壳三糖苷酶研究进展

壳三糖苷酶(CT)是人体内的一种几丁质水解酶,即内源性β-氨基葡萄糖苷酶,为18-糖基水解酶家族的成员,由激活的巨噬细胞分泌。根据现在的研究结果推测,其可能与机体防御作用、巨噬细胞激活和形态发育有关。本文就目前壳三糖苷酶的研究进展及其与人类疾病的相关研究简要综述。     

壳三糖苷酶活性及其基因多态性与冠心病的关系

目的：通过对血清中壳三糖苷酶活挫及其基因多态性的研究，探讨其与冠心病和冠状动脉狭窄程度之间的关系。方法：对126例冠状动脉造影术（coronary angiography，CAG）阳性患者的血清壳三糖苷酶活性、C-反应蛋白（cRP）及白介素-6（IL-6）水平进行分析，并根据CAG结果将其按冠状动脉狭窄程度及不同狭窄支数分组。与对照组分析比较其临床意义，同时对壳三糖苷酶基因第10号外显子的24个碱基对重复序列突变进行研究。结果：冠心病组血清壳三糖苷酶活性、CRP及IL-6水平均较对照组显著升高，同时多支狭窄的病人其壳三糖苷酶活性大于1支狭窄的病人（P〈0．05），冠脉狭窄程度不同者差异也存在显著性（P〈0．05），但CRP、IL-6在不同分组中无明显差异。壳三糖苷酶第10号外显子24bp核苷酸缺失多态性分析结果显示，冠心病组和对照组之间的基因型频率和等位基因频率差异均无显著性（P〉0．05）。结论：血清壳三糖苷酶活性与冠状动脉病度密切相关，有望作为动脉粥样硬化进程的标志物。未发现对照组与冠心病组之间壳三糖苷酶基因型（NN、ND、DD）和等位基因（N、D）的频率差异存在显著性，提示该基因变异不一定是中国人群冠心病发病的易感因素。     

乙肝肝硬化患者血清CTHRC1及TGF-β_1相关性研究

目的研究乙肝病毒(HBV)致肝硬化患者血清胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)表达水平,分析其与疾病病程的关系。方法HBV感染确诊肝硬化患者,测定总胆红素(TBIL),清蛋白(ALB),凝血酶原时间(PT),根据测定结果对患者进行评分,分级为A、B、C三级,分为三组,测定各组透明脂酸酶(HA),层粘连蛋白(LN),Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP),Ⅳ型胶原(CⅣ)血清浓度以了解各组患者肝纤维化状态,B超检测三组患者门静脉内径以了解各组肝脏功能状态,采用ELISA法检测三组患者血清CTHRC1,转化生长因子β1(TGF-β1)浓度。结果 B、C组HA、LN、PⅢNP、CⅣ均明显高于A组和对照组,差异有统计学意义(P0.05),A组与对照组各指标浓度差别不大,差异无统计学意义(P0.05);各组肝硬化患者门静脉内径均明显大于对照组,B组与A组,C组与A组比较,差异均有统计学意义(P0.05);A、B、C组CTHRC1及TGF-β1浓度均高于对照组,且随着临床分期分值升高而升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论随着肝硬化患者临床分期进展及肝功能下降,血清CTHRC1及TGF-β1浓度上升,两者具有一定的相关性,其机制需要进一步研究。     

壳三糖苷酶活性与冠状动脉狭窄的关系

目的探讨血清壳三糖苷酶活性与冠状动脉病变的关系.方法对126例行冠状动脉造影术(CAG)患者按冠状动脉狭窄程度分组,将狭窄程度＜50%者列为对照组,≥50%者列为病变组,其中又按狭窄支数的不同分为1支、2支和多支,不同狭窄程度分为50%～75%组及75%～100%组.比较各组血清壳三糖苷酶及血脂等指标,进行统计学分析.结果病变组血清壳三糖苷酶水平较对照组显著升高,并且多支狭窄的患者酶活性高于单支患者(P＜0.01),冠脉狭窄程度不同者差异也有显著性(P＜0.05).结论血浆壳三糖苷酶活性与冠状动脉病变密切相关.     

热休克蛋白72的克隆表达及其对人脐静脉内皮细胞ECV304凋亡的影响

目的:克隆并表达热休克蛋白72(HSP72),探讨其在动脉粥样硬化患者血清中的表达及其对细胞凋亡的影响。方法:构建HSP72原核表达载体,纯化并制备相应的抗体;Westernblotting检测其在动脉粥样硬化患者血清中的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)法和流式细胞术分析HSP72对人脐静脉内皮细胞ECV304细胞增殖和凋亡的影响。结果:表达并纯化了HSP72蛋白,制备了其相应的多克隆抗体;HSP72在动脉粥样硬化患者血清中表达明显升高;对ECV304细胞增殖起到一定的抑制作用,同时能促进细胞凋亡。结论:HSP72可能通过促进细胞凋亡,从而促进动脉粥样硬化发生。     

贝克曼CX-9型全自动生化分析仪常见故障的处理

贝克曼 CX- 9全自动生化分析仪是美国贝克曼 -库尔特公司生产的 ,具有检测速度快、自动化程度高、测试精度好等优点 ,在样品分析过程中可随时插入急诊标本优先分析 ,2 4h待机状态极大地方便了工作。现将我们在使用过程中遇到一些故障及处理方法介绍如下 ,供参考。a)　 CX4样品针清洗杯 (Sample Probe/ Mixer Wash Cup)在仪器工作时有水自下往上喷出 ,造成样品之间的相互污染甚至水直接喷入比色杯中 ,严重影响结果的准确。出现这种现象的原因是仪器长时间工作后一些血清残留物使排废管道及废液罐堵塞 ,使液体排出不通畅。处理方法如下 :…     

