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应用pET28(含T_7lac启动子和His6-tag)质粒,将人γTNFβ融合基因与之组建成pETγLT表达质粒,并转化于E.coliBL21(DE3).本文对pETγLT/ BL21(DE3)工程菌的His6-γTNFβ重组产物进行了诱导表达,分离纯化的研究.结果表明,该工程菌用LB培养基在37℃扩增至OD_(590)为0.5左右,加IPTG(终浓度为1mmol/L)诱导5小时,此时His6-γTNFβ的表达量可占菌体总蛋白的45%.重组产物绝大多数以IBs形式存在于菌体中.工程菌经反复超声破碎、高速离心,得IBs粗制品后,再经含2mol/L脲的缓冲液洗涤可得到相对纯净的IBs.然后用7mol/L脲变性溶解IBs,离心取上清,进行Ni~(2 )-Sepharose 6B柱一步法亲和层析,可得到电泳纯度为95%的His6-γTNFβ,经稀释复性和用凝血酶切去His6-tag的产物,其细胞毒活性为(1.2~2.0)×10~7U/mgp,抗病毒活性为(6.0~6.6)×10~6U/map. 相似文献
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霍奇金淋巴瘤研究进展 总被引:6,自引:0,他引:6
18 32年 Hogkin首次描述了淋巴瘤 ( Hagkin lymphoma,HL)。 1 70多年来 ,有关该病的起因及 Reed- Sternberg( HRS)细胞的形态学特点、免疫学表形及基因形态学特征 ,以及发病机制及其转化规律等 ,一直为病理学者和临床专家所关注。近年来 ,随着生物学技术的进步 ,上述相关问题如 HRS细胞的克隆性及其来源、HL的发病机制以及 HRS细胞在复杂的微环境下生存和演变状态的研究取得了一些新的进展 ,本文着重介绍这些新知识。余英豪教授是我国病理学方面资深专家 ,所撰写的文章将可能深化相关同行对 HL的认识能力 ,有助于提高 HL的诊治水平。本文立意明确 ,行文通达 ,简洁明了 ,特刊登于此 ,以飨读者 相似文献
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危重新生儿评分在新生儿双程转运中的应用分析 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 探索新生儿安全转运的方法及新生儿危重病例评分法在新生儿转运中的应用价值。方法 对近两年由重庆医科大学儿童医院双程转运回院的 14 7例新生儿 ,按新生儿危重病例评分方法进行评分 ,分为≥ 90分、80~ 89分、70~ 79分和 <70分四组 ,分析危重儿评分与预后的关系。结果 (1)全部病例均安全转运回NICU。(2 )非危重儿 (≥ 90分 )占 19 0 % (2 8例 ) ,危重儿 (70~ 89分 )占 72 1% (10 6例 ) ,极危重儿 (<70分 )占 8 8% (13例 )。 (3)围生儿占 95 9% (14 1例 )。 (4)转运前低体温 (T <35℃ )占 2 5 9% (38/14 7) ,入院时血pH值 <7 35占82 4 % (112 /136 ) ,血糖异常者占 4 0 1% (5 5 /137)。结论 合理保暖、维持体内环境稳定、保持呼吸道通畅、吸氧等措施在安全转运中显得极其重要 ,是成功转运的关键之一。新生儿危重病例评分法能反映转运新生儿病情危重程度 ,可以作为新生儿转运的指征。 相似文献
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细菌耐药性已成为人们关注的热点。在控制细菌耐药性及耐药菌所致感染的过程中,合理应用抗菌药物和继续寻找治疗耐药菌感染的新的有效药物仍是重要任务。近年来新药研究的重点集中于抗耐药革兰阳性菌药物以及治疗药物较少的感染如抗真菌和抗病毒药。1临床应用进展[1~4]1.1抗革 相似文献
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南五味子为木兰科植物华中五味子Schisand rasphenanthera Rehd.et Wils.的干燥成熟果实。性味酸、甘、温,归肺、心、肾经,具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功效。用于久嗽虚喘、津伤口渴、短气脉虚、心悸失眠等症[1]。南五味子主要分布于华中、西南等地,其化学成分主要有挥发油、木脂素、三萜、多糖、有机酸等[2~5]。木脂素类成分是南五味子的主要活性部位[6,7],其中五味子甲素、乙素、酯甲、醇甲具有降酶保肝活性,五味子乙素、醇甲具有安神作用,本实验采用HPLC法检测了南五味子果肉、种皮、种仁中五味子甲素、乙素、酯甲及醇甲的量,… 相似文献
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