对免疫与病原生物学实验技能的思考

论述中医药专业本科生掌握免疫与病原生物学实验技能的意义,学生对免疫与病原生物学实验技能掌握情况,以及影响中医药专业本科生免疫与病原生物学实验技能提高的因素和应采取的提高措施.     

肠道白念珠菌感染对脾虚小鼠小肠组织中IFN-γ和IL-10 mRNA及蛋白表达水平的实验研究

目的:观察脾虚小鼠感染白念珠菌后小肠组织中IFN-γ和IL-10 mRNA和蛋白表达水平的变化,探讨脾虚小鼠在白念珠菌感染过程中的部分免疫机制,为临床诊治白念珠菌感染及脾虚证提供一定的参考依据。方法:采用饮食失节加劳倦过度的复合因素制备小鼠脾虚证模型,经肠道感染白念珠菌14 d后,检测粪便中的活菌数,应用RT-PCR方法检测肠组织局部γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素10(IL-10)mRNA的表达水平,应用Westornblot方法检测肠组织中IFN-γ和IL-10的蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,其他三组小鼠粪便中活菌数、肠组织中IFN-γ和IL-10 mRNA及其蛋白的表达水平均显著增高(P0.01);与正常白念感染组比较,脾虚模型组小鼠小肠组织中IFN-γ、IL-10 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P0.01),而脾虚白念感染组显著升高(P0.05或0.01);与脾虚模型组比较,脾虚白念感染组小鼠粪便中活菌数、小肠组织中IFN-γ和IL-10 mRNA及蛋白表达水平也显著升高(P0.01或P0.05)。结论:小鼠脾虚后可发生肠道菌群紊乱,比正常小鼠对白念珠菌的易感性增强,在肠道局部抗白念珠菌的作用主要以细胞免疫为主,Th1类细胞因子发挥主要作用。     

婴幼儿奶粉中病原菌多重PCR检测研究

目的建立婴幼儿奶粉中常见病原菌的多重PCR检测方法。方法根据阪崎肠杆菌外膜蛋白A（ompA）基因和金黄色葡萄球菌耐热核酸酶（nuc）基因序列，设计两对特异性引物。对反应条件进行优化，建立针对婴幼儿奶粉中常见病原菌的多重PCR检测方法，并对奶粉进行模拟检测。结果两对引物能特异扩出282bp和482bp的目的条带；在优化条件下，可同时检测模拟样品中两菌DNA，灵敏度达到10^3CFU／ml。结论与传统方法比较，研究建立的多重PCR方法敏感、特异，为快速检测奶粉中病原菌提供了有效手段。     

白念珠菌消化道感染对脾虚小鼠肠组织中IFN-γ mRNA及IL-10 mRNA表达的影响

目的:探讨小鼠在脾虚状态下对消化道感染白念珠菌的易感性及其免疫学机制,为防治白念珠菌感染和脾虚证提供一定的实验依据。方法:采用饮食失节加劳倦过度的复合因素制备小鼠脾虚证模型,经消化道感染白念珠菌,检测粪便中的活白念珠菌数,应用RT-PCR方法检测肠组织局部V-干扰素(IFN-γ)mRNA和白细胞介素-10(IL-10)mRNA的表达水平。结果:与正常感染组比较,自第6天起脾虚感染组小鼠粪便活菌数持续显著增高(P<0.05,P<0.01)。与脾虚模型组比较,正常感染组与脾虚感染组小鼠在感染后期肠组织表达IFN-γ mRNA和IL-10 mRNA的水平均显著升高(P<0.01);与正常感染组比较,脾虚感染组小鼠在感染后期IFN-γ mRNA的表达水平显著升高(P<0.01),但IL-10 mRNA表达显著减少(P<0.05)。结论:消化道的白念珠菌感染是否致病与小鼠的免疫力密切相关,尤其是在免疫功能低下时危害更大,同时又进一步加重脾虚状态或感染的病情。     

医学免疫学教学化难为简的措施

医学免疫学是公认的基础医学中难度很大的一门课程,给教师和学生均带来极大考验.教师在教学过程中可从几个方面着手,包括重引言,抓主线;去抽象,变形象;学为主,教为辅;多媒体,合理用等,使免疫学教与学的难度相对降低,从而提高教学质量.     

三地人参对小鼠溶血素含量影响的研究

目的:研究辽宁、吉林和朝鲜三地人参煎剂对正常和免疫低下小鼠血清溶血素含量的影响。方法:将小鼠分为空白对照组,正常三地人参煎剂灌胃组,免疫低下模型组,免疫低下三地人参煎剂灌胃组,共8组,每组10只。其中模型制作为氢化可的松70mg/kg(体重),皮下注射,连续1周。人参灌胃为5g/(kg.d),1次/d,连续2周。实验结束前4天小鼠腹腔注射配制好的SRBC 0.2mL。然后ELISA法测定溶血素含量。结果:正常三地人参灌胃组溶血素含量和空白对照组相比无统计学意义,且三者之间相比亦无统计学意义;免疫低下模型组、三地人参免疫低下灌胃组与空白对照组相比均有统计学差异;三地人参免疫低下灌胃组和免疫低下模型组相比有统计学差异;三地人参免疫低下灌胃组之间相比无统计学差异。结论:三地人参对正常小鼠血清溶血素水平没有影响;氢化可的松所致的免疫低下可使小鼠血清溶血素含量降低,经辽宁、吉林和朝鲜三地人参煎剂灌胃治疗后不能使其溶血素含量提高,且使之进一步下降;三地人参煎剂对免疫低下小鼠血清溶血素含量的影响无差异。     

