胡芦巴提取物对实验性糖尿病大鼠的降血糖作用

目的：探讨胡芦巴提取物作用不同时间实验性糖尿病大鼠血糖的变化。方法：采用链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病组(D)8只、胡芦巴提取物治疗组(F) 10只,另设正常对照组(C) 6只,观察胡芦巴提取物作用不同时间糖尿病大鼠血糖的变化。结果：与糖尿病组比较,给予胡芦巴提取物治疗组糖尿病大鼠血糖第9天开始明显下降（P<0.05）,第21天（3周）时血糖显著降低（P<0.01）;第27天(4周)左右降至与对照组同样水平（P>0.05 ）,给药4周内血糖水平随治疗时间延长而降低,呈负相关关系（r =-0.97,P<0.05）。4～12周血糖水平保持平稳,血糖水平不随时间延长而改变。胡芦巴提取物治疗组给药4周后停给2周,停止给药期间血糖回升较缓慢。结论：胡芦巴提取物能明显降低糖尿病大鼠血糖含量,使其恢复到正常大鼠血糖水平,并在给药4周内呈明显的时效关系。     

用跨越断裂点的PCR技术快速诊断一种HPFH缺失突变

目的建立一种简便快速检测缺失型遗传性持续性胎儿血红蛋白综合征（ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｐｅｒｓｉｓ－ｔｅｎｃｅｏｆｆｅｔａｌｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ,ＨＰＦＨ）的ＰＣＲ基因诊断技术。方法基于本室通过序列测定获得的该基因断裂点周围新的ＤＮＡ顺序资料,采用跨越断裂点的三引物双重ＰＣＲ设计方案,１个共用引物与２个分别针对正常和突变基因的引物在单管反应中构成２对特异性的ＰＣＲ反应。结果２个特异性扩增片段分别为５６５ｂｐ和３７６ｂｐ,与预期的ＰＣＲ产物大小相符,其中５６５ｂｐ为正常等位基因的扩增产物;３７６ｂｐ产物示缺失型等位基因。此三引物双重ＰＣＲ可在同一反应体系中进行,其结果能区别样品的不同基因型。结论该法简便快速,可作为常规方法用于临床疑诊样品的分子筛查。     

东南亚缺失型α地中海贫血的聚合酶链反应快速诊断技术及产前诊断

目的　针对东南亚缺失型α地中海贫血 (- - SEA)建立一种快速、简便的聚合酶链反应(PCR)基因诊断技术 ,并初步应用于高危胎儿的产前诊断。方法　采用跨越断裂点的PCR设计方案 ,其中一对引物用于扩增 - - SEA缺失基因 ,另一对引物设计在 - - SEA、-α3 .7、-α4 .2 的公共缺失区域 ,用于扩增正常的α珠蛋白基因 ,两对引物在单管中反应。用该方法对 8例高风险Bart’s水肿胎进行产前诊断。结果　 - - SEA缺失基因的扩增产物为 740bp ,正常等位基因的扩增产物为 10 5 2bp。进行产前诊断的 8例高风险Bart’s水肿胎 ,检出正常胎儿 3例 ,- - SEA杂合子 3例 ,HbBart’s水肿胎儿 2例。结论　该法快速、准确 ,可作为常规方法用于临床样品的分子筛查及Bart’s水肿胎和缺失型HbH病的产前诊断。     

一个HPFH复合β地中海贫血家系的基因分析及其高危胎儿的产前基因诊断

目的调查一种缺失型遗传性持续性胎儿血红蛋白综合征（ＨＰＦＨ）的基因型和表型的关系;探索进行β地中海贫血（地贫）复合这种缺失型ＨＰＦＨ的高风险胎儿的快速产前诊断方法。方法用跨越断裂点的三引物聚合酶链反应直接分析法检测ＨＰＦＨ缺失突变;用反向点杂交技术筛查β地贫基因突变。结果发现先证者（中间型地贫患儿）为一种缺失型ＨＰＦＨ和β地贫双重杂合子,其ＨＰＦＨ基因自母方遗传,在该家系三代６名成员中共检测到４例携带了这一基因;β地贫基因［密码子１４１５（＋Ｇ）移码突变］自父方遗传。在此基础上,我们对该家庭的中间型地贫高风险胎儿进行了产前基因诊断,结果显示胎儿的基因型与先证者完全相同,为ＨＰＦＨ和β地贫双重杂合子,故建议终止妊娠。人工流产后取样分析进一步证实了产前诊断的结果。结论这是国内首次完成并报告的对由ＨＰＦＨ基因与β地贫点突变双重杂合导致的中间型地贫高风险胎儿的产前诊断。所采用的技术简便、快速,可用作解决同类事件的参考。     

