恶性血液病RAS基因突变激活与Ras蛋白法尼基化抑制剂的研究进展

RAS癌基因是最早被确定的由点突变方式激活而致细胞癌变的原位癌基因,近年来研究发现RAS基因家族可通过受体介导的信号传递参与多种血细胞的增生、分化过程,导致多种恶性血液病的发生。如何抑制Ras信号通路调控血细胞的增殖与分化已成为研究的热点之一。法尼酰基转移酶抑制剂通过抑制法尼基蛋白转移酶阻止Ras蛋白的法尼基化、裂解和羧甲基化修饰,使其失去生物活性,从而抑制了Ras信号传导通路,已成为新的很有希望的药物作用靶点。     

环氧化酶-抑制剂对白血病HL-60细胞的影响

研究环氧化酶 2（COX 2）抑制剂塞来考昔（Celecoxib）对急性白血病HL 60细胞的增殖抑制、诱导凋亡作用及其机制。方法：以不同浓度的Celecoxib作用于体外培养的HL 60细胞，MMT法检测细胞生长抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率，应用Hoechst 33258 荧光染色法观察细胞凋亡时的形态学变化，并对细胞凋亡前后的Caspase3活性进行检测。 结果：COX 2抑制剂 Celecoxib可显著的抑制细胞的生长，并诱导细胞发生凋亡，在细胞凋亡过程中Caspase3活性显著升高，并呈现出明显的量-效与时-效关系。结论：COX 2抑制剂 Celecoxib对HL 60细胞具有显著的增殖抑制及诱导凋亡作用，升高Caspase3活性可能是其重要作用机制之一，这为COX 2抑制剂进一步用于临床治疗白血病提供了有利的实验依据。     

THA方案治疗急性非淋巴细胞白血病26例临床观察

梁山县人民医院应用吡喃阿霉素(THP)、高三尖杉酯碱(HHT)和阿糖胞苷(Ara C)组成THA方案,治疗成人急性非淋巴细胞白血病(acutenon lymphocyticleukemia,ANLL)26例,结果报道如下。1临床资料1.1一般资料1998年1月20日～2002年1月20日梁山县人民医院收治的26例ANLL患者,男15例,女11例。年龄13～65岁,中位年龄30岁。经临床、骨髓细胞学和组织化学染色确诊。按FAB分型:M12例,M215例,M44例,M55例。初治20例(其中M12例,M42例,M54例);复发3例(其中M22例,M41例)难治3例(其中M21例,M41例,M51例)。1.2治疗方法THP20mg,静脉滴入,d1～d3;H…     

应用抗胸腺细胞球蛋白治疗重型再生障碍性贫血并发神经精神病变一例

我们在应用抗胸腺细胞球蛋白 (ＡＴＧ)治疗 1例重型再生障碍性贫血患者时 ,患者突发脑病 ,现将发病及抢救经过摘录如下。患者 ,男 ,44岁。因乏力、面色苍黄 1月余 ,于 1999年 3月 2 3日住院。入院体温 37.5℃ ,血压 15 0 / 80ｍｍＨｇ(1ｍｍＨｇ=0 .133ｋＰａ) ,双下肢及胸背部有散在出血点。外周血ＷＢＣ2 .3× 10 9/Ｌ ,ＢＰＣ 2 0× 10 9/Ｌ ,Ｈｂ 75ｇ/Ｌ ,Ｒｅｔ 0 .0 0 0 1;骨髓增生重度减低 ,三系造血细胞明显减少 ,全片未见巨核细胞 ,骨髓小粒中非造血细胞和脂肪细胞增多。酸溶血试验 (- ) ,糖水试验 (- )。诊断为再生障碍性贫血。…     

CD44基因沉默对K562/A02细胞逆转耐药及生物学活性的研究

本研究旨在探讨CD44基因表达抑制对白血病多药耐药细胞株K562/A02耐药性及生物学活性的影响。根据CD44基因表达序列设计有效的RNA干扰片段,将其插入质粒表达载体中,获得针对CD44mRNA的特异性siRNA真核质粒(pGCsiRNA-CD44),转染K562/A02细胞。用实时荧光定量RT-PCR检测K562/A02细胞CD44、mdr-1和bcl-2mRNA的表达;用MTT法检测阿霉素对K562/A02细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术(FACS)检测细胞周期;Hochest33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学变化。结果表明:针对CD44基因的siRNA真核质粒可有效沉默K562/A02细胞的CD44基因:与对照组相比,转染了4条pGCsiRNA-CD44质粒的K562/A02细胞CD44表达均明显受抑,以转染了siCD44-1的细胞中抑制最强。转染pGCsiRNA-CD44质粒48小时后,K562/A02细胞CD44mRNA表达水平下降64.1%(p0.05),同时mdr-1与bcl-2mRNA的表达量较对照组分别下降了25.6%与50.8%;K562/A02细胞IC50为(17.97±1.61)μg/ml,无义序列质粒转染后阿霉素对K562/A02细胞的IC50为(16.95±1.72)μg/ml,pGCsiRNA-CD44转染后IC50明显降低为(8.77±1.63)μg/ml(p0.01)。转染48小时后,G0/G1期细胞比例提高了10.7%;细胞出现核固缩、核边集、凋亡小体等改变。结论:特异性CD44siRNA可显著抑制K562/A02细胞CD44基因的表达,抑制细胞增殖,诱导其凋亡,并有效逆转K562/A02细胞的多药耐药性。     

