大鼠视网膜微血管周细胞的选择性培养

背景视网膜微血管周细胞（RMPs）在糖尿病视网膜病变（DR）等视网膜新生血管性疾病中的作用日益受到重视,并被视为潜在的治疗靶点。然而因组织材料来源受限及细胞分离纯化不易,RMPs体外研究工作的开展受到了限制。目的建立简便的大鼠RMPs分离、培养和纯化方法。方法摘取清洁级健康雄性SD大鼠的眼球,置于体积分数75％乙醇中浸泡1min,用眼科显微手术器械分离获取视网膜并将其剪成碎片,依次用2．5g／L胰蛋白酶和2g／LⅠ型胶原酶各消化15min,消化后分别过直径100μm和55μm滤网,收集视网膜消化后的微血管片段,用含有体积分数20％胎牛血清的低糖型DMEM接种于6孔板,至培养14～16d细胞达到80％～90％融合时进行消化传代,培养和传代期间通过换液法及差异消化法去除杂质细胞。用倒置相差显微镜观察细胞的形态和生长状态,用免疫荧光法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、血小板源性生长因子受体-β（PDGFR—β）、von Willebrand因子（vWF）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达,以鉴定RMPs。结果RMPs在接种后24—48h自微血管片段中迁移出,7d后形成中等大的细胞集落,14～16d后达到80％-90％融合状态。RMPs传代后生长速度加快,至12—14d达到融合。形态学鉴定显示,培养的细胞呈宽大、扁平、不规则形并伴多个突起的典型周细胞形态特征,且传代至第9代形态特征无明显变化。免疫荧光法检测显示,所培养的细胞均不表达内皮细胞特异性标志物vWF,约96％的细胞对周细胞标志物α—SMA或PDGFR—β抗体呈阳性反应,极少量细胞对胶质细胞特异性标志物GFAP抗体呈阳性表达。结论本实验成功建立了一种简单、经济的大鼠RMPs分离、纯化、培养方法,可以获得理想的高纯度RMPs。     

非索伪麻缓释胶囊治疗变应性鼻炎疗效与安全性的多中心临床研究

［摘要］目的观察非索伪麻缓释胶囊治疗变应性鼻炎的疗效和安全性。方法变应性鼻炎患者240例,采用随机、双盲双模拟、多中心、平行对照的方法,随机分为治疗组和对照组各120例,分别采用非索伪麻缓释胶囊,每次1粒,bid,po;或氯雷他定伪麻黄碱缓释片,每次1片,bid,po,连续用药7～14 d。疗程结束时以综合疗效改善百分率、症状体征总积分下降值来评估其临床疗效,以不良事件、实验室检查等来评估其安全性。结果共有224例患者纳入疗效分析,治疗组（113例）及对照组（111例）的综合疗效改善百分率分别为92.92%和95.50%（P＞0.05）。29例患者发生45例次不良反应（治疗组13例21例次,对照组16例24例次）,主要表现为口干、头晕、嗜睡、乏力等。两组间不良反应发生率差异无显著性（P＞0.05）。无一例严重不良事件发生。结论非索伪麻缓释胶囊可有效控制变应性鼻炎症状,疗效显著,安全性好。     

特异性免疫治疗联合糖皮质激素治疗屋尘螨过敏性哮喘患者的疗效与安全性

目的评估比较特异性免疫治疗（specific immunotherapy,SIT）联合吸入性糖皮质激素（inhaled corticosteroids,ICS）和单用ICS治疗过敏性哮喘的疗效和安全性。方法92例单纯尘螨过敏性哮喘患者分为治疗组58例和对照组34例。治疗组使用屋尘螨脱敏注射液和布地奈德干粉吸入剂联合治疗1 a,脱敏注射液起始用量为1级浓度（50 TU•mL 1）0.1 mL,逐渐增量至3级浓度（5 000 TU•mL 1）0.8 mL维持治疗,布地奈德平均起始剂量为（430±200） μg•d 1;对照组使用布地奈德干粉吸入剂1 a,平均起始剂量为（420±205） μg• d 1。所有受试者每3个月进行一次哮喘控制测试问卷（asthma control test,ACT）问卷评分和肺功能检查,哮喘控制良好者ICS用量减少50%。所有受试者在治疗前和治疗后分别用哮喘生命质量表（asthma related quality of life questionnaire,AQLQ）进行生活质量评估。在整个研究过程中记录药物不良反应。结果两组患者治疗后哮喘控制情况、肺功能、AQLQ评分和ICS用量均较治疗前有明显改善（P＜0.05）。治疗组哮喘良好控制率（93.1%）高于对照组（70.6%,P＜0.05）,治疗组平均ICS用量［（260±80） μg•d 1］,低于对照组［（350±160） μg•d 1,P＜0.05］,肺功能检查和AQLQ评分两组间差异无统计学意义（P＞0.05）。SIT主要不良反应为注射部位红肿、风团和硬结,无严重不良反应发生。结论SIT联合ICS能有效治疗过敏性哮喘,疗效优于单用ICS,且安全性好。     

