利用果蝇原代细胞系统研究Gef26对肌肉细胞F-actin的调控机制

目的：探讨Gef26对果蝇原代细胞发育的影响。方法：通过培养野生型、gef26突变体以及gef266/+;abl4/+双突变体果蝇胚胎的原代细胞,观察细胞形态。对细胞骨架F-actin进行荧光染色,观察细胞骨架的分布。结果：在果蝇胚胎的原代细胞中,野生型肌肉细胞形态正常,gef26突变体的肌肉细胞形态明显异常;gef266/+;abl4/+双突变体肌肉细胞形态正常,即阿贝尔森酪氨酸激酶（Abelson tyrosine kinase, Abl）突变挽救gef26突变体肌肉细胞形态异常的表型;野生型肌肉细胞中的F-actin呈现出规整的形态和连续的排布,而两株gef26突变体肌肉细胞中的F-actin排布却呈现出不规整的形态和不连续的排布; gef266/+;abl4/+双突变体细胞中的F-actin呈现出规整的形态和连续的排布,即Abl突变挽救gef26突变体F-actin组装紊乱的表型。结论：Gef26影响肌肉细胞的细胞骨架组装,实验结果提示Gef26通过Abl信号通路调控肌动蛋白的细胞骨架组装。     

颅颈交界处及高位颈髓肿瘤的显微外科手术治疗

颅颈交界区肿瘤位置深且毗邻脑干、高位颈髓等重要结构,手术难度和风险极大,但随着显微外科技术的推广和术中电生理监护技术的应用,临床多主张手术治疗。目前国内外关于手术方式的选择及疗效评价尚无统一标准,     

抑制 BHK21细胞 STYK1/NOK基因的转录组分析 #br#

目的 转录组分析抑制丝氨酸-苏氨酸-酪氨酸激酶 1（STYK1/NOK）后仓鼠肾正常细胞 BHK21的基因表 达,并分析其可能作用的信号通路。方法 BHK21细胞分为空载体组（转染 6 µg空载体 pBs/U6）、低转染浓度组（2 µg si-STYK1/NOK质粒+4 µg空载体 pBs/U6）和高转染浓度组（6 µg si-STYK1/NOK质粒）。转染 48 h后,Western blot 检测 STYK1/NOK蛋白表达,基于检测结果,选取空载体组和高转染浓度组提取总 RNA进行转录组测序。将测序所 得的序列进行过滤比对,获得差异表达基因后,应用 R软件进行生物功能（GO）分析和 KEGG信号通路分析。应用 STRING蛋白质互作数据库中的互作关系进行差异基因蛋白互作网络的分析。采用 qRT-PCR验证关键差异表达基 因亚甲基四氢叶酸脱氢酶 2（Mthfd2）、转录激活因子 5（Atf5）,ⅡA分泌型磷脂酶 A2（Pla2g2a）、6-磷酸果糖-2-激酶/ 果糖-2,6-双磷酸酶 3（Pfkfb3）的表达。CCK-8法检测空载体组和高转染浓度组细胞增殖情况。结果 Western blot 结果表明高转染浓度组明显抑制 STYK1/NOK蛋白表达。高转染浓度组与空载体组相比,共发现差异表达基因 44 个,包括 19个上调基因和 25个下调基因。GO富集分析发现差异表达基因主要影响生物调控、细胞进程、代谢调控、 细胞生物过程、细胞、细胞部分、胞外区、配体和催化活性。KEGG通路分析发现差异表达基因主要集中作用于免疫 系统、癌症、细胞周期、信号转导和氨基酸代谢等方面。qRT-PCR结果表明,高转染浓度组Mthfd2、Atf5的相对表达量 显著上调（P＜0.05）,Pfkfb3、Pla2g2a的相对表达量显著下调（P＜0.05）,与测序结果相一致。细胞增殖实验表明高转 染浓度组细胞增殖明显高于空载体组（P＜0.01）。结论 抑制 BHK21细胞 STYK1/NOK表达后,致使 BHK21细胞原 癌基因表达增强,抑癌基因表达减少,促进细胞增殖。     

