检测HIV-1/2型抗体的双抗原夹心方法的建立及其试剂盒的研制

为建立更敏感的检测人免疫缺陷病毒 (ＨＩＶ)抗体的方法 ,并研制检测试剂盒。根据ＨＩＶ 1/ 2型的基因序列及其所编码氨基酸结构 ,采用固相法合成了ＨＩＶ 1型的ｇｐ4 1.1、ｇｐ4 1.2、ｇｐ12 0、Ｐ2 4和ＨＩＶ 2型的ｇｐ36　 5条多肽 ,混合包被酶标板作为固相抗原 ,并用辣根过氧化物酶标记以上多肽抗原作为标记物 ,建立检测血清中ＨＩＶ 1/ 2抗体的双抗原夹心ＥＬＩＳＡ法。同时 ,应用该方法制备检测ＨＩＶ抗体的试剂盒 ,并检测 3批卫生部药品和生物制品检定所ＨＩＶ诊断试剂国家参比品。用检定所参比品检测 ,该方法特异性、灵敏度均为 10 …     

双抗原夹心法检测抗HIV-1/2总抗体方法的建立和评价

目的 进一步提高HIv感染诊断试剂的敏感性。方法 以人工合成的HIv—1 gp41．1(sP1)、gp41．2(sP2)、gp120(sP3)、P24(sP4)和HIV—2gp36(sP5)5条多肽，采用双抗原夹心酶链免疫吸附试验(ELISA)原理，以sP1、sP3、sP4和sP5混合包被酶标板作为因相抗原，辣根过氧化物酶标记sp1、sp2、sP4和sP5多肽为标记物，建立了检测抗HIV—1／2总抗体的双抗原夹心ELISA法。结果 检测卫生部药品生物制品检定所第2代40份质控参比血清，其特异性和灵敏度均为100％，高于间接ELISA法(特异性为90％，灵敏度为65％)。检测210份其他病种患者血清均为阴性，与雅培HIVAB试剂比较检测如份健康献血员血清和88份HIv感染者血清，符合率为100％。结论 本方法特异性强、敏感性高，操作简便，适用于献血员的筛选和临床HIv感染的检测。     

抗人红细胞抗体和HIV抗原融合蛋白的构建及活性鉴定

目的构建及表达抗红细胞(RBC)单链抗体(ScFv)和HIV抗原的融合蛋白,并做活性测试。方法将鼠抗人红细胞单链抗体可变区重链、轻链基因与HIV抗原基因相连,重组于高效表达载体中,并在大肠埃希菌中表达。结果经ELISA检测和红细胞凝集检测,证明表达的融合蛋白具有HIV抗原和抗人红细胞的双重活性,可使含有HIV抗体的红细胞悬液凝集。结论融合蛋白构建成功,可用于HIV的快速检测。     

HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测试剂盒的研制与评价

目的研制HIV-1／2抗体和P24抗原联合检测酶免疫试剂盒并评价其实用性。方法联合使用基因工程HIVI／2型抗原和抗HIVP24单克隆抗体包被酶联反应板，以辣根过氧化物酶标记的HIVI／2型抗原和生物素化的兔抗HIVP24抗体作为标记物，研制了联合检测HIVI／2抗体和P24抗原的ELISA诊断试剂，并对其特异性、敏感性、稳定性等进行评价和临床考评。结果检测P24抗原质控品的灵敏度可达0．2ng／ml；与雅培公司试剂比较检测78份AIDS患者血清和85份正常人血清、对照检测中国药品生物制品检定所研制的HIV参比血清，特异度和灵敏度均为100％。临床考核检测12051份各种血清，灵敏度为100％（543／543），特异度为99．48％（11448／11508）。试剂在37℃放置6d后，试验结果无明显差异。结论本试剂盒具备特异度强、敏感度高、稳定性好、操作简便等优点，可以一步检出HIV特异性抗体和HIVP24抗原，缩短了HIV感染的检测窗口期，适用于HIV感染的实验室诊断和流行病学调查。     

甲型肝炎患者血清特异性IgM、IgA及总抗体动态变化与临床意义

对６０例甲型肝炎患者血清抗甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）ＩｇＭ、ＩｇＡ及总抗体从发病起进行了１年动态观测，并以病程、病情不同分组观察分析。发现病程、病情不同患者抗－ＨＡＶ－ＩｇＡ滴度变化不同，病程长、病情重者，该抗体下降缓慢，持续阳性时间稍长。     

