HLA-A*0201/CAP-1四聚体在结直肠癌研究中的应用1

目的:应用HLA-A*0201/CAP-1四聚体,分析HLA-A*0201+CEA+结直肠癌患者的外周血及癌旁肠系膜引流淋巴结的特异性CTLs的数量。方法:分离健康人(18例)PBMC和结直肠癌(23例)患者PBMC以及癌旁肠系膜引流淋巴结的淋巴细胞,应用流式细胞术,以HLA-A*0201/CAP-1和HLA-A*0201/FLUmp四聚体检测CAP-1和FLUmp特异性CTLs的频率。结果:在25例HLA-A*0201+个体中,结直肠癌组和正常组外周血单个核细胞中HLA-A*0201/FLU四聚体+CD8+细胞的频率分别为(0.671±0.421)%和(0.564±0.408)%,两组之间无显著差异(P=0.525)。结直肠癌组和正常组外周血单个核细胞中HLA-A*0201/CAP-1四聚体+CD8+细胞的频率分别为(2.409±2.385)%和(0.020±0.021)%,两组之间有显著差异(P=0.008)。结论:HLA-A*0201+结直肠癌患者HLA-A*0201/CAP-1四聚体+CD8+细胞的频率升高,说明CEA特异性CTLs在结直肠癌患者的免疫监视功能中具有重要的作用。对存在针对肿瘤抗原的特异性CTLs却无法阻止肿瘤进展的具体机制需要更加深入的研究。     

IL-17A对肝细胞癌可溶性MICA表达的影响

目的:探讨患者外周血清白介素-17A(serum Interleukin-17A,IL-17A)对肝癌细胞可溶性MICA(soluble major histocompatibility complex class Ichain-related gene A,sMICA)的调控作用及可能机制.方法:收集慢性肝炎(chronic hepatitis,CH)、肝硬化(liver cirrhosis,LC)、HCC、健康对照者(healthcontrol,HC)各30例,采用ELISA方法分别检测血清sMICA及IL-17A的表达水平;HepG2和PLC/PRF/5细胞加入0、10、50ng/mL的重组人IL-17A(RhIL-17A)作用24h后,分别采用ELISA检测sMICA的表达;并在50ng/mL的RhIL-17A作用24h后,采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测膜型MICA的表达、荧光定量RT-PCR检测MICA mRNA的表达、Western blot检测ADAM9,p65和磷酸化p65(P-p65)的表达.结果:HCC组血清IL-17A与sMICA水平明显高于CH、LC、HC组(IL-17AF=46.321,sMICAF=24.144,P<0.01),且二者呈正相关(r=0.28,P<0.01);RhIL-17A显著增加HCC细胞sMICA、膜MICA mRNA的表达(P<0.05),且可增加HCC细胞ADAM9和P-p65蛋白的表达.结论:IL-17A能上调肝癌细胞MICA mRNA表达,可能与其活化NF-B-ADAM9信号通路,从而增加HCC sMICA的表达有关.     

中医药治癌的伦理思考

40多年来，通过中医、中西医结合工作者的艰辛努力，尤其近年来随着分子生物学包括基因组学及蛋白质组学等在肿瘤研究领域的渗透．中医药防治肿瘤的理论与实践得到进一步深化。中医药在放化疗毒减毒增效，增强免疫功能，延缓转移复发，提高生命质量和生存率等方面的疗效经受住了实践的考验，肿瘤的中西医结合治疗不但是国内肿瘤专家所采取的治疗方法，而且得到了国际上学者和患者的接受与认可，中西医结合防治肿瘤工作正在迅速发展。但与之伴随的社会伦理问题也日益值得人们来关注，本文就此试加以探讨。     

