Hsp22对缺氧/复氧损伤人脐静脉内皮细胞保护及Bcl-2、Caspase-3的表达

目的研究热休克蛋白22(Heat shock protein22,Hsp22)对缺氧/复氧损伤人脐静脉内皮细胞(HUVECs)保护作用,并探讨Hsp22调节bcl-2和caspase-3表达。方法把pGcsi-U6/Neo/GFp/shRNA/HSP22稳定转染HUVECs,Western blot印迹检测Hsp22蛋白在对照组、Lipo组、未转染组和转染组缺氧24 h/复氧0 h表达;MTT检测转染组和未转染组缺氧24 h/复氧0 h、3 h、6 h、12 h生长抑制:RT-PCR和Western blot印迹检测bcl-2和caspase-3转染组和未转染组缺氧24 h/复氧0 h、3 h、6 h、12 h基因和蛋白表达水平。结果 (1)转染组显著低于比对照组、Lipo2000组和未转染组(0.20±0.02 vs.0.43±0.03 vs.0.45±0.06 vs.0.48±0.05,P<0.05)而对照组、Lipo2000组和未转染组组间无显著差异(P>0.05)。(2)转染组抑制高于未转染组相同复氧时间点(58.5%±2.1%vs.41.6%±5.4%、62.7%±5.4%vs.45.6%±3.7%、65.4%±8.4%vs.48.5%±5.2%和68.6±6.7%vs.52.9%±3.4%,P<0.05)。(3)转染组bcl-2基因和蛋白在相同复氧时间点均低于未转染组:(1.85±0.06 vs.2.65±0.15、1.66±0.04 vs.2.35±0.08、1.09±0.05 vs.2.05±0.08、0.69±0.04 vs.1.75±0.09,P<0.05)和(0.54±0.04 vs.1.05±0.05、0.32±0.05 vs.0.75±0.03、0.29±0.02 vs.0.55±0.03、0.13±0.04 vs.0.45±0.07,P<0.05)。(4)转染组caspase-3基因和蛋白在相同复氧时间点均高于未转染组:(2.75±0.04 vs.1.75±0.07、2.96±0.04 vs.1.95±0.06、3.59±0.05 vs.2.45±0.05、3.59±0.05 vs.2.77±0.09,P<0.05)和(9.36±0.11 vs.3.05±0.12、8.82±0.07 vs.2.65±0.12、6.18±0.24 vs.2.05±0.11、3.59±0.05 vs.1.75±0.04,P<0.05)。结论 (1)稳定转染并缺氧/复氧损伤后,转染组Hsp22蛋白表达明显低于对照组而对照组、Lipo组和未转染组组间Hsp22蛋白无显著差异;(2)Hsp22对缺氧/复氧损伤HUVECs起保护作用;(3)Hsp22通过上调bcl-2和下调caspase-3基因和蛋白表达保护受损细胞。     

单检及16份混样检测模式对献血者核酸检测效果的比较研究

目的 探讨单份及16份混合标本2种检测模式对献血者血液病毒核酸检测(nucleic acid test,NAT)效果的影响.方法 2009年2至6月顺序留取北京无偿献血者标本,用诺华Procleix ULTRIO Assay进行单份(ID)或16份混合标本(P16)乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)和人类免疫缺陷病毒-1( HIV-1)三项联合核酸检测.单份NAT反应性同时HBsAg、抗-HCV或抗-HIV血清学不合格的标本,血清学合格的单份NAT反应性经双孔NAT复检阳性的标本,以及混合NAT反应性/拆分NAT为阳性的标本,进一步用诺华Procleix HBV、HCV和HIV-1鉴别试剂进行鉴别试验.血清学合格、HBV NAT单独阳性标本进一步用Roche HBV定量实验加以验证和进行病毒含量测定、血清学分析、并进行稀释以模拟是否能被P16-NAT检出.阳性检出率进行四格表连续校正的x2检验.结果 (1)在7613份单份NAT (ID-NAT)标本中,检出NAT阳性26份,ID-NAT阳性率0.34％(26/7613);(2)在16 064份共1004份P16混合标本NAT(P16-NAT)中,检出NAT阳性27份,P16-NAT阳性率为0.17％ (27/16 064);(3)在血清学合格标本中,单份检测的NAT单独阳性检出率为0.12％ (9/7438),高于16份混样检测的NAT单独阳性检出率0.01％ (2/15 750)(x2=11.880,P＜0.05).9份ID-NAT及2份P16-NAT单独阳性标本经鉴别均为HBV NAT阳性,未检出 HCV NAT单独阳性或HIV NAT单独阳性;(4)9份ID-NAT HBV单独阳性血样模拟P16-NAT,仅有2份可被检出;(5)对8份ID-NAT及2份P16-NAT单独阳性标本进行Roche HBV定量测定,均可确证其核酸检测结果,但病毒含量很低.其中2份HBV病毒含量为472 IU/ml及15 IU/ml,6份含量＜12 IU/ml,另2份原倍不能定量经10倍浓缩处理后测得含量为＜ 12 IU/ml和14.3 IU/ml;(6)11份HBV NAT单独阳性标本中,3份(27.3％)为潜在的窗口期感染,其余8份(72.7％)抗-HBc阳性或抗-HBe阳性,但抗-HBc-IgM均为阴性,为隐匿性感染;(7) P16-NAT初检呈反应性需要进行拆分试验的混合样本比率为2.49％ (25/1004),其中由血清学合格标本所致初检反应性的混合样本比率为0.20％ (2/1004).结论 ID-NAT单独阳性检出率高于P16-NAT单独阳性检出率.为避免低病毒含量HBV的漏检,应选用灵敏度高的核酸检测试剂,并尽量采用小标本量混合检测,甚至采用单份检测方式.     

