Syntaxin 4蛋白在NK细胞中的表达及与SNAP-23蛋白的相互作用

目的　研究NK细胞中与囊泡分泌有关的膜蛋白syntaxin 4的表达和与其它蛋白的相互作用 ,为进一步研究NK细胞免疫效应的分泌调节分子机制提供新思路。方法　RT PCR和免疫印迹方法检测人类NK细胞syntaxin 4的表达 ,免疫荧光显微镜观察静息状态和经靶细胞激活后syntaxin4蛋白在NK92细胞中表达和分布的变化 ,免疫共沉淀检测syntaxin 4蛋白和SNAP 2 3蛋白的相互作用。结果　人类NK细胞中在mRNA水平和蛋白质水平均有syntaxin 4组成性表达 ,蛋白产物主要分布在细胞膜上。异种靶细胞刺激后 ,syntaxin 4蛋白有明显的细胞内定位变化和极化现象。syntaxin 4蛋白和SNAP 2 3蛋白有较强的相互作用。结论　syntaxin 4蛋白与NK细胞对靶细胞的识别过程有关 ,并与胞内膜交换相关分子SNAP 2 3蛋白相互作用 ,可作为研究干预移植排斥反应中杀伤性胞吐的新目标分子。     

TM-TNF-α介导的反向信号下调sTNF-α激活后U937细胞因子mRNA的表达

目的：观测TM-TNF-α介导的反向信号对sTNF-α激活后U937细胞因子mRNA的影响，构建TM-TNF-α胞浆段缺失突变体，并进一步验证。方法：sTNF-α激活U937细胞后撤除，加入可溶性TNFR（sTNFRⅠ）激活TM-TNF-α介导的反向信号，用RT—PCR方法检测反向信号对活化后U937细胞因子IL-1β、IL-8 mRNA的影响；采用分子克隆技术构建TM-TNF-α胞浆段缺失突变重组体，采用电穿孔法转染U937，并用Western blot检测蛋白表达。结果：sTNF-α激活U937细胞后撤除，高表达的细胞因子IL-1β、IL-8 mRNA随着时间的延长而逐渐降低；sTNFRⅠ激活的TM-TNF-α介导的反向信号可加速细胞因子mRNA的降解，且使mRNA降解至50％的时间分别由约75、60分钟缩短至约45、35分钟。成功构建TM-TNF—α胞浆段缺失突变重组体pcDNA3．0-△csTM-TNF—α并瞬时转染U937细胞，Western blot结果显示U937细胞膜表面除表达26000的野生型TM-TNF-α蛋白外，还可表达约20000的突变体蛋白。这种缺失胞浆段的突变体蛋白可竞争性抑制反向信号对活化后U937细胞因子mRNA的下调作用。结论：TM-TNF-α介导的反向信号可下调sTNF-α激活后U937细胞因子mRNA的表达；且TM-TNF-α胞浆段为其介导的反向信号所必需。     

跨膜型TNF-α细胞毒作用与其功能域的关系

目的：探讨跨膜型TNF—α(TM-TNFα)的细胞毒作用及其功能域的关系。方法：采用重组PCR对TM-TNFα基因进行定点突变，在微粒体膜的存在下体外转录、翻译突变体，并观察这些突变体的胞毒作用。结果：通过重组PCR分别获得TM-TNFα第-71、31、35、87、95、143与147位氨基酸置换的突变体，这7种突变体对L929细胞系的细胞毒作用，与野生型TM-TNFα相比：第-71、143位氨基酸单个置换使TM-TNFα胞毒作用下降4倍以上，35、95、147位单个置换使TM-TNFα胞毒作用下降1．5—2．5；而第31、87与133位氨基酸突变则对TM-TNFα杀伤作用无影响。结论：除-71位氨基酸外，以上6个位点的氨基酸均参与分泌型TNF—α(S-TNFα)的胞毒功能，提示TM-TNFα和S-TNFα发挥细胞毒功能的功能域可能不完全相同。     

解构日本战后经济民主化改革“三大支柱”

解散财阀、农地改革、劳动改革,被称为日本"战后经济民主化改革的三大支柱",它以战前的相关法律、政策和社会变动为基础;冷战开始后美国对日政策的转变所产生的影响,使美国对日经济民主化改革的政策并未得到自始至终的贯彻,其目标并未实现.因此,认为"战后初期日本的政治经济民主化改革.是一次从思想意识到政治、经济诸制度方面较为彻底的变革"的观点值得商榷.     