中药配方颗粒一种新调剂模式的探索与实践

目的：探索门诊中药房中药配方颗粒调剂新模式,提升调剂工作质量,保障调剂药品安全。方法：按PDCA循环管理计划、实施、检查、处理4个步骤对中药配方颗粒调剂模式进行探索与实践。结果：将袋装配方颗粒或散装配方颗粒现有通用调剂模式改进为新的一种智能配发模式,利用智能发药设备实现机器调配辅以药品信息码扫描再复核为主的调剂模式,实施后调配一张常见数量、帖数处方的平均时间由原先的每张3.5 min缩短为0.6 min,平均复核时间由每张1.5 min缩短为0.5 min,显著提高中药配方颗粒的调剂效率和准确率,同时避免散装配方颗粒机器调剂后设备有残余粉末的现象,保障用药安全。结论：新的智能调剂模式可行性强,尤其适用于中药配方颗粒处方量大的医院门诊中药房。     

贵阳市白云区中学生健康素养现状及影响因素分析

目的了解贵阳市白云区中学生健康素养现况及其影响因素。方法采用多阶段分层整群抽样方法,根据"2014年中国居民健康素养问卷"编制问卷,对1 644名中学生进行问卷调查,使用SPSS 20.0软件对资料进行统计分析。结果贵阳市白云区中学生具备健康素养的比例为3.7%;三个方面中,健康素养水平最高的是基本技能29.9%,最低的是基本健康知识和理念3.2%;6类健康问题中,素养水平最高的是安全与急救49.5%,最低的是慢性病防治8.5%;单因素χ~2分析显示:父母文化程度、学习成绩自评和不同年级中学生具备健康素养水平的差异均有统计学意义(P0.05);多因素logistic回归分析显示:学习成绩自评和不同年级是贵阳市白云区中学生健康素养水平的主要影响因素。结论贵阳市白云区中学生健康素养水平较低,学校可以通过开设多种形式的健康教育课程、普及健康素养相关基本知识来提高中学生的健康素养水平,重点对象为学习成绩较差的低年级中学生。     

秋冬静电惹烦恼 赤足接“地气”免尴尬

现代生活,静电会越来越多 人身上的静电主要是由衣物之间或衣物与身体的摩擦造成的。穿着不同材质的衣物时,“带电量”的多少也是有所不同的,比如穿化学纤维制成的衣物就比较容易产生静电,棉制衣物产生的静电则较少。而干燥的环境更有利于电荷的转移和积累。另外,在我们生活的居室环境中,地毯、日常的塑料用具、油漆家具以及各种家电,均可以出现静电现象,而且随着家用电器的增多,以及长时间与电脑接触,人体也会积累很多静电。     

襄阳市首例布鲁氏菌病流行病学调查

目的了解襄阳市首例布鲁氏菌病病例的流行病学特点,找出发病的原因,为制订有效的防控措施提供依据。方法采用描述性流行病学方法对患者发病、就诊经过及现场流行病学调查结果进行分析。结果患者于2012年7月30日出现右肩关节疼痛,8月18日开始发热（体温37．7～38．2℃）。9月11—17日,出现左腿腓肠肌疼痛症状,10月7日患者出现高热（40℃）,左踝关节疼痛,双侧颈部、腋窝、腹股沟部淋巴结肿痛;期间多次到医院诊治,疼痛及发热症状无明显好转。患者于2012年5月从随州市某养殖户处购买的16只成羊中有5只母羊出现流产和死胎现象,患者经常未采取任何防护措施接生羊羔或拽出死胎盘。7月20日患者在右手有刀伤情况下直接将流产胎盘拽出,伤口接触胎盘羊水。据调查该养殖户于2011年7月曾发生畜间布病疫情。患者血液样本经检测,虎红平板试验阳性,试管凝集试验滴度为1：400（＋＋）。3名密切接触者血液样本经检测,虎红平板试验阴性,试管凝集试验滴度（-）。采集羊群血液样本95份,检出阳性14份,阳性率为14．74％。结论根据流行病学调查、临床表现、实验室检测结果,该病例为输入性传染源引发的布病病例。今后应加强畜牧检验检疫监管,从源头上控制布鲁氏菌病传染源的输入。     