c-Jun氨基端激酶对亚急性帕金森病小鼠黑质神经元凋亡的影响

目的 探讨c-Jun氨基端激酶(JNK)对帕金森病(PD)模型黑质多巴胺(DA)能神经元凋亡的影响.方法 采用MPTP制备亚急性PD小鼠模型,通过免疫组织化学和免疫蛋白印迹法,观察各组小鼠黑质区磷酸化p-c-Jun免疫阳性反应和蛋白表达水平的变化;观察给予JNK特异性抑制剂SP600125对上述变化的影响.结果 与对照组相比,模型组小鼠黑质神经元p-c-Jun表达水平明显升高,TUNEL阳性细胞数量增加;JNK抑制剂组p-c-Jun表达水平明显下降,TUNEL阳性细胞数量显著减少.结论 JNK可能参与模型小鼠黑质DA能神经元凋亡过程;JNK抑制剂SP600125可在一定程度上阻抑黑质区JNK信号通路,减轻MPTP诱导的PD小鼠黑质DA能神经元凋亡.     

双侧中线旁丘脑梗死5例致残特点及生存期调查

Background:Bilateral thalamus infarction near median line is uncommon in clinic.Reports concerned with this conditions were more less.It is characterized by conscious disorder and Korsakoff syndrome.The main caused may be the injury of intralaminar nuclei,dorsomedial nuclei,and injury of cortical matter,mammalillary bodies,fasciculus thalamicus around cerebral chamer III.Comprehensing the disability characteristics in pateints with bilateral thalamus infarction near median line is important for direction of rehabilitation.While study of survival time will improve evaluation of prognosis. Design:Patients recruited from June 1997～ October 2000 were analyzed. Unit:Intraneural Department of First People's Hospital of Yunnan Province. Subjects:55 subjects with MRI proved bilateral thalamus infarction near median line entered study.These patients included 3 women,2 men(age ranging from 50 to 77 years old,mean age:68.6 years).The period from onset to admission ranged from 5 hours to 2 days.All subejcts experienced acute bilateral thalamus infarction near median line.All had hypertension previously,1 had diabetes,2 had auricular fibrillation. Intervention:All patients received management which was conducted according to protocol for treatment of ischemic cerebrovascular diseases. Patients clinical characteristics were summari-zed and analyzed.Follow up was conducted to determine the survival period. Main evaluation indexes:Survival time and conscious disorder were evaluated. Result:All patients showed different level of conscious disorder.3 cases developed thalamic dementia,2 developed vision numb,In 1 case,condition progressively deteriorated manifesting as moderate coma progressed to deep coma,and bilateral mydriasis.Finally,this patients died of central respiratory and circulatory failure after 8 days.4 cases with favorable prognosis discharged,3 out of them died within 1 year after discharge.Survival subject suffered from reduced memory was followed up till now. Conclusion:Concious or cognitive disorder ,vision bumb are common among patients with bilateral thalamus infarction near median line.Their prognosis are poor.In the current study,the number of case was samll,so further study is needed.     

论《医疗事故处理条例》对临床工作的影响

《医疗事故处理条例》将在 2 0 0 2 - 0 9- 0 1正式实施 ,现就具体贯彻落实中遇到和产生的一些问题并对临床工作带来的影响探讨如下。1　《条例》带来和积极效应《条例》作为现实条件下调整医患关系的一部新法规 ,必然会对临床工作带来诸多积极效应。如加强责任心、规范医疗行为、改善服务态度、加强医患交流、防范医疗纠纷、提高医疗质量与技术水平等。1.1　有利于规范医疗行为[1]1.1.1医疗机构可能成为医疗事故的主体　《条例》第2条关于医疗事故的定义中 ,明确了医疗机构违规 ,过失造成患者人身损害 ,构成医疗事故。即是明确了医疗机构可…     

EIF3h、MMP-10和MMP-11在结肠腺癌中的表达及意义

目的检测结肠腺癌中真核翻译起始因子3h(eukaryotic translation initiation factor 3 h,EIF3h)、基质金属蛋白酶-10(matrix metallopeptidase 10,MMP-10)和MMP-11的表达,分析其相关性.方法选择110例经病理医师确诊的结肠腺癌作为观察组,选择43例结肠黏膜高级别上皮内瘤变组织作为对照组1,选择43例结肠黏膜低级别上皮内瘤变组织作为对照组2,选择43例非肿瘤性结肠黏膜组织作为对照组3.应用免疫组化法检测四组中EIF3h和MMP-10、MMP-11蛋白的表达.结果四组中EIF3h、MMP-10和MMP-11的表达差别有统计学意义,观察组中三种蛋白的表达与淋巴结转移相关,EIF3H的表达与肿瘤最大径、分化程度、增殖指数及TNM分期相关,MMP-10、MMP-11与脉管累犯相关.三者均与性别、年龄和炎细胞浸润程度无关.观察组中MMP-10和MMP-11呈正相关.结论结肠腺癌中三者高表达是促进肿瘤形成和进展的重要因素之一,MMP-10和MMP-11之间可能具有协同正向作用.EIF3h可能与预后有关.     

