基于模式生物斑马鱼研究姜黄抗血管新生的作用及机制

目的 利用模式生物斑马鱼研究姜黄Curcuma longa抗血管新生作用,并采用网络药理学和分子对接技术探究姜黄抗血管新生的作用机制.方法 采用模式生物斑马鱼模型,考察姜黄挥发油、姜黄素以及姜黄水提液对斑马鱼节间血管生长的抑制作用,检测各给药组斑马鱼节间血管生成数,计算血管生成抑制率.利用网络药理学和分子对接技术预测姜...     

UPLC法同时测定黑豆甘草汤中8个指标成分

目的建立UPLC法同时测定黑豆甘草汤中8个指标成分。方法采用0.1 mol·L~(-1)盐酸与丙酮溶液提取样品,运用UPLC技术,使用ACE Excel 2 C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱;体积流量为0.3 mL·min~(-1);检测波长为260 nm和530 nm,柱温35℃,进样量为5μL。结果黑豆甘草汤中矢车菊-3-O-葡萄糖苷、大豆苷、黄豆黄苷、甘草苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素、甘草酸单铵盐分别在11.88~380.0μg·mL~(-1)(R~2=0.999 2)、16.88~540.0μg·mL~(-1)(R~2=0.999 5)、12.50~400.0μg·mL~(-1)(R~2=0.999 3)、14.38~460.0μg·mL~(-1)(R~2=0.999 2)、17.50~560.0μg·mL~(-1)(R~2=0.999 6)、15.63~500.0μg·mL~(-1)(R~2=0.999 5)、6.00~192.0μg·mL~(-1)(R~2=0.999 2)、15.63~500.0μg·mL~(-1)(R~2=0.999 5)范围内线性关系良好;平均回收率均在95.12%~105.83%。结论所建立的UPLC法可同时测定黑豆甘草汤中8个指标成分,结果稳定可靠,可作为黑豆甘草汤的质量控制的方法。     

蝉蜕止咳祛痰平喘有效部位筛选

目的:通过研究蝉蜕不同提取部位对小鼠、豚鼠的止咳祛痰平喘作用,对蝉蜕有效部位进行筛选。方法:蝉蜕使用70%乙醇回流提取,所得浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得各部分浸膏,受试动物随机分为对照组、阳性药组及不同提取部位组,采用小鼠氨水引咳法筛选止咳有效部位,小鼠酚红气管段法筛选祛痰有效部位,豚鼠整体药物引喘法筛选出平喘有效部位。结果:与对照组比较,蝉蜕70%乙醇提取物水部位有明显止咳作用(P0.05),正丁醇部位有祛痰作用(P0.01),乙酸乙酯、水部位具有明显平喘作用(P0.01)。结论:蝉蜕的止咳有效部位是水部位,祛痰部位为正丁醇部位,平喘部位是乙酸乙酯及水部位。     

刺五加乙酸乙酯部位对ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠肠道菌群的影响

目的 观察刺五加乙酸乙酯部位对高脂饮食诱导的载脂蛋白E基因敲除（ApoE^-/-）小鼠的影响,探讨其通过调控肠道菌群从而治疗动脉粥样硬化的作用机制。方法 32只8周龄雄性^-/-小鼠随机分为模型组,瑞舒伐他汀组（10 mg·kg^-1）和刺五加乙酸乙酯部位高、低剂量组（75,25 mg·kg^-1）,每组8只。8只C57BL/6小鼠作为空白组。连续给药8周后,取血测定其血脂水平;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）试剂盒检测小鼠血清中相关指标含量;苏木素-伊红（HE）染色法观察小鼠主动脉病理形态;收集盲肠内容物采用16S rRNA扩增子测序检测肠道菌群。结果 与空白组比较,模型组小鼠斑块面积显著增加并伴有炎性浸润,升高甘油三酯（TG）,总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量,增加炎症因子和血管内皮因子诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）含量,降低高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量;与模型组比较,瑞舒伐他汀组和刺五加乙酸乙酯部位高、低剂量组能改善小鼠主动脉斑块沉积,降低TG,TC,LDL-C,炎症因子和iNOS含量,升高HDL-C含量。与空白组比较,模型组厚壁菌门和变形菌门相对丰度升高,拟杆菌门相对丰度降低。Alpha和Beta多样性分析显示,各组样本能够显著分离,模型组肠道菌群物种总数和丰度较低;与模型组相比,刺五加乙酸乙酯部位可提高有益菌的相对丰度,降低致病菌的相对丰度。结论 刺五加乙酸乙酯部位主要为黄酮类成分,能够通过调控肠道菌群来治疗动脉粥样硬化,改善高脂饮食喂养ApoE^-/-小鼠主动脉病理变化,作用机制可能与其能够降低炎症因子水平、提高抗氧化能力、修复肠道菌群结构紊乱现象有关。     

