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81.
目的:制备抗人CD1d单克隆抗体(mAb)并研究其结合特性。方法:应用淋巴细胞杂交瘤技术制备鼠源性抗人CD1d mAb。用免疫荧光染色和流式细胞术鉴定其识别位点。结果:获得1株分泌抗CD1d mAb的杂交瘤细胞株。mAb的腹水ELISA效价达10-6,为IgG1亚类,可识别293T细胞转染的CD1d分子的α1结构域。结论:获得1株可特异性识别CD1dα1结构域的mAb,为进一步研究CD1d的结构及功能提供了手段。 相似文献
82.
肿瘤坏死因子 (TNF)是一种单核因子, 主要由激活的单核和巨噬细胞产生, 具有杀伤或抑制肿瘤细胞, 促进T细胞、B细胞的增殖, 参与炎症反应和免疫调节等多种生物学效应。TNF产生异常与多种疾病有关, 如类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮等 [1], 患者血清TNF的水平均升高, 因此, 相似文献
83.
目的 探讨9.1C3分子对CD2和CD3诱导的PBMC杀伤作用的影响及其作用机制。方法 以活化PBMC为效应细胞,采用重导向杀伤实验(redirected cytotoxicity assay,RCA),观察9.1C3对CD2、CD3介导效应细胞杀伤P815细胞作用的影响。以Jurka细胞为模型,用相应的抗体刺激细胞,通过荧光分光光度计,测定9.1C3对CD2、CD3诱导[Ca^2 ]i升高的影响。结果 9.1C3 mAb能显著抑制CD2 mAb介导活化PBMC对P815细胞的杀伤作用,但对CD3 mAb介导杀伤的抑制作用较弱。以Jurkat细胞为模型,发现CD2 mAb经羊抗鼠Ig(goat anti mouse Ig,GAM Ig)交联后能诱导[Ca^2 ]i的升高,当同时加入9.1C3 mAb时,[Ca^2 ]i的升高受到抑制;CD3 mAb在没有GAM Ig交联时即能引起[Ca^2 ]i的升高,而9.1C3 mAb对CD3 mAb诱导[Ca^2 ]i的升高有赖于GAM Ig的交联。结论 9.1C3分子对CD2和CD3介导的杀伤的抑制程度不同。抑制杀伤细胞脱颗粒依赖的[Ca^2 ]i升高可能是9.1C3分子抑制活化型受体CD2介导细胞毒作用的作用机制之一。 相似文献
84.
用于构建抗人TNF嵌合抗体的鼠单克隆抗体中和活性的鉴定 总被引:3,自引:3,他引:3
目的:筛选构建抗人TNF嵌合抗体所需高质量的鼠源性mAb。方法:从一组分泌抗人TNF mAb杂交瘤细胞中,挑取3株D2、E6和F6,按常规方法制备腹水。用饱和硫酸铵盐析后,分别用蛋白A亲和层析和QFF阴离子交换层析法,纯化D2株分泌的mAb(IgG2b)和E6和F6株分泌的mAb(均为IgGl)。纯化前后,3株mAb的效价,采用间接ELISA法测定。纯化的3株mAb的中和活性,通过它们对TNF诱导的L929细胞死亡和上调ECV304细胞上ICAM-1表达的抑制作用来进行鉴定。结果:间接ELISA检测表明,3株mAb D2、E6和F6纯化前的效价分别为1×10-6、1×10-7和1×10-7,纯化后效价分别为0.01、0.002和0.002 mg/L。mAb中和活性的检测表明,浓度为0.16、0.40和0.50 mg/L的D2、E6和F6,可保护2×104U/L TNF诱导的L929细胞半数不发生死亡。1.0 mg/L的mAb D2、E6和F6,对2×105U/L TNF使ECV304细胞上ICAM-1表达上调的抑制率,分别为70.1%、60.1%和60.1%;3株mAb的浓度降到0.1 mg/L时,抑制率仍可达到60.1%、53.7%和59.0%。结论:所选3株mAb的效价及中和活性均较高,可作为抗人TNF嵌合抗体的候选mAb。 相似文献
85.
本文运用~(125)Ⅰ标记的CD25单克隆抗体和IL-2进行竞争结合试验,发现抗CD3单克隆抗体、PHA和Ca~(++)载体A23187均明显抑制PMA诱导Jurkat细胞Tac抗原的表达。抑制率分别为50.0%、74.5%和87.8%。静止的Jurkat细胞不具有任何亲和性的IL-2结合受体,PMA(20ng/ml)刺激24h后,每个细胞表面表达509个高亲和性IL-2受体,KD值为381PM。 相似文献
86.
