血浆亮氨酸脑啡肽样物质与痛及镇痛的关系

<正> 脑啡肽(EK)自1975年发现以来,不少研究已证明它参与镇痛作用,如当针刺镇痛时脑内及脑脊液中EK含量均升高。由于EK易被降解,因而在测定血浆内含量变化方面报道甚少。本文应用放射免疫法测定人体血浆中亮氨酸脑啡肽(LEK)样物质的含量,并试图探讨其与疼痛及镇痛的关系。对象与方法 (一)对象 1.正常人:11人均系本室健康的工作人员。男6人,女5人。年龄26～52岁。 2.病人:各种疼痛病人32例,男性     

广西柳州市血红蛋白H病的分子流行病学和血液学研究

血红蛋白Ｈ病 (ＨｂＨ病 )属中间型α地中海贫血 (α地贫 ) ,也是我国南方地贫高发区常见的溶血性贫血 ,其表型特征是电泳时可在患者的外周血中检出ＨｂＨ带[1 ] 。在各类α地贫中 ,ＨｂＨ病的基因缺陷背景最为丰富 ,故是研究α地贫的分子病理学的良好材料。ＨｂＨ病的临床表现差异很大 ,从基因型和表型关系入手探讨其病因学对遗传咨询和临床实践有指导作用。我们首先在大样本系统筛查基础上 ,调查了广西柳州市城镇人群的分子流行病学及其基因构成情况 ,并对该地 3组不同来源 (群体筛查、门诊和住院病例 )的 1 0 4例ＨｂＨ病患者进行了基因…     

利用Caco-2细胞模型模拟槲皮素和芦丁在小肠的吸收

目的： 探讨药物分子槲皮素、芦丁的小肠吸收情况。方法： 利用Caco-2细胞模型观察药物分子由细胞绒毛面（A面）到基底面（B面）、基底面（B面）到细胞绒毛面（A面）两个方向的转运过程。 结果： 由细胞绒毛面（A面）到基底面（B面）槲皮素的表观渗透系数（P_app）=(5.15±0.65)×10^-6cm•s^-1 ,芦丁P_app=(0.05±0.01)×10^-6cm•s^-1,由基底面（B面）到细胞绒毛面（A面）槲皮素及芦丁的P_app分别为(10.54±1.35)×10^-6cm•s^-1和(0.07±0.01)×10^-6cm•s^-1 。结论： 槲皮素、芦丁可以通过小肠上皮细胞吸收进入体内,槲皮素较芦丁更易于吸收。     

Tau蛋白过度表达促进细胞重新进入细胞周期

目的 探讨tau蛋白过度表达对细胞重新进入细胞周期的影响.方法 采用免疫印迹和免疫荧光细胞化学的方法,分别检测稳定转染质粒peDNA3.1-tau和空载体pcDNA3.1的HEK293细胞(HEK293/tau和HEK293/vec)中tau的表达,用细胞周期抑制剂Aphidicolin处理细胞抑制细胞周期,在Aphi...     

人全长PLCγ1基因真核表达载体的构建及鉴定

目的构建人全长PLCγ1基因真核表达载体,以便进一步研究PLCγ1的作用及其机制。方法自行设计一对带有HindⅢ和NotⅠ酶切位点的引物,采用RT-PCR技术从MG63细胞中扩增人全长PLCγ1cDNA(3878bp),纯化后,经HindⅢ-NotⅠ酶切,插入真核表达载体pLNCX2中,构建重组质粒pLNCX2/PLCγ1。通过PCR,限制性酶切分析及DNA直接测序对所构建的重组质粒进行鉴定。同时经瞬时转染后,利用RT-PCR及Westernblotting转染后LoVo细胞中PLCγ1的表达。结果RT-PCR产物经琼脂糖电泳分析所得片段大小与预期相符(3878bp)。重组质粒经HindⅢ-NotⅠ酶切后,得到3878bp(PLCγ1基因)及6100bp(载体pLNCX2)两个片段,同时重组质粒经HindⅢ-BglⅡ酶切后,得到约1300bp及约8500bp两个片段,与预期一致。DNA测序也证实了重组质粒的正确。经RT-PCR和Westernblot分析证实转染pLNCX2/PLCγ1的LoVo细胞中PLCγ1的表达均高于转染空质粒pLNCX2的LoVo细胞及未转染的LoVo细胞。结论成功构建了人全长PLCγ1基因真核表达载体pLNCX2/PLCγ1,为进一步研究PLCγ1的作用奠定了基础。     

