论自体软骨细胞团块植入能较好修复关节软骨缺损,修复的质量与植入细胞的质量有关.     

松质骨螺钉骨水泥强化的生物力学和组织学研究

目的通过动物实验观察不同骨水泥强化松质骨螺钉的生物力学和组织学变化动态,为骨质疏松骨折患者内固定提供理论基础。方法在10只杂种犬胫骨近端制作松质骨螺钉植入的动物模型,分别采用碳酸化羟基磷灰石水泥(CHC)和聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)强化,分别于术后5d、4、8、12和16周处死动物,观察螺钉拔出的生物力学和组织学变化。结果CHC强化的螺钉拔出力随手术后时间的延长而逐渐升高,16周时达到(512.5 14.5)N,而PMMA强化组螺钉拔出力则随手术后时间的延长而逐渐降低。CHC-骨界面结合紧密,并且随时间延长出现CHC降解和骨长入,而PMMA-骨界面形成一层纤维组织。结论CHC强化能够提高松质骨螺钉植入体内的稳定性,并且随植入时间延长而逐渐升高。     

可调式人工椎体的改进及其在胸腰椎脊柱结核中的应用

目的从骨组织工程学角度改进可调式人工椎体的结构和生物学性能,用于治疗胸腰椎椎体结核。方法用钛合金制成的框架式结构的可调式人工椎体,表面喷涂羟基磷灰石。在彻底切除病灶,恢复病椎骨膜功能,营造病椎局部良好血运环境的基础上,撑开椎体、纠正脊柱后凸畸形、固定并维持脊柱稳定性、植骨重建骨性结构。治疗破坏较重的胸腰椎椎体结核患者19例,胸椎体结核9例,腰椎体结核10例。其中完全截瘫4例,不完全截瘫7例,有马尾神经综合征8例。均有后凸畸形20°～45°,平均32.7°。合并肺结核15例。术后定期行X线和CT检查观察手术节段稳定性和融合情况。结果随访12～30个月,其中18个月以上11例,平均16个月。2例完全截瘫患者,1例感觉部分恢复,截瘫指数5;1例感觉、运动及二便功能部分恢复,截瘫指数3;余17例完全恢复。后凸畸形纠正20°～35°,平均29.5°。所有患者末次随访骨重建理想、人工椎体稳定,ESR、血象等基本正常,无一例复发。结论在全程、规律、足量、联合的抗结核化疗保护下,彻底切除结核病灶,应用改进的可调式人工椎体治疗由胸腰椎结核引起的严重骨缺损及其并发症是可行的。     

人脂肪干细胞结合微载体在生物反应器中向软骨细胞分化

[目的]探索在旋转生物反应器内,应用微载体技术快速扩增并向软骨分化人脂肪干细胞。[方法]将人脂肪干细胞结合Cytodex3微载体在旋转的生物反应器(RCSS)内进行动态培养,应用倒置显微镜和扫描电镜对微载体表面的脂肪干细胞进行动态观察,并对收获的脂肪干细胞进行Safran in-O、tolu id ine b lue染色等组织化学染色及Ⅱ型胶原的免疫化学染色分析。[结果]脂肪干细胞于24 h内贴附于Cytodex3微载体表面,细胞形态为短梭形,随时间的延长,贴附于微载体的细胞逐渐增多,到培养后期,细胞密度可达最初接种的19倍左右,在微载体上收获的细胞进行番红花O、阿利新蓝染色呈阳性,Ⅱ型胶原染色阳性,均强于对照组。[结论]利用微载体细胞培养技术可简便快速地在体外扩增脂肪干细胞,并成功实现向软骨细胞分化。