抗HIV-1核心抗原p24单克隆抗体的制备及特性的初步鉴定

目的 :建立分泌抗HIV 1p2 4单克隆抗体 (mAb)的杂交瘤细胞株 ,并对其特性进行初步鉴定。方法 :以纯化的基因工程制备的p2 4抗原免疫BALB/c小鼠 ,取免疫小鼠的脾细胞与Sp2 /0骨髓瘤细胞融合 ,经HAT、HT选择培养及有限稀释法进行克隆化后 ,用间接ELISA法及Dotblot对其进行筛选和特性鉴定。结果 :筛选到 2株可分泌抗HIV 1p2 4mAb的杂交瘤细胞 ,其腹水效价为 1×10 -5,亲和力为 1.7× 10 4～ 1.8×10 4mol/L ,mAb的Ig亚类均为IgG1。两株mAb与HBcAg、HCVRNA阳性血清及HIVgp4 1等均无交叉反应 ,只与HIV 1p2 4抗原阳性血清产生特异反应。结论 :成功地建立了 2株可分泌抗HIV 1p2 4mAb的杂交瘤细胞 ,为进一步研制HIV 1p2 4抗原的ELISA检测试剂盒奠定了基础     

滋阴化瘀通窍汤联合延续性护理治疗高血压脑出血疗效观察

目的:观察滋阴化瘀通窍汤联合延续性护理治疗高血压脑出血患者的临床疗效。方法:将延安大学附属医院2018年2月～2019年7月收治的132例高血压脑出血患者作为本次研究对象,按照随机数字表原则将其分为对照组和治疗组,均66例。对照组常规手术后配合西药干预,治疗组在此基础上口服滋阴化瘀通窍汤联合延续性护理综合调理,对比两组患者治疗4周后临床总有效率、神经功能缺损程度评分、生活质量综合评定答卷(GQOLI)及出血肿块容量改善情况。结果:治疗4周后,治疗组总有效率为(62例)93.94%,对照组(48例)72.73%(P0.05),治疗组总有效率显著高于对照组。治疗前,两组患者的神经功能缺损程度评分、生活质量综合评定答卷(GQOLI)及出血肿块容量比较(P0.05),无统计学意义。连续治疗4周,治疗组神经功能缺损程度评分和出血肿块明显较对照组下降,且GQOLI评分显著高于对照组,治疗组整体改善情况明显优于对照组(P0.05),差异具统计学意义。结论:滋阴化瘀通窍汤联合延续性护理对高血压脑出血患者治疗临床效果显著,不仅有效促进术后患者神经功能恢复,安全系数高,而且提高其独立生活能力,降低高血压发生和再次脑出血几率,值得临床应用和基础医学广泛研究。     

肝细胞癌人源异种移植模型应用研究进展

人源异种移植(patient-derived xenograft,PDX)模型是将取自临床患者的新鲜肿瘤标本直接异种移植到免疫缺陷小鼠体内而建立的动物模型,可以较好的保持原发肿瘤的组织形态、异质性以及基因异常等特征,并保留与患者相似的遗传特性.本文就人肝细胞癌PDX模型构建的实验动物、移植组织类型和方式的选择、最新应用...     

冠心病合并肺部感染病原菌分布及临床指标分析

目的 探讨心内科冠心病合并肺部感染病原菌分布、危险因素和PCT、hs-CRP、WBC和TLR9在感染早期的诊断价值。方法 回顾性分析本院收治的58例冠心病合并肺部感染患者临床资料。收集患者痰液并进行培养、鉴定。采用肉汤稀释法测定肺炎克雷伯菌和肺炎链球菌对临床常用抗生素耐受性。采集患者外周静脉血并测定PCT、hs-CRP、WBC和TLR9。分析性别、吸烟、喝酒、糖尿病史、慢性阻塞肺病史、长期卧床和住院时间对冠心病合并肺部感染的影响。结果 本研究分离出58株病原菌,其中肺炎克雷伯菌16株、肺炎链球菌11株、表皮葡萄球菌7株、金黄色葡萄球菌7株、鲍曼不动杆菌6株、铜绿假单胞菌4株、白色假丝酵母菌4株、大肠埃希菌2株和嗜麦芽窄食单胞菌1株。肺炎克雷伯菌对头孢呋辛、头孢他啶、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、左氧氟沙星、氯霉素、亚胺培南、复方新诺明、庆大霉素和阿米卡星耐药率依次为68.75%、56.25%、56.25%、25.00%、31.25%、50.00%、18.75%、25.00%、43.75%和25.00%。肺炎链球菌对头孢呋辛、头孢曲松、红霉素、复方新诺明、左氧氟沙星和阿莫西林耐药率依次为...     

SARS病毒抗体第一代参考品的研制及初步应用

目的 建立严重急性呼吸综合征(SARS)病毒抗体参考品，用于对SARS病毒抗体诊断试剂的实验室评价。方法 收集临床确诊为SARS病人血清和非SARS人群血清，用不同的SARS病毒抗体诊断试剂进行检测筛查，选择不同样品组成参考品。并用该参考品对不同试剂进行初步评价。结果 SARS病毒ISM抗体的参考品由38份组成，其中包括11份阳性参考品、20份阴性参考品、灵敏度样品6份，精密性样品1份；SARS病毒总抗体(包括IgG)由46份组成，其中包括18份阳性参考品、20份阴性参考品、灵敏度样品7份，精密性样品1份。结论 初步应用结果显示该参考品确实能够反应不同试剂的质量差异。