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目的:研究川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对脑缺血大鼠神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响。方法:采用全骨髓贴壁法体外培养BMSCs,传代至第3代用于尾静脉移植。采用线栓法诱导大鼠右侧大脑中动脉阻塞模型,除假手术组外,大鼠随机分为模型组、BMSCs(1×10~9/L)组、川芎嗪(40 mg/kg)组和联合(川芎嗪+BMSCs)组,每组12只。缺血后第1、7和14天采用改良的神经损伤严重程度评分(modified neurological severity scoring,m NSS)进行神经功能评价。缺血后第14天,甲苯胺蓝染色检测脑梗死体积,HE染色观察脑组织病理学变化,采用原位末端标记(TUNEL)法观察神经细胞凋亡数,采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测Bax和Bcl-2的mRNA及蛋白表达。结果:与BMSCs组和川芎嗪组比较,联合组m NSS评分显著减少(P0.01),梗死体积显著减少(P0.01),缺血引起的脑缺血周边区病理性损伤明显减轻,TUNEL阳性细胞数显著减少(P0.01),Bcl-2的mRNA及蛋白表达显著增加,Bax的mRNA及蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:川芎嗪联合BMSCs移植能显著促进脑缺血后大鼠的功能恢复,减少梗死体积,减轻脑组织缺血性损伤,抑制神经细胞凋亡,机制可能与调控Bcl-2和Bax的表达有关。 相似文献
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目的体外研究川芎嗪(Ligustrazine)对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)迁移及基质金属蛋白酶-2、9(matrix metalloproteinase-2,9,MMP-2、9)表达的影响。方法采用全骨髓贴壁法培养BMSCs,采用流式细胞仪检测BMSCs阳性抗原(CD29和CD90)及阴性抗原(CD34和CD45),鉴定BMSCs纯度;将BMSCs分成对照组,川芎嗪25、50、100μmol/L组和GM6001组(100μmol/L川芎嗪加MMPs抑制剂GM6001);川芎嗪处理24 h,采用Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验检测细胞迁移速度;Western blot检测BMSCs的MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果第3代BMSCs生长良好、形态均一,BMSCs阳性抗原CD29、CD90表达率分别为96.9%、97.3%,阴性抗原CD34、CD45表达率分别为0.2%、3.0%。与对照组比较,川芎嗪各剂量组迁移的细胞数量、细胞侵袭相对距离增加,BMSCs的MMP-2和MMP-9蛋白表达升高(P0.05,P0.01)。与川芎嗪100μmol/L组比较,川芎嗪25、50μmol/L组和GM6001组迁移的细胞数量、细胞侵袭相对距离减少(P0.01);川芎嗪25、50μmol/L组MMP-2蛋白表达降低(P0.01)。结论川芎嗪能在体外促进BMSCs的迁移,作用机制与其上调MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。 相似文献
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专业认证作为保障和提高专业教育质量的重要手段也逐渐被各国政府和社会公众认可。文章从开展专业认证的背景和意义出发,介绍了我校全面开展校内专业认证的目的、原则、方式及提升专业教育质量的具体措施和初步成效。 相似文献
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目的 比较灯盏花素鼻腔给药、口服给药与静脉给药对大鼠实验性脑缺血的防治作用。方法 采用 Longa 线栓法制备 SD 大鼠右侧局部脑缺血模型,脑缺血 1 h,再灌注 24 h,随机分为假手术组,模型组,灯盏花素鼻腔给药高、低剂量组,灯盏花素口服给药与静脉给药组,每组 6 只,分别给予相应药物,观察各组对脑缺血大鼠神经功能、脑梗死体积的影响。结果 脑缺血 1 h,再灌注 24 h 时模型组大鼠神经功能缺损严重,而经鼻腔多次给药后神经功能得到有效的保护;模型组脑梗死体积平均为 21.82%,鼻腔给药组的脑梗死体积为 9.37% 和 12.14%,口服组给药组、静脉给药组为 16.76% 与 14.01%,4个给药组与模型组比较均有显著性差异;鼻腔给药组明显优于口服给药组、静脉给药组,均有统计学意义;鼻腔给药高剂量优于低剂量,但无统计学意义。结论 灯盏花素鼻腔给药对大鼠实验性脑缺血的防治作用优于口服给药与静脉给药。 相似文献
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补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血损伤的长期保护作用 总被引:7,自引:0,他引:7
目的:观察补阳还五汤对大鼠脑缺血损伤后感觉运动功能和脑损伤的长期影响。