再生障碍性贫血患者CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞及Notch1表达水平的变化

目的 测定再生障碍性贫血(AA)患者治疗前后外周血CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞(Treg)的数量及叉头翼状螺旋转录因子(FOXP3)mRNA、Notch1 mRNA的表达水平,探讨Treg在AA发病中的作用及其机制.方法 流式细胞术检测29例初发AA患者、14例环孢素(CsA)治疗后恢复期及11例治疗后未恢复期患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low T细胞、CD4+ CD25+ T细胞的数量,并与正常对照比较;采用RT-PCR检测FOXP3 mRNA和Notch1 mRNA的表达水平,分析两者相关性.结果AA初发组及治疗后未恢复组患者外周血中活化CD4+ CD25+ T细胞占CD4+ T细胞比例分别为(4.3±0.7)%、(4.2±0.6)%,明显高于正常对照组[(2.4±0.8)%](P＜0.05).CsA治疗后恢复组患者比例下降为(2.6±0.7)%(P＜0.05),与对照组比较差异无统计学意义.AA初发组及未恢复组CD4+ CD25+ CD127low T细胞在CD4+ T细胞中的比例分别为(2.4±1.2)%、(2.5±1.1)%,较正常对照组[(7.1±2.7)%]及恢复组[(5.3±1.0)%]明显降低(P值均＜0.01);但后两组比较差异无统计学意义.AA初发组患者FOXP3 mRNA及Notch1 mRNA分别为(0.260±0.011)和(0.018±0.005),较正常对照[(1.307±0.011)和(0.308±0.028)]表达明显下调(P值均＜0.01),治疗后分别为(1.287±0.012)和(0.281±0.013),表达较初发组显著提高(P值均＜0.01),与对照组比较差异无统计学意义(P值均＞0.05).AA患者CD4+ CD25+ CD127low T细胞、FOXP3均与Notch1表达呈正相关性(P值均＜0.01).结论AA患者外周血CD4+ CD25+ CD127low Treg减少,其抑制作用减弱,导致自身反应性T细胞过度活化,抑制造血.其作用机制之一可能与靶细胞表面Notch1分子表达降低相关.     

基质金属蛋白酶抑制剂对小鼠急性移植物抗宿主病的预防作用

目的探讨基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)对小鼠异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的预防作用。方法用主要组织相容性复合物完全不相合的纯种近交系小鼠[供鼠为雌性 C57B/L6(H-2~b)鼠;受鼠为雄性 BALB/c(H-2~d)鼠]建立 allo-HSCT 后 aGVHD 动物模型。将小鼠随机分3组,给予 TIMP(A 组)、环孢菌素 A(CsA)(B 组)作为 GVHD 的预防方案。结果移植小鼠出现典型的 aGVHD 症状,未用 aGVHD 预防方案的移植小鼠(C 组)死亡高峰在移植后第5天～第7天,全部死亡。用 aGVHD 预防方案的 A 组和 B 组小鼠 aGVHD 症状明显减轻,平均生存时间较 C 组显著延长[分别延长(4.8±1.4) d 和(4.3±0.9)d,p<0.05]。不同 aGVHD 预防方案的移植小鼠之间,移植后外周血常规变化差异无统计学意义。应用预防方案后,移植小鼠 aGVHD 病理表现减轻。结论 TIMP 能有效预防小鼠 allo-HSCT 后 aGVHD,减轻其症状和病理损害程度,显著延长平均生存时间。TIMP 对造血干细胞植入和造血恢复无显著影响。     

肿瘤患者外周血干细胞动员过程中CD+34细胞的动态变化及意义

为观察肿瘤患者 CD+ 34 细胞数量在动员过程中的动态变化 ,确定采集干 /祖细胞的最佳时机 ,采用环磷酰胺 (CTX)联合粒细胞集落刺激因子 (G- CSF)对 2 1例肿瘤患者进行造血干 /祖细胞动员。动员过程中 ,每天进行血细胞计数 ,于前期、极期、恢复早期、恢复期计数外周血 CD+ 34 细胞、白细胞 (WBC)、单核细胞 (MNC)、血小板(Plt)。结果显示 ,不同患者出现极期、恢复早期、恢复期的时间差异较大。与前期相比 ,极期 CD+ 34 明显降低(P<0 .0 5 ) ,恢复期则显著增加 (P<0 .0 1)。WBC、MNC、Plt变化均与 CD+ 34 细胞变化呈显著正相关 (r分别为 0 .99、0 .82 7、0 .886 ,P均 <0 .0 1)。提示在 WBC>5 .0× 10 9/ L时采集外周血造血干细胞 (PBSC)较合适 ,MNC>1.5×10 9/ L时采集 PBSC较理想 ,监测 Plt计数变化 ,亦可为确定采集干细胞时间提供有意义的信息