荆州市首起人间布鲁氏菌病疫情的调查处理

目的调查荆州市首起人间布鲁氏菌病疫情的传染来源及危险因素,为今后布病疫情的处理提供依据。方法对重点人群进行病例搜索、流行病学调查、实验室检测。结果调查重点人群26人,采样检测26人,试管凝集试验(SAT)阳性4人,阳性率15.38%,发病3人,罹患率11.54%;检测283只存栏羊中的71只羊血清标本,检出阳性20份,对阳性检测的2户养羊户的羊和狗全部扑杀,焚烧后深埋。结论本起布病疫情的传染源是未经检疫的波尔山羊从外地引入,提示应加强家畜流通过程中的检疫,对重点人群开展监测。     

基于LC-MS/MS分析鹿角方的入血移行成分

目的：研究鹿角方的入血移行成分及规律,初步阐明其药效物质基础。方法：通过LC-MS/MS法分析大鼠含药血清,明确鹿角方的原型入血成分;及不同给药剂量下各移行成分相对峰面积与剂量的关系,解析移行规律。结果：通过与标准品保留时间、离子碎片信息的比对,鉴定鹿角方中13种成分（马钱苷、柚皮苷、橙皮苷、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、淫羊藿苷、补骨脂素、异补骨脂素、宝霍苷Ⅰ、红景天苷、莫诺苷、特女贞苷）均能以原型入血;随给药剂量上升,柚皮苷、橙皮苷、补骨脂素、异补骨脂素、特女贞苷的相对峰面积与剂量呈线性关系,而马钱苷、莫诺苷、红景天苷、宝霍苷Ⅰ呈非线性关系,其中马钱苷、莫诺苷、补骨脂素、异补骨脂素、宝霍苷Ⅰ、红景天苷易入血。结论：马钱苷、莫诺苷、补骨脂素、异补骨脂素、宝霍苷Ⅰ、红景天苷可能是鹿角方体内直接作用的主要物质,实验结果为鹿角方药效物质基础的研究提供借鉴。     

根皮素调控有氧糖酵解激活AMPK-P53信号通路抑制结肠癌细胞生长

目的探讨根皮素抑制结肠癌细胞生长的分子机制。方法不同浓度根皮素(phlortin)处理结肠癌SW-480细胞24 h,CCK-8法检测细胞的存活率并计算IC_(50),倒置显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡率,比色法检测细胞培养液中葡萄糖和乳酸浓度,荧光酶标仪检测细胞内ATP水平;Western Blot法检测各浓度根皮素对GLUT-1、糖酵解关键蛋白(HK2、PFKM)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、Thr172p-AMPK、P53、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Caspase-3)表达的影响。结果 CCK-8检测结果显示,根皮素能明显抑制SW-480细胞的增殖(P0.05),IC_(50)为(22.44±1.3)μmol·L~(-1)。流式细胞术表明,根皮素能诱导G_1期阻滞并促进凋亡(P0.01,P0.001)。比色法和荧光酶标仪检测结果显示,根皮素能限制SW-480细胞葡萄糖吸收和乳酸、ATP释放(P0.01,P0.000 1),抑制有氧糖酵解。Western Blot检测结果表明,根皮素能下调GLUT-1、HK2、PFKM、Bcl-2蛋白(P0.05,P0.01,P0.001,P0.000 1),上调P53、Bax、Caspase-3蛋白表达和Thr 172 p-AMPK、AMPK蛋白的比值(P0.01,P0.001,P0.000 1)。结论根皮素能够通过抑制GLUT-1蛋白表达限制SW-480细胞对葡萄糖的摄取,抑制细胞有氧糖酵解,最终激活AMPK-P53信号通路来诱导SW-480细胞凋亡,抑制其生长。