三黄泻心汤煎煮过程中13种指标成分动态变化与分布规律研究

目的 建立经典名方三黄泻心汤（Sanhuang Xiexin Decoction,SXD）中13种指标成分（表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚）的含量同时测定方法,探索SXD煎煮过程中成分动态变化和分布规律,揭示SXD复合分散体系的制剂特征。方法 按照SXD传统煎煮方法制备煎液,建立样品中13种指标成分的含量同时测定方法,检测各指标成分在汤剂、离心上清液、离心沉积物中的含量;进一步地,分别制备浸泡结束、刚沸腾以及煎煮不同时间后的样品进行测定,绘制SXD煎煮过程中13种指标成分动态变化和分布规律图,分析煎煮过程中各成分在汤剂、离心上清液和离心沉积物中的含量变化情况。结果 SXD煎液中,含量最高的指标成分为黄芩苷（15.496 mg/g）,其次为小檗碱（3.048 mg/g）,含量最低的指标成分为大黄素甲醚（0.046 mg/g）;离心沉积物中黄连碱、小檗碱含量分别为离心上清液的4.13、3.44倍,离心上清液中黄芩苷、汉黄芩苷、芦荟大黄素含量分别为离心沉积物的2.04、2.76、1.33倍;煎煮过程中,自浸...     

五味消毒饮口服液HPLC指纹图谱的建立及6种指标性成分定量测定

目的建立五味消毒饮口服液(WXOL)的HPLC法特征指纹图谱,并同时测定绿原酸、木犀草苷、木犀草素、蒙花苷、咖啡酸、秦皮乙素6种主要指标成分的量。方法采用Agilent 1260高效液相色谱仪进行色谱分析,色谱柱为Agilent TC-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.5%醋酸水溶液-甲醇,梯度洗脱:0~10 min,10%~32%甲醇;10~20 min,32%甲醇;20~25 min,32%~46%甲醇;25~31 min,46%~48%甲醇;31~41 min,48%~80%甲醇;体积流量为1 m L/min;检测波长为320 nm;柱温为30℃;采用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012年版)对10批WXOL化学成分指纹图谱进行相似度评价,并采用多成分同时测定法对6种指标性成分进行定量测定。结果 10批WXOL HPLC特征指纹图谱相似度均大于0.98,共17个共有峰,各峰分离度较好。通过对照品比对确定了其中绿原酸(5号峰)、秦皮乙素(7号峰)、咖啡酸(8号峰)、木犀草苷(12号峰)、蒙花苷(16号峰)、木犀草素(17号峰)6个成分,10批WXOL中绿原酸量为54.038 3~105.551 1μg/m L,秦皮乙素量为4.122 1~31.359 9μg/m L,咖啡酸量为2.413 0~4.420 7μg/m L,木犀草苷量为4.042 8~11.312 8μg/m L,蒙花苷量为3.866 3~46.271 9μg/m L,木犀草素量为0.990 8~2.126 8μg/m L。不同批次间各指标性成分量变化较小,样品质量较稳定。结论所建立的HPLC特征指纹图谱结合多指标成分定量测定的方法,稳定性、重复性较好,有利于保证WXOL质量均一,对其质量控制具有参考价值。     