儿童孤独症谱系障碍患者的母亲肠道菌群组成特征及其对疾病预测价值的研究

目的　研究孤独症谱系障碍（Autism spectrum disorder, ASD）儿童的母亲肠道菌群组成的特点,基于微生物生态学方法发现具有早期ASD 临床辅助诊断意义的生物标志物。方法　回顾性分析了76 例ASD 儿童的母亲和47 例正常发育（Typical development, TD）儿童的母亲粪便中肠道菌群高通量测序数据。对数据进行质控、剪切、拼接和降噪,得到扩增序列变异（amplicon sequence variants, ASVs）,基于ASVs 相对丰度的相关性建立具有生态学意义的17个丰度共变化群（co-abundance groups, CAGs）,比较ASD 儿童母亲和TD 儿童母亲CAGs 的差异,判别两组人群的生物标志物。结果　基于ASVs 相对丰度的相关性建立的17 个CAGs,其中,CAG8 主要由属于Bacteroides 的肠道细菌组成,CAG10 主要由属于Collinsella 的肠道细菌组成,而CAG16 主要由属于Erysipelotrichaceae 和Lachnospiraceae的肠道细菌组成。比较这些CAGs 相对丰度的结果显示,ASD 儿童的母亲CAG10 的相对丰度（3.37±0.76）较TD 儿童的母亲（0.95±0.25）显著升高,差异具有统计学意义（U=1 393, P=0.038）;与TD 儿童的母亲相比,ASD 儿童的母亲CAG8（7.27±1.11 vs 12.98±2.14）和CAG16（0.7±0.06 vs 1.37±0.33）显著降低,差异具有统计学意义（U=1 252 和1 387,P=0.005,0.038）。基于这些变化的肠道细菌建立的肠道紊乱指数（gut dysbiosis index, GDI）具有区别ASD 儿童的母亲和TD 儿童的母亲的潜力,当GDI 以-1.073 为阈值时,其敏感度和特异度分别为93.4% 和80.9%。结论　 ASD 儿童的母亲肠道细菌组成失调,基于母亲的肠道菌群计算的生物标志物可用于ASD 儿童的早期诊断。     

尿干化学分析法、散射比浊法、酶法检测尿清蛋白与尿肌酐及比值结果的一致性分析

目的 评价使用尿干化学法和散射比浊法检测尿清蛋白(Alb)、使用尿干化学法和酶法检测尿肌酐(Cr)及尿清蛋白肌酐比(ACR)的结果一致性分析。方法 收集157例清晨第一次尿液样本,尿清蛋白使用尿干化学法和散射比浊法、尿肌酐使用尿干化学法和酶法分别进行测定。采用kappa检验评价结果的一致性。结果 尿清蛋白kappa值为0.837 9(95%可信区间:0.718 1～0.957 7); 尿肌酐kappa值为0.769 7(95%可信区间:0.665 2～0.874 2); 尿清蛋白肌酐比kappa值为0.756 6(95%可信区间:0.628 6～0.884 6)。结论 尿干化学法检测尿清蛋白,尿肌酐及ACR的结果和散射比浊法检测尿Alb,酶法检测尿Cr及ACR结果具有较高的一致性。可以用于早期肾脏疾病的筛查以及CKD的分级中,初筛患者或长期病情维持过程中复查的监控手段。     

血浆D- 二聚体在2 型糖尿病患者早期肾损伤中的应用价值

目的 研究D- 二聚体(D-D) 对2 型糖尿病（T2DM）患者早期肾脏疾病风险评估的临床应用价值。方法 选取内分泌病房305 例2 型糖尿病患者作为研究对象，根据预估肾小球滤过率（eGFR）分为三组，分别为组I:eGFR≥ 90ml/（min· 1.73m-2）； 组II:eGFR:60~89ml/（min· 1.73m-2） 和组III:eGFR 30 ~ 59m/（min · 1.73m-2）， 检测D-D，纤维蛋白原（FIB），胱抑素C（Cys-C）和尿清蛋白/ 肌酐比值（ACR）等指标；再以D-D 的75% 分位数分组为DD ≤ 0.46mg/L 和D-D>0.46mg/L，对两组患者检测指标进行单因素分析；以eGFR<60ml/（min· 1.73m-2）作为肾损伤判定标准，进行D-D，FIB 和Cys-C 对肾损伤风险Logistic 回归及诊断指标的分析。结果 组I,II 和III 之间两两比较:得到组III 中DD，Cys-C 和FIB 分别与组II 和组I 比较，差异均有统计学意义（F=0.26，P<0.01，F=0.34，P<0.01；F=0.60，P<0.01，F=0.90，P<0.01；F=0.92，P<0.01，F=0.92，P<0.01），得到组II 中DD 和Cys-C 与组I 差异有统计学意义（F=0.08，P<0.01，F=0.3，P<0.01）；DD 分组进行比较:D-D>0.46mg/L 组患者的尿ACR，FIB，Cys-C 和eGFR 阳性率均高于D-D ≤ 0.46mg/L 组，差异有统计学意义（χ2=16.50，47.74，69.11，89.91，均P<0.01）；Logistic 回归分析:DD，FIB 和Cys-C 水平升高发生肾功能损伤的风险高于正常水平，差异有统计学意义[Exp(B)=6.07，P<0.01，Exp(B)=3.76，P<0.01，Exp(B)=53.34 P<0.01)]，三指标联合检测的诊断试验的ROC 曲线下面积是0.943。结论 血浆D- 二聚体水平与2 型糖尿病患者早期肾损伤的发生存在相关性。D- 二聚体，FIB 和Cys-C 水平与2 型糖尿病患者肾脏疾病的进展相关，并且三者联合检测对肾脏疾病风险的预测具有临床意义。