不同给药方式下家兔尿液中乌头碱代谢产物的比较

目的：研究不同给药方式下家兔尿液中的乌头碱(AC)代谢产物,探讨不同代谢产物的作用。方法：5只家兔分为AC　1.0 mg•kg^-1灌胃给药组、0.02 mg•kg^-1静脉给药组及空白对照组,收集代谢产物,采用LC/ESI-MSn方法,通过测定化合物的准分子离子和各级碎片离,推断尿液中存在的代谢产物。结果：与空白对照组比较,静脉给药组尿液中除原形药物外主要有1种代谢产物(M1),灌胃给药组除原形药物外主要有2种代谢产物(M1,M2);M1为16-O-去甲基乌头碱,M2为乌头碱去氧去甲基产物;M1和M2可能为AC失去1个亚甲基和脱去1个羟基所形成的代谢产物。结论：AC经不同体内代谢方式得到2种代谢产物,与AC原型相比,2种代谢产物与AC的药理及毒理作用密切相关。     

MT蛋奶粉对铅中毒大鼠脑和股骨中微量元素的影响

目的：探讨含金属硫蛋白（metallothionein,MT）的蛋奶粉对铅中毒大鼠脑和股骨中微量元素铅、铜、锌、铁含量的影响。方法：30只Wistar大鼠随机分为对照组（n=10）、铅中毒组（n=10）和铅中毒MT蛋奶粉处理组（n=10）。大鼠饮服0.2% 醋酸铅水溶液3周造成实验性铅中毒后,灌服500 g•L^-1 MT蛋奶粉3周。实验结束时采集全血、股骨和脑组织,用氰化高铁比色法测定全血血红蛋白含量,用原子吸收分光光度法测定元素铅、铜、锌、铁含量。结果：与对照组比较,铅中毒组大鼠血红蛋白含量明显降低（P<0.05）;股骨和脑中铅、铁含量均显著升高（P<0.01）,锌含量明显降低（P<0.05）。铅中毒组大鼠灌服MT蛋奶粉后与铅中毒组比较,血红蛋白含量明显升高（P<0.05）,脑、股骨中铅含量均明显降低（P<0.05）,脑股骨中铜含量均显著升高（P<0.01）。结论：服用MT蛋奶粉能明显纠正铅中毒大鼠脑和股骨中微量元素代谢紊乱。     

附子煎煮与配伍应用中乌头类生物碱含量的变化及意义

目的：对比研究水浴和微波加热条件下附子中乌头类生物碱的水解规律,检测与不同中药配伍煎煮后附子中乌头类生物碱的含量变化。方法：分别以水煎煮和微波加热的方法提取附子药材,采用高效液相色谱法(HPLC)分别对其中的3种双酯型生物碱及其水解产物进行含量测定;同时检测与不同中药配伍煎煮后,附子中乌头类生物碱减少程度的差异。结果：附子水煎煮30 min后,中乌头碱和次乌头碱的含量分别变为峰值的10.5%和41.9%,乌头碱完全检测不到;附子微波加热150 s后中乌头碱、乌头碱和次乌头碱含量分别为峰值的59.2%、41.4%和86.6%。与生附子单煎煮比较,生附子与大黄、干姜或甘草共煎后,乌头类生物碱总含量均明显下降,分别降至附子单煎煮时的52.8%、66.2%和53.4%;与人参或白芍共煎煮后略有下降,分别为附子单煎煮时的79.5%和83.7%。结论:附子中乌头类生物碱在水煎煮和微波加热过程中有不同的水解规律;生附子与大黄、干姜、甘草、人参或白芍共煎后乌头类生物碱含量均有下降。     

亲和层析法提取纯化人心肌肌钙蛋白Ⅰ

目的研究出一种提纯人心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）的简便方法。方法将兔骨骼肌肌钙蛋白C（sTnC）与经溴化氰活化的Sepharose 4B凝胶偶联,制成sTnC亲和层析柱。人心肌经匀浆、离心后,上清液上sTnC亲和层析柱,洗脱后可获得cTnⅠ纯品。结果SDS-PAGE得到一条电泳带,其分子量为25kD。Western blot结果表明,提纯的cTnⅠ可被cTnⅠ单克隆抗体特异性识别。cTnⅠ试产率为82．6mg／100g人心肌。结论亲和层析法提高了cTnⅠ的产率,为下一步cTnI体外诊断的研究工作打下基础。     

用“基因释放剂”从血液及羊水细胞中提取DNA直接用于PCR扩增

报告了用“基因释放剂”从血液及羊水细胞中提取ＤＮＡ的简捷方法。少量样品（２～５μｌ血液，或０．１～１．６ｍｌ羊水）经清洗后加入基因释放剂煮沸后即可直接用于ＰＣＲ扩增。此法提取的ＤＮＡ用于α－和β－珠蛋白基因的扩增效果良好，扩增产物可直接用于限制酶消化。这一新方法可作为应用ＰＣＲ进行基因分析和产前诊断的有用工具。