MMP-3和TIMP-1在白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-3(matrixmetalloproteinase-3,MMP-3)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissueinhibitorofmetalloproteinase-1,TIMP-1)与白内障发病机制的关系。方法采用免疫组织化学方法测定MMP-3和TIMP-1在前囊下性白内障31眼、核性白内障28眼和正常晶状体12眼上皮细胞(lensepithelialcell,LEC)中的表达。结果MMP-3在前囊下性白内障的表达分别与核性白内障、正常晶状体比较,差异有显著意义(χ2=31.490,34.479;P=0.000),而核性白内障与正常晶状体相比较,差异无显著意义(χ2=2.449,P=0.118);TIMP-1表达在3组LEC中差异均无显著意义(P>0.05);MMP-3与TIMP-1在前囊下性白内障LEC中的表达没有相关性(r=0.121,P=0.516),而在核性白内障中有相关性(r=-0.513,P=0.005)。结论MMP-3表达增强及MMP-3/TIMP-1的表达失衡可能与前囊下性白内障的形成密切有关。     

重组腺相关病毒介导的HSV-tk/GCV体系对兔晶状体上皮细胞的抑制作用

目的 探讨2型重组腺相关病毒(rAAV2)载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/丙氧鸟苷体系(HSV-tk/GCV)对体外培养兔晶状体上皮细胞(N/N1003A)的抑制作用,以及晶状体上皮细胞死亡的机制.方法 实验研究.rAAV2载体介导增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)转染体外培养N/N1003A细胞,倒置荧光显微镜观察细胞中EGFP的表达,流式细胞仪检测病毒的转染效率.重组病毒rAAV2/HSV-tk转染体外培养的N/N1003A细胞为实验组,以没有转染重组病毒的细胞作为对照组,MTT法检测HSV-tk/GCV体系对细胞作用的浓度依赖性、时间依赖性和旁观者效应;相差显微镜、透射电镜、Hoechst33258染色观察细胞凋亡、坏死改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期的变化.不同浓度GCV对两组细胞的作用结果采用两因素析因设计的方差分析;两组细胞周期和凋亡的比较采用两样本t检验.结果 rAAV2载体能介导EGFP基因稳定高效转染N/N1003A细胞.GCV对两组细胞的杀伤作用有剂量-效应依赖关系(F=13 076.239,P<0.001);实验组N/N1003A-tk细胞的存活率低于对照组,差异有统计学意义(F=53 947.119,P<0.001).实验组GCV的IC50为2 mg/L,而对照组IC50为524 mg/L.GCV的杀伤效应随时间延长而增强,且存在明显的旁观者效应.N/N1003A-tk细胞在GCV作用下出现明显的细胞凋亡和坏死,细胞的凋亡率7.18%±2.04%,与对照组(3.50%±0.56%)比较差异有统计学意义(t=3.83,P<0.01);S期细胞比例明显增加,G0/G1期细胞比例明显减少,与对照组比较差异有统计学意义(S期细胞比例:t=3.55,P<0.01;G0/G1期细胞比例:t=4.29,P<0.01).结论 GCV可有效杀伤重组腺相关病毒rAAV2/HSV-tk转染的兔晶状体上皮细胞,并具有较强的旁观者效应.     

豚鼠近视眼视网膜Müller细胞的原代培养

目的 研究豚鼠近视眼视网膜Muller细胞原代培养的方法.方法 用半透明眼罩遮盖法建立豚鼠的近视眼模型.采用酶消化法培养豚鼠近视眼视网膜Müller细胞.用倒置相差显微镜观察Müller细胞的生长状况,以GFAP、Vimentin免疫组化染色进行细胞鉴定.结果 半透明眼罩遮盖豚鼠右眼2周后,遮盖眼眼轴延长,近视形成.原代培养的视网膜Müller细胞贴壁生长,胞体较大、扁平,GFAP、Vimentin免疫组化染色呈阳性.结论 酶消化法是培养豚鼠近视眼视网膜Müller细胞的一种有效方法.     