辛伐他汀对高脂血症患者载脂蛋白E的影响

目的探讨辛伐他汀对高脂血症患者血清总载脂蛋白E(apoE)水平的影响。方法40例高脂血症患者每晚顿服辛伐他汀10mg4周,比较服药前后血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、apoA1、apoB、apoE及脂蛋白(a)〔Lp(a)〕水平的变化。结果用药后血清TC及TG分别下降21．3％及9．2％(P<0．001,<0．05),LDL-C下降24．7％(P<0．01),apoB及apoE分别下降13．8％及34．7％(P<0．05,<0．001),apoA1增加7．5％(P<0．05)。apoE下降幅值分别与其自身基础值和TG及LDL-C基础值呈正相关(P<0．01,<0．01,<0．05)。HDL-C呈增高趋势,Lp(a)改变无统计学差异。结论辛伐他汀能导致血清apoE水平显著下降其可能参与了抗动脉粥样硬化过程。     

替米沙坦对大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化的影响

目的研究替米沙坦对高脂饮食非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝纤维化的预防和保护作用。方法 35只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC,n=10)、模型组(FC,n=15)和替米沙坦干预组(FT,n=10)。FC和FT组给予高脂饲料喂养16周诱发脂肪性肝炎,其中FT组于高脂喂养12周后,给予替米沙坦(5mg·kg-1.d-1)灌胃治疗4周。16周末处死所有动物。检测血清ALT、AST、TC、TG和HDL-C,RT-PCR法检测肝组织TIMP-1、MMP-2和TGF-β1mRNA的表达,病理切片检查和α-SMA免疫组织化学染色观察组织学改变。结果与FC组比较,FT组大鼠ALT降低,TIMP-1、MMP-2和TGF-β1mRNA的表达降低,肝星状细胞活化减少,肝脏病理学改善。结论替米沙坦对NASH大鼠有保护和抗肝纤维化的作用。     

荧光定量PCR检测异尖线虫类病原体

目的运用荧光定量PCR法检测异尖线虫类病原体。方法于鱼类内脏中检获6种异尖线虫类幼虫:抹香鲸异尖线虫、简单异尖线虫、内弯对盲囊线虫、带鱼针蛔线虫、灰海鳗对盲囊线虫和台湾海峡鱼类中一优势种对盲囊线虫。提取各虫体DNA,PCR扩增ITS-2序列,测序并进行数据库比对。依据测序结果设计特异引物,常规PCR检验引物特异性。将ITS-2序列扩增产物回收、纯化后经T克隆转入大肠埃希菌DH5α,提取重组质粒,鉴定后作为标准品模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做敏感性和重复性试验。结果构建的荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数均在0.998以上。重复性实验中,6种虫体对应的变异系数(cv)最小值为0.18%,最大值为2.80%,试验间平均cv最小值为0.55%,最大值为1.94%,无非特异性扩增,溶解曲线的特异性和重复性良好。灵敏度实验中,可检出的最低模板浓度为1×102拷贝/μl,比常规PCR灵敏度高100倍。结论初步建立了SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测异尖线虫类病原体的方法 。     

替米沙坦对非酒精性脂肪性肝炎大鼠血清脂联素、肝脏AdipoR2 mRNA表达及胰岛素抵抗的影响

目的探讨替米沙坦对非酒精性脂肪性肝炎大鼠胰岛素抵抗、血清脂联素及其肝组织脂联素受体R2mRNA表达的影响。方法 35只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC,n=10)、模型组(FC,n=15)和替米沙坦干预组(FT,n=10)。FC和FT组给予高脂饲料喂养16周诱发脂肪性肝炎,其中FT组于高脂喂养12周后,给予替米沙坦(5mg·kg-1·d-1)灌胃治疗4周。检测血清ALT、AST、空腹血糖、空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);应用RT-PCR方法测定大鼠肝组织脂联素受体R2mRNA的表达;ELISA法测定血浆脂联素水平。结果与NC组相比,FC组脂联素及其受体R2mRNA水平均显著降低(P0.01);FT组的脂联素及其受体R2mRNA水平较FC组升高(P0.05)。脂联素及其受体R2mRNA水平均与HOMA-IR呈负相关(r分别为-0.891,-0.686;P0.01,0.05)。结论替米沙坦能上调脂联素及其受体R2的表达,改善非酒精性脂肪性肝炎大鼠的胰岛素抵抗。