灰树花多糖对脾虚小鼠T细胞亚群和Th1/Th2亚群的影响

目的观察灰树花多糖对脾虚小鼠T细胞亚群和Th1/Th2亚群的影响,探讨其免疫调节机制。方法健康雄性清洁级昆明小鼠48只随机分为空白组、脾虚组、阳性组(香菇多糖)及灰树花多糖低、中、高剂量组,每组8只,各给药组给予相应药物,滤菌后腹腔注射10 d,第11日处死动物。流式细胞术检测各组小鼠外周血CD3+、CD4+及CD8+T细胞百分率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的含量。结果高剂量灰树花多糖能明显升高脾虚小鼠外周血CD4+T淋巴细胞百分率(P＜0.05);中、高剂量灰树花多糖可以明显升高脾虚小鼠的 CD4+/CD8+T 细胞比值(P＜0.01)。中、高剂量灰树花多糖可以明显升高脾虚小鼠 CD3+T 淋巴细胞百分率(P＜0.01)。灰树花多糖中、高剂量组可以明显升高脾虚小鼠血清 IFN-γ含量(P＜0.01),灰树花多糖高剂量组可以明显降低脾虚小鼠血清IL-4含量(P＜0.01)。结论灰树花多糖可改善脾虚时所致CD4+/CD8+T细胞比值降低,使Th2细胞向Th1细胞转化,从而达到治疗脾虚证的目的。     

辽参对脾虚与免疫抑制小鼠IL-4和脾细胞活性影响的比较研究

目的:比较辽宁人参对脾虚和免疫抑制小鼠IL-4和脾细胞活性的影响。方法:免疫抑制模型方法为皮下注射氢化可的松,70mg/kg,连续7天。脾虚造模方法为每只小鼠每日灌胃100%番泻叶水煎剂0.5mL,连续10天。造模后,空白组和两种模型组正常饲养;辽宁人参治疗组以辽宁人参水煎剂0.2mL ig,5g/kg,1次/d,连续14天。ELISA法检测血清IL-4含量,CCK-8法检测脾细胞活性。结果:免疫抑制模型IL-4含量下降比脾虚模型下降要明显(P<0.05)。但是辽参提高两种模型小鼠血清IL-4含量的能力无差别(P>0.05)。脾虚和免疫抑制模型组小鼠脾细胞活性较空白组均明显下降(P<0.01),两种模型无差异(P>0.05),但是辽参提高脾虚模型小鼠脾细胞活性的能力要优于免疫抑制模型(P<0.01)。结论:辽宁人参可以有效改善两种免疫低下模型所导致的血清IL-4含量和脾细胞活性的降低。     

不同产地人参对免疫抑制小鼠血清TNF-α含量及脾细胞凋亡率的影响

目的:研究辽宁、吉林及朝鲜人参在免疫调节作用方面的药效差异。方法:检测三地人参对免疫抑制小鼠血清中TNF-α含量及脾细胞凋亡率的影响。结果:与正常空白对照组相比,免疫模型组的TNF-α含量明显下降(P<0.05);三地人参治疗组与正常空白对照组比较,TNF-α含量均无明显差异(P>0.05);三地人参治疗组之间相互比较,TNF-α含量均无明显差异(P>0.05)。与正常空白对照组相比,免疫模型组脾细胞凋亡率显著升高(P<0.005);三地人参治疗组与正常空白对照组比较,脾细胞凋亡率均无明显差异(P>0.05);三地人参治疗组与免疫模型组比较,免疫辽参治疗组脾细胞凋亡率明显低于免疫模型组(P<0.05);三地人参治疗组之间相互比较,脾细胞凋亡率均无明显差异(P>0.05)。结论:辽宁,吉林,朝鲜人参对免疫抑制小鼠均可促进TNF-α产生,抑制脾细胞凋亡,改善小鼠的免疫抑制状态,并且三地人参的免疫调节作用无明显差异。     

癌症患者失志综合征的研究新进展

失志综合征是一种长期应对压力或疾病导致的不能适应的心理状态，可影响患者的睡眠和食欲，加重已存在的痛苦和自杀倾向，但易被临床医护人员忽视，导致患者承受巨大的心理痛苦，不同程度影响疾病的治疗和预后。本文对失志综合征的概念及诊断标准、评估工具、特点、现状以及影响因素和干预措施进行综述，旨在提高癌症患者、照护者以及医护人员对失志综合征的认知，为临床研究和干预提供参考。