复性近视散光LASIK术后角膜散光的动态分析

目的　观察、分析准分子激光角膜原位磨镶术 (LaserinSituKeratomileusis,LASIK)治疗复性近视散光手术前后角膜地形图的变化规律 ,研究LASIK术对角膜各区散光度及散光轴的影响。方法　对 6 5例复性近视散光患者 (12 6眼 )行LASIK手术 ,术前、术后 1月、 3月、 6月分别行角膜地形图检查。将患者按散光程度不同分为两组 ,观察、比较两组手术前后不同时期角膜不同区的散光度及散光轴的变化规律。结果　复性近视散光患者LASIK术后角膜散光度降低以 3mm区最为明显 ,而 5mm、 7mm区表现为散光轻度增加 ,术后 3～ 6月恢复至与术前差异无显著意义 (P >0 0 5 )。角膜 3mm区散光部分欠矫与非角膜散光因素呈正相关系 :角膜 3mm区散光欠矫度 (D) =1 196×非角膜散光因素 +1 117;角膜各区之间散光轴位差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,术前、术后不同时期差异均无显著意义 (P >0 0 5 )。结论　复性近视散光LASIK术后角膜散光以 3mm区散光值减少明显 ,且散光高度组减少更明显 ,而 5mm、 7mm区早期散光轻度增加 ,术后 3～ 6月逐渐恢复至术前水平。角膜 3mm区散光部分欠矫与非角膜散光因素密切相关。手术前后角膜各区散光轴均保持良好的一致性。     

多焦视网膜电图的增龄变化

目的:探讨不同年龄正常人多焦视网膜电图(mul-ticalelectroretinogrammERG)在视网膜的分布特征,以获得正常参考值。方法:应用法国Metrovision公司生产的VisionMonitor视觉诱发系统检测20例(28眼)正常人mERG,分为2组,其中年龄≥50岁者,为10例(15眼),年龄<50岁者;为10例(13眼)。检测视野的水平视角±30°,垂直视角±23°,采用ERG-jet接触镜电极,于5min记录61个视网膜部位的反应。结果:黄斑中心凹第1环及第2环N1波、P1波、N2波的振幅密度值两组比较差异有显著意义(P<0.05),而潜伏期值P1波两组比较差异有显著意义(P<0.05)。第3、第4环N1波、P1波、N2波的潜伏期均较其他各区缩短。结论:随着年龄的增长mERG的各波振幅密度值及潜伏期值的变化,与视网膜感光细胞功能逐渐减低有关。     

传统遮盖法治疗儿童屈光性弱视的远期疗效

弱视是一种常见而严重影响儿童视功能发育的眼病。屈光不正、屈光参差是造成弱视的主要原因之一，采用传统遮盖法治疗儿童屈光性弱视的远期疗效观察报道较少，作者将随访２—１３年用传统遮盖法治疗的１５２例２７２眼屈光性弱视总结报告如下。对象与方法１．对象：屈光性...     

外源性视黄酸对鸡后巩膜基质MMP-2表达作用的动态观察

注射后随时间延长眼轴及屈光度逐渐增加,不同时间组间差异极显著(P<0.01),MMP-2mRNA表达上调,不同时间组间差异无显著性(P>0.05)。自身对照组眼轴及屈光度均有增加,MMP-2mRNA表达较同龄正常对照组有轻度上调,组间差异极显著(P<0.01)。免疫组化显示,MMP-2表达的增高主要在巩膜成纤维细胞层。结论外源性视黄酸能够上调巩膜MMP-2的转录和表达,并可能通过这一途径促进眼轴及屈光度的增加。     