兔骨骼肌肌钙蛋白C的提取纯化

目的 研究出一种提取骨骼肌肌钙蛋白C（sTnC）的新方法。方法 兔骨骼肌经匀浆、离心后上DEAE-Sephadex A25层析柱、Sephadex G75层析柱及Butyl Sepharose层析柱以获得sTnC纯品。结果 终产品出现了指状吸收光谱，其吸收峰位于253nm、259nm、265nm、269nm、276nm。采用DM-150色谱柱进行HPLC分析，出现单一峰。SDS-PAGE分析，得到一条电泳带，计算其分子量为19KD。本实验sTnC的产率为50mg／100g兔骨骼肌，提取周期缩短至6天。结论 该方法不仅简化了sTnC的提取纯化步骤，缩短了提取周期，而且使其产率大大提高。     

高血压患者全程的健康教育

高血压病是最常见的慢性心血管疾病,是全球范围的重大公共卫生问题.我国高血压病的患病率虽不如西方国家高,但目前呈上升趋势.高血压病严重威胁着人类的健康,已成为引起脑卒中、冠心病的主要原因.目前高血压病存在"三高、三低、三不"的特点,即患病事高、致残率高、病死率高,知晓率低、治疗率低、控制率低,有病不愿服药、不难受不服药,不按病情服药,这主要是因为公众对高血压病的基本知识了解太少所致.     

人表皮生长因子受体Ⅲ型突变体胞外区的克隆表达和鉴定

目的 构建含表皮生长因子(EGF)受体Ⅲ型突变体胞外区基因(vⅢECD)的重组质粒并进行表达和鉴定.方法 应用PCR方法扩增EGFRvⅢECD片段,将其T-A克隆和测序.再将目的基因插入GST融合表达载体pGEX-4T-1中进行表达.采用双酶切鉴定插入序列的正确性,用SDS-PAGE及Western blotting分析融合蛋白的表达.结果 测序结果证实插入DNA序列与EGFR胞外区序列完全一致;双酶切鉴定表明,EGFRvⅢ ECD序列已经正确克隆到GST融合表达载体中.SDS-PAGE电泳显示融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中以包涵体形式表达.重组融合蛋白GST-vⅢ ECD的表达量占菌体总蛋白的15%以上.Western blotting分析证实重组融合蛋白可以被EGFR特异性抗体所识别.结论 成功构建了融合表达载体(pGEX-4T-1/vⅢECD),并进行了融合蛋白的诱导表达和鉴定,可进一步用于EGFRvⅢ功能及免疫学研究.     

基于“体外-体内”多维化学物质组关联网络的茯苓质量标志物发现及质量评价研究

目的以"体外-体内"多维化学物质组关联网络为基础,结合体内药动学研究,明确茯苓药效质量标志物,并建立质量标志物的高效液相色谱-串联质谱定量方法,进行茯苓药材质量评价。方法以薯蓣皂苷为内标,建立茯苓三萜类成分的超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(UHPLC-MS/MS)定量分析方法,绘制体内药效成分的药动学曲线,以此为依据明确茯苓药效质量标志物主要包括去氢土莫酸、土莫酸、茯苓新酸B等7种成分。检测10批茯苓药材中含量较高的成分和质量标志物的质量分数,并分别以质量分数较高成分、质量分数较高或药效质量标志物为变量进行10批茯苓药材的聚类分析。结果以不同指标为变量进行聚类分析评价茯苓药材质量时,结果存在差异。结论仅以质量分数较高的成分进行茯苓质量控制的方法在一定程度上存在片面性。为了全面精准的控制茯苓质量,需要充分考虑茯苓体内外成分变化和体内动力学过程,选取真正与药效相关的药效质量标志物用于其质量控制。     

绒毛取样进行标准α地中海贫血早期产前诊断的初步研究

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对５例高危妊娠者采用绒毛取样进行标准型α－地中海贫血的早期产前诊断。结果：５例绒毛取样无１例失败，绒毛量足够用于诊断，无１例早期自然流产，其中３例孕中期行羊水检查，证实了绒毛诊断的准确性。作者等对绒毛取祥时间、方法及危险性进行了探讨，并认为绒毛取样是诊断缺失型α－地中海贫血的一种安全、可靠的孕期产前诊断方法。     

α-地中海贫血早期产前诊断

目的：探索α－地中海贫血早期产前诊断的方法；方法：利用聚合酶链反应技术对8例高危妊娠者采用绒毛取样进行缺失型α－地中海贫血的早期产前诊断；结果：检测出胎儿水肿综合症2例，杂合子4例．正常胚胎2例，其中3例孕中期行羊水检查，证实了绒毛诊断的准确性；结论：绒毛取样是诊断缺失型α－地中海的一种安全可靠的孕早期产前诊断方法。