一例特殊腹痛的诊断

笔者在值夜班时曾接治一位因“腹痛伴恶心、呕吐2小时”来诊的36岁女性患者。患者由家属搀扶缓慢步入诊室,右手捂着腹部,面色较差。经详细问诊得知,患者曾干晚间进食冷饮,2小时后出现腹痛,伴恶心、呕吐,呕吐物为胃内容物,无呕血,无腹泻症状,无胸闷、胸痛,无发热。患者既往有风湿性心脏病、心房颤动病史,平时间断口服阿司匹林,无糖尿病、冠心病、高血压病史。末次月经是2010年6月21日。     

视神经炎药物治疗概况

视神经炎(optic neuritis,ON)指能够阻碍视神经传导功能,引起视功能一系列改变的视神经病变,如炎症、退变及脱髓鞘疾病[1]。中医学则视其视力下降急缓程度归为暴盲或视瞻昏渺范畴。笔者现就视神经炎治疗的药物选择方面综述如下。1西药1.1激素激素经常被用于治疗视神经炎,其使用     

清纤方抗实验性大鼠肝纤维化的作用研究

目的:探讨清纤方抗肝纤维化的治疗机制。方法:利用CCl₄制备肝纤维化Wistar大鼠模型,分为正常组、模型组、清纤方组、秋水仙碱组。治疗8周后,用HE和Masson染色观察肝纤维化的形成,免疫组化检测Ⅰ、Ⅲ胶原,RT-PCR检测肝组织中转化生长因子β₁(TGF-β₁)mRNA的表达。结果:Ⅰ、Ⅲ胶原和TGF-β₁mRNA的表达在治疗组均明显减少。结论:清纤方能有效减轻肝纤维化大鼠的肝脏损伤及纤维化程度,其机制可能与抑制肝内TGF-β₁的表达有关。     

光叶决明中1个新的二聚苯丙素类化合物

目的对决明属植物光叶决明Cassia floribunda茎叶的化学成分进行研究。方法运用硅胶、MCI、RP-18、TLC、HPLC等多种色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从光叶决明90%乙醇提取物中分离得到18个化合物,分别鉴定为决明顺反二聚苯丙素(1)、反式对羟基肉桂酸乙酯(2)、shonanin(3)、邻苯二甲酸二丁酯(4)、1,6,8-三羟基-3-甲基蒽醌(5)、2,5-二甲基-7-羟基-色原酮(6)、2-(2′-羟丙基)-5-甲基-7-羟基色酮(7)、4′,7-二羟基-5-甲氧基黄酮(8)、柯伊利素(9)、山柰酚(10)、芹菜素(11)、3-甲氧基槲皮素(12)、6-demethoxycapillarisin(13)、7,4′-二羟基黄酮(14)、木犀草素(15)、butin(16)、甘草素(17)和圣草酚(18)。结论化合物1为新的苯丙素类化合物;化合物2～18均为首次从该植物中分离得到,其中,化合物2～4、8、9、11、13、14、16～18为首次从决明属植物中分离得到。     

纤维支气管镜检查在新生儿喉喘鸣病因诊断中的价值

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益景汤对早期糖尿病视网膜病变大鼠视网膜miRNA表达的影响

目的 探究益景汤对早期糖尿病视网膜病变（DR）大鼠视网膜组织中微小RNA(miRNA)表达的影响,筛选出益景汤干预早期DR的靶点miRNA。方法 将20只2月龄雄性SD大鼠使用链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,随机分为模型组（MG）和益景汤组（YJG）,另将常规喂养的大鼠设为对照组（CG）,每组10只。YJG组大鼠每日灌胃益景汤12.50 g/kg,CG、MG组大鼠灌胃等体积0.9%氯化钠注射液,均干预16周。给药完成后记录大鼠体质量,摘除双侧眼球剥离视网膜,提取总RNA,PCR扩增构建小RNA文库,采用高通量测序技术对该文库进行测序。对差异miRNA进行靶基因预测,并对靶基因进行基因本体论（GO）、Pathway分析,选择差异倍数较大的miRNA进行PCR验证。结果 （1）已知miRNA差异：筛选出644个已知miRNA,其中差异miRNA共59个。与CG组比较,MG组35个miRNA上调、6个miRNA下调,YJG组20个miRNA上调、4个miRNA下调;与MG组比较,YJG组6个miRNA上调、13个miRNA下调,差异均有统计学意义（均P<0.05）;其中,1个上调miRN...     

新兵空降训练卫勤保障的做法和体会

目的依据新兵空降训练特点,探索新兵空降训练的保障方法,不断降低空降训练伤的发生率。方法结合新兵保障实际,进行回顾性总结。结果总结出3个不同阶段卫勤保障的主要做法和体会：（1）思想重视,提高认识,制定保障计划是搞好新兵空降训练卫勤保障的前提;（2）搞好教育,提高意识,注重群策群防是搞好卫勤保障的基础;（3）科学施训,注重实效,减少伞降训练伤是搞好卫勤保障的关键;（4）争分夺秒,快速救治,提高早期救治效果是搞好卫勤保障的重要环节。结论总结出的经验,对搞好新兵伞降训练的卫勤保障具有一定参考价值。