血管活性肠肽受体拮抗剂VIPhybrid对鸡形觉剥夺性近视眼发展的影响

目的:探讨非选择性血管活性肠肤受体(vasoactive intestinal peptide receptors,VIPR)拮抗剂VIPhybrid对雏鸡眼球后壁组织VIP蛋白质和mRNA表达的调控及对雏鸡形觉剥夺性近视眼(form deprivation myopia,FDM)发生发展的影响.方法:随机选择出生1天龄健康黄色来亨雏鸡共72只,分为6组,每组12只:Ⅰ组单眼遮盖作为空白对照组;Ⅱ组玻璃体腔内注射生理盐水20μL加遮盖作为阴性对照组;Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组分别向玻璃体腔内注射低浓度(3×10-12mol/L)、中浓度(3×10-10mol/L)和高浓度(3×10-8mol/L)VIPhybrid,并加遮盖作为实验组;以上各组均取右眼注射并持续遮盖1周;Ⅵ组双眼均未遮盖、未注射药物作为正常对照组.各组均采用视网膜检影验光检测屈光度,眼科A超测定活体眼轴长度,眼球后壁组织行SP法免疫组织化学染色(每组取7只眼)和RT-PCR的方法(每组取5只眼)分别检测VIP蛋白质和mRNA的表达.结果:遮盖1周后,Ⅰ组、Ⅱ组眼轴延长,形成高度近视眼,组间无统计学差异(P＞0.05);Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组近视性屈光度数、眼轴长度明显低于Ⅰ,Ⅱ组(P＜0.01),仍高于Ⅵ组(P＜0.01);Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组近视性屈先度数、眼轴长度与VIPhybrid浓度呈负相关.VIP在正常视网膜中广泛表达,其中在光感受器外节有强阳性表达;VIP蛋白质和mRNA表达,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组与Ⅰ组、Ⅱ组比较明显下调(P＜0.01),仍高于Ⅵ组(P＜0.01);Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组VIP蛋白质和mRNA表达随VIPhybrid浓度的升高而下降.结论:FDM中视网膜VIP蛋白质和mRNA表达明显上调;VIPhybrid可有效减缓鸡FDM的发展,下调鸡FDM中视网膜VIP蛋白质和mRNA的表达,可能为人类近视眼的药物治疗提供一条新思路.     

小鸡形觉剥夺性近视眼巩膜基质金属蛋白酶2 mRNA表达

目的：探讨小鸡形觉剥夺性近视眼（FDM）后极部巩膜基质金属蛋白酶2（MMP-2）mRNA表达水平的时间动态性变化以揭示小鸡FDM巩膜细胞外基质（ECM）主动重塑的可能分子机制。方法：取1 d龄来亨雏鸡以半透明眼罩分别遮盖右眼4,7,14,21,30 d制备FDM动物模型,对侧眼未遮盖眼为自身对照眼,并随机选取同龄小鸡作为正常对照眼,每组10只。实验前及各预定实验时间进行视网膜检影验光及眼轴长度测量。采用一步法逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）检测每组小鸡后极部巩膜MMP-2 mRNA表达水平。结果：与正常对照组、自身对照组相比,FDM组小鸡后极部巩膜MMP-2 mRNA表达明显增高（P<0.001）;不同遮盖时间组MMP-2 mRNA表达水平不同,随遮盖时间延长其表达逐渐上调,至14 d达最高峰,但以后轻度下降,且维持在一较高水平;自身对照组MMP-2 mRNA表达水平较同龄正常对照组呈上调趋势,但组间比较无统计学意义（P>0.05）。结论：后极部巩膜MMP-2 mRNA表达增高极可能为启动FDM巩膜ECM早期主动重塑的始发原因。     

白内障超声乳化吸出术后多焦视网膜电图变化

目的:采用多焦视网膜电图(multifocalelec-troretignroam,mfERG)评价年龄相关性白内障患者行超声乳化白内障吸出术后视网膜功能的改变。方法:应用法国Metrovision公司生产的VisionMonitor视觉诱发系统检测23例23眼年龄相关性白内障超声乳化术后及8例11眼同龄正常对照眼的mfERG,检测视野的水平视角±30°,垂直视角±23°,采用ERG-jet接触镜电极,于5min记录61个视网膜部位的反应。结果:与正常对照组比较,白内障术后组mfERG的N1波潜伏期在各视网膜半区、4个象限及第2～5环延长,差异有显著性意义;P1波潜伏期在视网膜上半区、颞侧区、颞上象限、颞下象限和第2～4环延长,差异有显著性意义;N2波潜伏期在视网膜下半区、颞下象限及第2～4环明显延长,差异亦有显著性意义。术后组N2波振幅密度在视网膜颞侧区、颞上和颞下象限降低,与对照组比较差异有显著性意义。结论:白内障术后眼mfERG的一阶kernal反应有明显改变,为进一步研究白内障患者视网膜的功能提供参考。