方法:实验于2005-06/08在浙江中医学院实验动物中心完成。①取33只健康雄性SD大鼠,随机分为3组:补阳还五汤组(n=12)、缺血组(n=11)和假手术组(n=10)。前2组采用线栓法诱导大鼠大脑中动脉阻塞模型:假手术组只分离血管,不插栓线。补阳还五汤组:从缺血前7天开始按13.3g/kg剂量灌服补阳还五汤水煎剂(补阳还五汤处方来源于《医林改错》,成分:黄芪120g,当归6g,川芎4.5g,赤芍4.5g,地龙3g,红花3g,桃仁3g,药材购自浙江中医学院附属门诊部并经鉴定,煎2次,40min/次,合并后浓缩为含生药2g/mL),持续到缺血后14d,1次/d;其余各组同时灌等量生理盐水,干预时间同补阳还五汤组。②通过肢体放置实验[包括7个步骤。评分标准:正常,2分;延迟(2s)和/或不完全,1分;不反应,0分]在缺血后1-7,10,14,21和28d评价前后肢对触觉和本体感觉的反应。通过横木行走实验(用噪音刺激大鼠跨过横木。评分标准:大鼠不能呆在横木上,0分;大鼠能呆在横木上但不动,1分;大鼠试图跨过横木但摔下,2分;大鼠跨过横木.但损伤的后肢滑落次数超过50%,3分;超过1次但不到50%,4分;仪滑落1次,5分;顺利通过,6分)评价运动的协调和整合缺损。通过祜胶揭除实验(评分标准:1分为≤10s;2分为10-19s;3分为20-29s:4分为30-39s;5分为40-49s;6分为50~59s;7分为≥60s)评价躯体感觉功能。2块同面积的医用胶布分别贴在两前肢腕部腹侧面作为触觉刺激,记录大鼠揭除胶布的潜伏期.③缺血后第29天处死大鼠,取脑,冠状冰冻切片,采用甲苯胺蓝染色测定梗死体积。④肢体放置和横木行走实验结果差异比较采用非参数Mann-Whitney U检验,黏胶揭除实验结果和梗死体积差异比较采用单因素方差分析。
结果:大鼠33只均进入结果分析。①肢体放置实验评分:缺血后1—10,14,21,28d缺血组明显低于假手术组(u=0-9,P〈0.01)。补阳还五汤组大鼠在缺血后1~7,10,14d明显高于缺血组(u=4.5-35,P〈0.05-0.01)。②横木行走实验评分:缺血后1~7d缺血组明显低于假手术组(u=0-10,P〈0.05~0.01)。缺血后1~3d补阳还五汤组明显高于缺血组(u=26.5~31,P〈0.05)。③黏胶揭除实验评分:缺血后1,7,14,21,28d缺血组明显高于假手术组(t=2.56~21.91,P〈0.05-0.01)。缺血后1,7,14,21d补阳还五汤组明显低于缺血组(t=2.36-3.88,P〈0.05-0.01)。④脑梗死体积:缺血后29d,补阳还五汤组明显小于缺血组[(9.5&;#177;25),(123&;#177;22)mm^3,t=2.75,P〈0.05]。
结论:补阳还五汤能显著改善脑缺血大鼠长期感觉运动功能,减轻脑损伤。 相似文献
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目的: 研究不同黄芪剂量的补阳还五汤对大鼠脑缺血后室下区神经干细胞增殖的影响。 方法: 采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞模型,缺血24 h后分别ig黄芪剂量为120, 60, 30, 15 g的补阳还五汤(剂量分别为13.07, 7.61, 4.88, 3.55 g·kg-1),并ip 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU,50 mg·kg-1),1次/d,连续14 d。在缺血后第1, 7, 14天,采用改良的神经症状严重程度评分和角实验评价感觉运动功能;缺血后第14天,采用BrdU/Nestin免疫荧光双标检测室下区神经干细胞增殖情况。 结果: 与模型组比较,在缺血后第7, 14天,黄芪剂量为120, 60 g组的补阳还五汤显著改善神经症状评分和减少大鼠右转次数(P<0.01或P<0.05);缺血后第14天,黄芪剂量为120, 60 g组的补阳还五汤显著促进室下区神经干细胞增殖(P<0.01)。 结论: 大剂量黄芪组方的补阳还五汤能显著促进脑缺血后室下区神经干细胞增殖和神经功能恢复,以黄芪剂量为120 g的效果最佳。 相似文献
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目的:探讨桃仁水提取液对家兔离体小肠收缩运动的影响,以及初步探讨其机制。方法:将家兔空肠标本置于麦氏槽中,采用张力换能器连接RM6240生物信息采集处理系统,观察不同浓度的桃仁水提取液对家兔小肠收缩运动收缩的影响;并且,在加入乙酰胆碱、阿托品条件下,观察桃仁水提取液对小肠收缩运动的影响。结果:桃仁提取液对家兔离体小肠收缩运动有促进作用,分别加入0.075g/ml、0.125g/ml、0.175g/ml终浓度的桃仁水提取液后,小肠收缩张力0.077±0.003g分别增大到0.082±0.002g(P0.05)、0.112±0.002g(P0.01)、0.124±0.002g(P0.01)。先在0.01g/L的乙酰胆碱溶液作用后,乙酰胆碱可增强家兔小肠收缩张力的振幅0.293±0.037g,加入0.125g/ml桃仁水提取液,家兔小肠收缩运动振幅得到显著降低0.077±0.002g(n=4,P0.05)。在加入0.5mg/ml的阿托品后,阿托品可显著抑制家兔小肠收缩张力的振幅0.053±0.005g,加入0.125g/ml桃仁水提取液,家兔小肠收缩运动得到显著增强0.092±0.007g(n=4,P0.01)。结论:桃仁提取液对家兔小肠收缩运动具有促进作用,桃仁能够拮抗乙酰胆碱对家兔小肠收缩运动的兴奋作用,同时,也能够拮抗阿托品对家兔小肠收缩运动抑制作用,但是,具体作用机制尚待进一步明确。 相似文献
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目的:体外研究不同浓度黄芪总皂苷(TSA)对神经干细胞(NSCs)增殖的影响。方法:体外分离培养大鼠胚胎NSCs,nestin免疫荧光标记鉴定NSCs;不同浓度TSA(0.1、0.2、0.5、1、2、5和10μg/ml)处理NSCs 24、48和72h,采用MTT法、Brd U/Nestin免疫荧光双标检测细胞增殖情况。结果:体外分离培养的神经干细胞nestin染色为阳性;MTT实验结果显示,与空白对照组比较,TSA呈剂量和时间依赖性促进NSCs增殖,其中1、2μg/ml TSA处理48h效果最显著(P0.01);Brd U/Nestin免疫荧光双标结果显示,与空白对照组比较,TSA 1、2μg/ml处理48h后,Brd U阳性细胞显著增多(P0.01)。结论:TSA促进体外培养的NSCs增殖,且1、2μg/ml处理48h效果最好。 相似文献