经典名方化肝煎物质基准特征图谱及多指标成分含量测定研究

目的建立经典名方化肝煎物质基准的UPLC特征图谱以及HPLC多指标含量测定方法,构建其质量控制体系。方法遵古籍并结合前期考察工艺,制备不同产地的18个批次化肝煎物质基准,采用UPLC法建立物质基准特征图谱,使用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件》(2012版)计算相似度,并结合正交偏最小二乘判别分析,挖掘影响不同产地不同批次化肝煎物质基准质量的主要成分;将其中源自处方君药、臣药和佐药的3种指标性成分橙皮苷、芍药苷、牡丹皮作为化肝煎物质基准含测指标,建立其HPLC含量测定方法,并对18个批次样品进行含量测定。结果特征图谱相似度均≥0.989。标定了33个共有峰,对8个共有峰进行了化学成分指认,分别为没食子酸(4号峰)、栀子苷(10号峰)、芍药苷(13号峰)、橙皮苷(22号峰)、香蜂草苷(27号峰)、丹皮酚(29号峰)、甜橙黄酮(30号峰)、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮(32号峰),找到9个影响批次间稳定性的指标性成分(峰31、20、11、13、22、33、21、29、1),最后遴选出芍药苷、橙皮苷、丹皮酚作为含测指标,其在化肝煎物质基准中的质量分数为芍药苷1.28%～1.95%、橙皮苷0.91%～1.02%、丹皮酚0.48%～0.57%。结论通过UPLC特征图谱及HPLC指标性成分含量测定初步建立了经典名方化肝煎物质基准的质量控制方法,此方法快速简单可行,重复性、稳定性良好,可为后续制剂的开发和质量控制提供理论依据。     

《中国药典》2015年版含香附制剂中香附质量控制的探讨

目的:对《中国药典》2015年版一部含香附制剂的修订提出建议.方法:查阅中国知网、国家食品药品监督管理局相关数据并分析《中国药典》2015年版一部含香附制剂质量控制情况.结果:《中国药典》2015年版一部收载的107种含香附制剂,其质量控制项目尚不完整、质量控制品种有待增加.结论:考察、更正、确认模糊表达,补充完善质量控制项目,对《中国药典》2015年版一部的修订具有重要意义.     

美洲大蠊温敏凝胶的制备及其促糖尿病大鼠创面修复作用考察

目的:制备美洲大蠊温敏凝胶并考察其促糖尿病大鼠创面修复作用。方法:以N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)与丙烯酸(AAc)为单体,在水相中通过自由基聚合法制得具有温度响应的共聚物P(NIPAM-co-AAc),然后将其接枝透明质酸(HA)以合成P(NIPAM-co-AAc)-g-HA温敏材料,采用核磁共振氢谱(1H-NMR)和紫外分光光度法(UV)对该材料的化学组成、低临界相转变温度(LCST)进行表征;采用透析法制备美洲大蠊温敏凝胶,利用扫描电子显微镜、旋转流变仪和热重分析仪表征其断面结构、流变学性质和热稳定性;采用差示扫描量热法,X-射线衍射法和傅里叶红外光谱法共同鉴定P(NIPAM-coAAc)-g-HA温敏材料对美洲大蠊提取物的包合作用,并考察美洲大蠊温敏凝胶促糖尿病大鼠创面修复的作用,采用ImagePro Plus 6. 0软件计算创面愈合率,运用苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察各组大鼠创面组织病理学变化。结果:成功合成了P(NIPAM-co-AAc)-g-HA温敏材料,其LCST处于29～31℃,具有密集、均匀的多孔结构,且能将美洲大蠊提取物均匀包合。药效学结果表明,美洲大蠊温敏凝胶组促创面愈合效果最佳,其炎细胞浸润程度明显降低,胶原蛋白、成纤维细胞排列整齐、致密,新生血管密度较模型组显著增加。结论:美洲大蠊温敏凝胶可有效促进糖尿病大鼠创面愈合,可克服美洲大蠊市面液体制剂用于皮肤创面治疗的不足,可为美洲大蠊提取物促糖尿病患者创面愈合制剂的开发提供参考。