肾综合症出血热患者血清可溶性CD226/PTA1的检测及意义 总被引:3,自引:3,他引:3
肾综合症出血热 (hemorrhagicfeverwithrenalsyndrome ,HFRS)是汉坦病毒 (HV)引起的一种急性自然疫源性疾病。HFRS在我国分布广 ,病死率也较高。细胞免疫在HFRS免疫防护和 /或病理损伤中发挥重要作用。在HFRS的病理变化中有全身小血管和毛细血管广泛性损害及血栓或微血栓形成[1] 。血小板T细胞活化抗原 1(PTA1)表达于活化T细胞、NK细胞、血小板以及活化内皮细胞[2 ] ,在第 7界人类白细胞分化抗原会议和专题讨论会上命名为CD2 2 6 [3] ,CD2 2 6 /PTA1在血清中存在着可溶形… 相似文献
87.
目的 探讨超抗原SEA对Tc1和Tc2亚群细胞增殖的不同影响。方法 以SEA刺激PBMC ,以免疫荧光染色结合流式细胞术比较刺激与未刺激的PBMC中T细胞各亚群比例的变化 ;从PBMC中分离CD8 T细胞 ,定向诱导为Tc1和Tc2细胞系 ,3 H TdR掺入法检测Tc1和Tc2细胞对SEA刺激的反应 ,用免疫荧光染色和流式细胞术检测CD2 5的表达。结果 经SEA刺激后 ,PBMC中的Tc0 /TH0增殖并向Ⅰ型或Ⅱ型分化 ,但SEA所诱导PBMC中的Tc2 /TH2的比例远高于Tc1/TH1;SEA在体外能更有效地促进Tc2亚群细胞的增殖 ;经SEA刺激的Tc2细胞系CD2 5的表达也高于Tc1。结论 SEA优先诱导PBMC中的Tc2 /TH2的分化 ,在体外更有效地促进Tc2细胞增殖 相似文献
88.
目的:提供CD226分子参与内皮细胞黏附功能的形态学证据。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,加入融合蛋白CD226—Ig,采用倒置显微镜和扫描电子显微镜观测CD226分子在活化内皮细胞和活化PBMC黏附过程中的作用。结果:融合蛋白CD226/Ig可显著降低活化内皮细胞与活化PBMC间的黏附。结论:CD226分子是活化内皮细胞表面一种新的黏附分子,可能具有重要的生理和病理功能。 相似文献
89.
心力衰竭患者血浆sTRAIL和sDR5的水平及培哚普利对其影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 :探讨充血性心力衰竭 (CHF)患者血浆可溶型TNF相关的凋亡诱导配体 (sTRAIL)和死亡受体DR5水平的变化及与培哚普利对心脏保护的关系。方法 :用ELISA法检测治疗前后 30例服用培哚普利的CHF患者、2 8例常规治疗的CHF患者及 2 0例健康人对照血浆中sTRAIL及sDR5的水平。结果 :① 5 8例CHF患者血浆sTRAIL的平均含量为 (1.4 3± 0 .4 7)μg/L ,健康人为 (0 .93± 0 .12 ) μg/L ,两者无显著性差异(P >0 .0 5 ) ;sTRAIL水平与心功能损害程度亦无明显关系。CHF患者血浆sDR5的平均含量为 (39.6 7± 6 .78)ng/L ,较健康人 (<6ng/L)明显升高 ,且随着心功能损害程度的加重而升高。②培哚普利组与常规心衰治疗组治疗后 ,血浆中sTRAIL的水平均有所降低 ,但无显著性差异。治疗前后培哚普利组血浆sDR5的平均水平 ,分别为 (31.2 3± 10 .16 )ng/L和 (8.5 0± 2 .14 )ng/L(P <0 .0 5 ) ;常规治疗组分别为 (48.81± 8.74 )ng/L和 (2 6 .6 4± 6 .2 7)ng/L(P <0 .0 5 )。培哚普利组与常规治疗组相比较 ,前者降低更明显 (分别下降 72 .7%和 4 5 .4 % )。③与其他病因所致CHF患者相比较 ,高血压心脏病所致CHF患者血浆sDR5的水平明显升高。结论 :sDR5可能在CHF患者心肌细胞凋亡的发生、发展中起着重要作用。培哚普利可降低C 相似文献
90.
目的:通过研究颌面枪弹伤后肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)及白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)在血中的表达情况,探讨前炎症细胞因子与创伤并发症间的内在联系。方法:用ELISA方法检测犬颌面枪弹伤后血中不同时间点TNF-α、IL-6的表达变化情况。结果:枪弹伤后尽管犬未出现严重的创伤并发症,但血中TNF-α呈一过性高表达,表达高峰在伤后2-6h;不同的犬表达水平浓度差别较大;无需治疗可逐渐恢复正常。同时未检测到血中IL-6。结论:创伤后前炎症细胞因子的表达是机体对创伤的正常免疫应答,表达水平高低可能反应创伤的程度,但一过性的高表达并不能显加重创伤的全身反应,创伤后血中TNF-α的浓度作为一种监测伤情变化的指标可能有一定的参考价值。 相似文献