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861.
细胞穿透肽核靶向运输蛋白表达载体的构建及其蛋白转导功能的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 构建基于细胞穿透肽靶向细胞核运输的蛋白表达载体,并研究其蛋白转导功能。方法 在带His标记的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pET14b—HE(pET14b-His-EGFP)基础上,利用点突变的方法构建依次含细胞穿透肽(CPP)、连接子、核定位信号(NLS)序列和EGFP的融合蛋白表达载体pET14b—HC(L)NE(pET14b—His—CPP—Linker-NLS—EGFP);经酶切、测序鉴定载体构建正确后,将重组质粒转化BL21(DE3)宿主菌,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导表达后、用Ni^2+亲和层析纯化得到融合蛋白:将融合蛋白透析、过滤除菌后加入培养的真核细胞中,荧光显微镜下观察并进行Western blot检测分析其在活细胞的蛋白转导功能。结果 酶切、测序证实载体构建成功,融合蛋白在大肠杆菌中可有效表达:蛋白转导实验可见融合蛋白可快速穿透细胞膜并进入细胞核,并且这种内化转导功能存在时间和剂量依赖效应。结论 成功构建了基于细胞穿透肽的蛋白表达运输载体,建立了可携带外源蛋白进入细胞浆及细胞核的运输系统,为研究蛋白或多肽的细胞内功能以及运输药物提供了一种经济有效的工具。 相似文献
862.
863.
目的 研究尿激酶热敏脂质体(UKTsL)的体内外溶栓效果.方法 在简易体外溶栓装置上研究了UKTsL的体外靶向溶栓效果;在兔颈动脉血栓模型上观察了UKTsL的体内靶向溶栓能力.结果 体外溶栓实验显示,UKTsL组的血凝块溶解率达(50.41±4.04)%,和2倍尿激酶(UK)剂量的UK组相近,与磷酸盐缓冲液(PBS)组及尿同UK剂量的尿激酶脂质体(UKL)组相比差异有显著性(P<0.01).体内实验显示UKTsL组(UK总量75 000u/mL)各时段血压变化及血栓形态学改变与UK组(150 000 u/mL)相近(P>0.05).结论 UKTsL具有较好的热靶向溶栓能力,能减少尿激酶的毒副作用.UKTsL用于溶栓还有待深入研究. 相似文献
864.
医患关系的恶化,始于社会主义市场经济的转型时期,随着中国经济的飞速发展,这种恶化的状态不仅没有得到丝毫的改善,反而愈演愈烈并迅速地向后倒退。它不仅影响了人们的日常医疗保健活动,而且严重干扰了社会主义的正常医疗秩序,尤其近些年来,更是出现了医疗活动中从未出现的暴力索赔事件和医闹现象。这无疑给创建一个和谐稳定的社会蒙上了一层阴影。1什么是暴力索赔关于暴力索赔,笔者认为是指因医疗纠纷引发矛盾升级,患方通过对医务人员和医疗机构采用极端手段来试图达到索赔的目的,对医疗机构正常工作秩序和医务人员合法权益产生严重侵害的… 相似文献
865.
目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在急性白血病中的临床意义。方法采用酶联免疫法(ELISA)测定68例急性白血病患者血清及骨髓中TGF-β1水平。结果急性白血病初诊患者血清及骨髓TGF-β1水平明显低于正常对照组(P<0.05),完全缓解期TGF-β1水平恢复正常,未缓解和复发患者TGF-β1水平与初诊患者无明显差异(P>0.05)。结论检测TGF-β1水平变化有助于急性白血病病情判断,可作为疗效观察的辅助指标。 相似文献
866.
目的:运用T型关联度分析,探讨去卵巢大鼠椎骨组织形态计量学与骨矿含量之间的相关关系方法:10.5月龄未交配的雌性SD大鼠40只,随机分为5组:10.5月龄基础对照组(Basal);13月龄假手术组(Sham1);13月龄去卵巢10周组(OVX1);16月龄假手术组(Sham2);16月龄去卵巢22周组(OVX2)。所有大鼠灌喂生理盐水5ml·kg-1·d-1实验终止时取第4腰椎进行骨组织形态计量学测量,第5腰椎进行骨矿物质含量测定,通过T型关联度计算,分析骨矿含量对骨组织形态计量学各参数的影响。结果:去卵巢大鼠腰椎骨矿含量与骨组织形态计量学静态参数(骨小梁面积百分数、骨小梁厚度)成正相关,而与动态参数(骨转换率)成负相关其中骨钙、骨磷的含量对骨形态计量学参数的影响较大。结论:T型关联度分析可客观地、公正地评价去卵巢大鼠椎骨组织形态计量学与骨矿含量之间的相关关系。 相似文献
867.
婴幼儿泪囊炎是临床上常见眼病,以往多主张保守疗法,但疗效不佳。我科1998~1999年间,采用探通法治疗83例92眼,经1月至半年时间跟踪观察,效果满意。现报告分析如下: 1资料与方法 1.1一般资料:83例患儿中,双眼9例,单眼74例,共92眼,右眼和左眼数分别为40眼和52眼。接受治疗年龄最小20天,最大4岁,其中1月内8例,1~6月40例,7~12月17例,2岁以上4例,1岁以内占78.07%。 1.2诊断:婴儿出生后几天或更长时间内出现流泪和眼分泌物增多,按压泪囊部有粘液或脓性分泌物自泪点… 相似文献
868.
为探讨晚期广泛转移、已不能切除的胃癌的区域性化疗的途径、方法和疗效。作者采用术中经胃网膜右动脉逆行插管 ,胃网膜右静脉插管至门静脉行腹腔置管 ,术中及术后经预插三路导管灌注化疗。结果 6例已有腹腔淋巴结、腹膜及肝脏广泛转移 ,不能切除的晚期胃癌行三路插管 ,完成化疗 2周期 1例 ,3周期 2例 ,4周期 2例 ,6周期 1例 ;生存 6mon、7mon、9mon、13mon、14mon各 1例 ,1例已生存 5 2mon ,现仍健在。作者认为胃网膜右动脉、门静脉及腹腔三路插管化疗针对晚期胃癌转移的多种途径 ,是比较合理的区域性化疗 ,有较好的临床疗效。 相似文献
869.
870.
目的:检测慢性牙周炎患者唾液β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,β-G)水平,并与治疗后及健康人群对照,以期明确β-G与慢性牙周炎的关系,为牙周炎诊断及疗效监测提供有效参考。方法选择18名慢性牙周炎患者,采集牙周基础治疗前及治疗后全唾液并记录牙周临床指数;检测全唾液中β-G(比色法)水平,并分析与牙周临床参数之间的相关性。结果(1)基础治疗后,牙周临床参数改善明显(P<0.05);(2)治疗前实验组唾液β-G活性水平(2.845±0.72,10-3U· mL-1)与健康对照组(2.24±0.31,10-3 U· mL-1)差异有显著性(P<0.05),与平均牙周袋深度(r =0.485)、深袋数(r =0.540)、深袋构成比(r=0.598)之间明显相关(P<0.05);治疗后β-G酶活性水平(2.18±0.71,10-3 U· mL-1)明显下调(P<0.05),与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论唾液β-G活性水平能在一定程度上反映当前牙周炎状态及控制程度,该指标可为牙周炎诊断和疗效监测提供参考。 相似文献