南蛇藤茎提取物对人胶质母细胞瘤细胞株U251增殖和凋亡的影响及机制

目的:探讨南蛇藤茎乙酸乙酯提取物(Celastrus orbiculatus extract,COE)抗人胶质母细胞瘤U251细胞株的增殖和凋亡作用,研究COE抗肿瘤的分子机制,为寻找新的治疗胶质母细胞瘤药物提供依据。方法:以人胶质母细胞瘤细胞株U251为研究对象,设空白组和COE组,应用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]比色法观察COE对细胞活力的抑制作用;5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxy uridine,Brd U)标记检测COE对U251细胞增殖的影响;Annexin V/碘化丙啶(PI)双标法检测COE对U251细胞凋亡的作用;透射电镜下观察经COE干预后U251细胞超微结构变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测COE对凋亡标志基因B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X,Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,COE能够明显抑制U251细胞的增殖(P0.05);诱导U251细胞的早期凋亡,电镜下可见到凋亡小体,影响并改变U251细胞超微结构;COE能促进Caspase-3,Bax蛋白表达,降低Bcl-2,Bcl-2/Bax蛋白表达(P0.05)。结论:COE能有效抑制胶质母细胞瘤U251细胞株的增殖,促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制与调节Bcl-2和Caspase-3表达有关。     

齐墩果烷型五环三萜协同miR-451抑制胃癌AGS细胞的增殖和迁移及 其可能的机制

目的：探索南蛇藤提取物齐墩果烷型五环三萜（28-hydroxy-3-oxoolean-12-en-2-oic acid）协同miR-451对人胃癌AGS细胞增殖、迁移的影响及其可能的分子机制。方法：用miR-451过表达慢病毒感染AGS细胞,并用盐酸多西环素（DOX）10或100 ng/ml 诱导 24 h,构建过表达 miR-451 的细胞 AGS/miR-451+。采用 10、20、40、80、160 μmol/L 的齐墩果烷型五环三萜处理AGS/miR-451+细胞,MTT法、划痕实验分别检测细胞增殖和迁移能力的变化,WB法检测细胞中mTOR通路及凋亡相关蛋白表达水平的变化。结果：成功构建过表达miR-451的AGS/miR-451+细胞。与未加药对照组相比,齐墩果烷型五环三萜处理后AGS/miR-451+细胞的增殖抑制率均呈时间和浓度依赖性升高（P<0.05或P<0.01）,细胞迁移率均显著降低（P<0.05或P<0.01）。齐墩果烷型五环三萜处理组细胞中,mTOR 信号通路相关蛋白的表达量均有所降低（P<0.05或P<0.01）;凋亡相关蛋白中,Bcl2的表达量下降,BAX、caspase-3、caspase-1及细胞色素c的表达量升高（P<0.05或P<0.01）。结论：齐墩果烷型五环三萜能够协同miR-451抑制人胃癌AGS细胞的增殖与迁移,其机制可能与影响凋亡和mTOR信号通路相关蛋白的表达有关。     

除痹片对佐剂性关节炎大鼠的抗炎镇痛作用及其机制

中医临床实践证明,传统中药具有较好的抗炎镇痛作用,并被广泛地应用于各种病症的治疗。本研究在此基础上采用自行研制的中药复方制剂除痹片,建立佐剂性关节炎(AA)大鼠模型,探讨除痹片对AA大鼠的抗炎镇痛作用及其相关机制,现报告如下。     

代谢组学在类风湿关节炎诊断和治疗中的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种致残率高且病因不明的慢性自身免疫性疾病,早诊断、早治疗对于预防该疾病进一步发展至关重要。近年来,代谢组学技术因其具有整体性、动态性、高灵敏度和高通量等优势广泛应用于生命科学的各个领域,该文就代谢组学技术在RA早期诊断、疾病分型、药物疗效预测与评价研究等方面的进展进行综述,以期从代谢调控角度为RA的临床诊断和治疗提供新的思路。     

论附子的炮制与先煎

近年来中医论治扶阳一法渐兴,遂附子的应用范围越来越广,用量越来越大,然而附子的现代化学药理研究结论与传统中医药理论在炮制上有些相悖,现从附子的炮制。传统观点和现代研究三个方面探讨附子的炮制与先煎。附子为毛茛科植物乌头的子根加工品,6月下旬至8月上旬采挖,除去母根,须根及泥沙,习称"泥附子"[1],其炮制方法如下。     

南蛇藤属植物的化学成分与药理作用

南蛇藤属植物分布广泛,含有丰富的萜类、生物碱、黄酮类化合物。近来的研究证明其具有抗肿瘤、抗炎、镇痛、抗菌等广泛的药理活性,因此对其药效学物质基础进行深入的研究具有重要的现实意义。