调节性T细胞在眼表疾病中作用的研究进展

作为眼球的外部屏障,由角膜、结膜、眼睑及其上面的睑板腺、泪腺组成的眼表组织暴露于环境当中。在维持角膜光滑和湿润的同时,眼表组织还具有丰富的免疫细胞及相关因子;它们通过先天性免疫反应和适应性免疫反应对抗病原体,以及通过多种调节机制防止针对自身或无害抗原的不必要或者过度的炎症反应。免疫调节发生障碍是许多眼表疾病的基础。调节性T细胞（regulatory T cell,Treg细胞）作为眼表微环境的重要组成部分,通过多种机制积极地参与抑制针对自身、微生物和环境抗原的异常或过度的免疫反应,在诱导免疫耐受、调节机体免疫平衡方面起着重要作用。Treg细胞的功能受损和数量减少,会破坏眼表免疫稳态,进而导致或促进多种眼表疾病的发生。近年来,越来越多的研究着眼于Treg细胞在眼表疾病发生发展中的作用及相关的分子机制。部分临床前研究显示Treg细胞相关免疫疗法在眼表疾病中具有巨大的潜力。因此,该文就Treg细胞的生物学功能及其在干眼症、眼表过敏性疾病、眼表感染性疾病、角膜移植排斥和眼表组织修复方面发挥的作用进行简要综述,探讨Treg细胞疗法在眼表疾病领域的广阔应用前景。     

体外培养角膜内皮移植的研究进展

随着角膜内皮细胞体外培养扩增技术不断完善,以及近年后(深)板层角膜内皮移植技术的兴起,以各种载体进行培养角膜内皮细胞进行后板层移植,以代替穿透性角膜移植的研究具有广阔的应用前景。本文就角膜内皮细胞的培养、移植载体的选择和移植技术的发展加以综述,并对目前仍需解决的问题及其前景进行展望。     

组织工程化角膜组织的研究新进展

随着细胞培养技术及组织工程技术的发展 ,角膜组织的体外培养和重建有了突破性进展。从种子细胞来源的选择到各种载体的应用 ,重建的三维角膜模型及上皮层在结构及功能上都极近似于人体角膜 ,并应用于基础及临床角膜移植的研究     

组织工程技术眼表重建的研究概况

严重的眼表疾病的治疗一直是眼科临床上的难题,组织工程技术的兴起为眼表重建带来了希望。角膜缘干细胞作为角膜上皮组织更新和再生的源泉,在体外选择近似生理条件下培养可生长增殖,获取足量种子细胞;选择促进角膜上皮细胞生长并具有良好组织相容性的载体来种植种子细胞,从而体外构建成复合角膜上皮移植片重建眼表,目前在动物实验及临床应用上都获得了良好的效果,组织工程化角膜上皮为眼表重提供了较理想的方法,存在着许多优势,但目前属于初步研究阶段,仍面临着许多困难和挑战,有待进一步研究。     

黄芪饮片中4个异黄酮类成分的含量测定

摘 要 目的:建立高效液相色谱法测定黄芪饮片中4个异黄酮成分的含量方法。方法: 色谱柱为Agilent Zorbax SB-C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm) ,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 ml·min^-1,检测波长为260 nm, 柱温30℃,进样量10 μl。结果:毛蕊异黄酮-7-葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素分别在4.42～442 μg·ml^-1、2.06～206 μg·ml^-1、3.36～336 μg·ml^-1、4.60～460 μg·ml^-1浓度范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.4%(RSD=5.34%)、94.8%(RSD=2.39%)、98.9%(RSD=3.69%)、102.3%(RSD=3.01%)(n=9)。结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于黄芪饮片的质量控制。     