苏拉明对激素非依赖性前列腺癌细胞体外生长的影响

我们观察苏拉明(suramin)对激素非依赖性前列腺癌(HRPc)细胞Pc-3m生长的影响并初步探讨其作用机制。     

黄芪刺五加合剂对小鼠免疫功能的调节作用

选用自然杀伤(NK)活性测定、肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素2(IL-2)诱生水平检测3项免疫指标研究黄芪(A)和刺五加(AS)合剂(简称A-AS合剂)对小鼠免疫功能的影响。并比较A-AS合剂及A或AS单剂的作用。结果显示:环磷酰胺(Cy)组所有免疫指标均显著低于正常对照组(P<0.001);Cy A-AS组与Cy A或AS组所有免疫指标均高于Cy组,但Cy A-AS组又明显高于Cy A或AS组。结果表明A-AS的作用明显强于A或AS,A-AS合剂对小鼠免疫功能有上调作用,而且A与AS具有一定的协同作用。     

跨膜型TGFα与分泌型TGFα增殖作用异同的比较

目的：比较跨膜型TGFα和分泌型TGFα促增殖作用的异同。方法：通过MTT法检测二型TGFα小鼠成纤维细胞NIH3T3促增殖作用,采用免疫组化法检测PCNA的表达,原位杂交检测HaCaT细胞IL－6mRNA的水平。结果：二型TGFα均可促进NIH3T3细胞的增殖和PCNA的表达以及提高人角质细胞HaCaT IL-6mRNA的水平,但S－TGFα比TM－TGFα的作用强（P＜0．01）,结论：二型TGFα促细胞增殖,产生IL－6的效应基本相似,仅呈量的差异性,提示TM－TGFα可能在体内起维持和更新机体组织细胞代谢的作用。而S－TGFα则可能在组织损伤,炎症反应中发挥更强的效应。     

无症状性心肌梗死并发左室附壁血栓形成一例

患者男,40岁,大学文化,教师.因"活动后胸闷1个月"于2011年7月31日入住我院心脏中心.既往发现血压升高8年,收缩压最高170 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),未予以治疗.有吸烟史10年×1包/d,已戒除2个月,否认饮酒史.余个人史,婚育史,家族史无特殊.入院查体:体温36.7℃,脉搏92次/min,呼吸频率20次/min,血压190/122mm Hg.端坐位,口唇无紫绀,颈静脉充盈,双肺呼吸音粗,对称,未闻及干湿性哕音.     

毫火针排针浅刺放血法治疗顽固性带状疱疹后遗神经痛验案2则

带状疱疹后遗神经痛(postherpetic neuralgia,PHN)是指带状疱疹皮损愈合后遗留的神经病理性疼痛.其疼痛持久而强烈,严重影响患者的生活质量.目前西医学针对PHN的治疗药物主要包括抗惊厥药、抗抑郁药、阿片类药物和局部疗法(利多卡因贴剂、辣椒素贴剂),当药物治疗无效和效果欠佳时,神经阻滞与神经调节或可作...     

针刺治疗帕金森病运动症状临床研究进展

帕金森病是第二大神经退行性障碍疾病,随着中国人口老龄化趋势,其患病率逐年增多.目前西医治疗方式并不能满足患者的需要,而中国传统的针刺治疗方法,正在成为帕金森病辅助治疗的重要方式之一.笔者通过中国知网、万方、维普及PubMed等数据库,以"帕金森、颤症、针刺、针灸、电针"等为主题词进行检索,搜集近30年相关文献3279篇...