培养猫角膜内皮细胞的新方法——联合酶消化法

目的 寻找一种可以快速获得大量猫原代角膜内皮细胞的方法.方法 揭取猫角膜后弹力层,反复剪碎,用2 g·L-1复合胶原酶消化40 min,再用2.5 g·L-1胰蛋白酶-EDTA消化2 min,离心、细胞计数后以50×106 L-1的浓度接种.待细胞长满皿底后传代,接种浓度同原代培养.记录细胞的形态以及原代细胞的数目、原代细胞铺满皿底的时间、细胞传代时间和传代次数,并与组织块贴壁法和揭膜消化法相比较.结果 联合酶消化法获得的原代细胞可以形成典型的铺路石样结构,无基质细胞污染,每片角膜可以收获(100～200)×103个细胞,只需5 d就可以首次传代,传代后4 d即可达到80%融合,连续传代8次仍可以维持小多边形的形态.结论 胶原酶和胰蛋白酶联合消化法可以快速获得大量的猫角膜内皮细胞.     

以猪角膜脱细胞基质为载体培养猫骨髓内皮祖细胞构建角膜后板层的实验研究

目的 探讨以猪角膜脱细胞基质(cornea acellular matrix,CACM)为载体培养猫骨髓内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)体外构建角膜后板层的可行性.方法 分离培养猫骨髓EPC,并用PKH26标记,观察标记效率.用10 g·L-1 Triton X-100脱细胞,联合逐步切薄角膜、超净台中自然晾干法制备角膜脱细胞基质,行HE染色,Hoechst染核,电镜观察猪CACM的胶原排列和细胞脱除情况.将标记的EPC接种到猪CACM上,观察细胞的生长情况.结果 培养的猫骨髓EPC形态上呈多边形,几乎全部EPC可以标记上PKH26,细胞膜呈现红色荧光,至少可维持1个月.制备的猪CACM可保持整齐的胶原排列,细胞完全脱除.EPC在CACM上呈单层生长,贴附较好.构建的组织工程角膜后板层与正常角膜相似.结论 以猪CACM为载体培养猫骨髓EPC可体外构建组织工程角膜后板层,为进一步体内移植打下基础.     

眼表微环境与泪膜稳态对视觉质量影响的新认识

2020年发布的中国干眼专家共识第一次将眼表微环境的概念新增到了干眼的定义中。强调了泪膜不稳定和眼表微环境失衡在干眼发病机制中的重要地位,并将视功能障碍作为干眼病情发展的重要结局之一。为了加强对新共识的认识,推动相关的基础与临床研究的开展及转化,为广大干眼患者提供更为细致的诊疗建议,专家组于2021年3年26日在江西吉安召开讨论会,对眼表微环境和泪膜稳态这两方面的研究现状及存在的问题进行分析,主要围绕干眼的这两个核心机制的新认识、与视觉质量的关系、临床的评估和治疗手段的建议和未来发展新方向等提出建议和推荐意见。     

微环境对角膜内皮作用机制的研究进展

角膜内皮作为角膜中代谢最为活跃的一层,在维持角膜透明性中发挥重要作用.角膜内皮微环境则是揭示角膜内皮疾病机制和体外培养角膜内皮进而解决角膜内皮移植供体匮乏的关键,其包括了普遍存在的,对细胞有直接作用的生长因子、营养因子、炎性因子及干性因子等各种细胞因子.同时因角膜内皮位置特异性所形成的高氧化环境、眼压等物理应力及相邻组织,如晶状体、角膜后弹力层、房水等与角膜内皮的相互作用也是微环境中的重要因素     

阿奇霉素联合中药拔罐治疗儿童支原体肺炎疗效观察

目的观察阿奇霉素联合中药拔罐治疗儿童支原体肺炎的临床疗效。方法 100例支原体肺炎患儿随机分为观察组和对照组,对照组予阿奇霉素抗感染治疗及对症支持治疗,观察组在对照组治疗的基础上予蒿芩麻杏石甘汤口服与拔罐治疗,观察治疗后2组患儿临床症状及体征改善情况。结果观察组痊显率94%,明显高于对照组78%,差异有统计学意义(P0.05);观察组咳嗽好转时间、痰壅好转时间及啰音吸收时间短于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论阿奇霉素联合中药口服和拔罐治疗支原体肺炎可提高痊显率,是治疗小儿支原体肺炎的有效方法。