开口箭皂甙抑制小鼠S-180肉瘤细胞增殖及实体瘤生长的实验研究

目的 研究开口箭皂甙(STCB)体内外抗S-180肉瘤活性的强度及其作用机制.方法 MTT法检测S-180细胞的增殖程度;制备昆明种小鼠S-180移植实体瘤模型,观察STCB的抑瘤作用;光镜和电镜下观察药物作用后S-180细胞形态及超微结构变化;以不同浓度STCB处理S-180细胞,经碘化丙啶染色后应用流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡情况.结果 STCB体外明显抑制S-180细胞增殖,IC50为34.64μg/ml.经灌胃给药,STCB对荷S-180实体瘤小鼠表现出良好的抑瘤作用,低剂量(0.5 g/kg体质量)时,抑瘤率已超过30%,高剂量(2 g/kg体质量)时,抑制率达到54.86%.电镜观察和FCM检测证明肿瘤细胞凋亡率随STCB浓度增加而增加.STCB的浓度为10和30μg/ml时,S期细胞百分率上升,G2/M期细胞百分率下降;当STCB的浓度达到60μg/ml,G0/G1期细胞百分率下降,G2/M期细胞百分率上升:提示低浓度STCB阻止S-180细胞从S期进入G2期;高浓度时,STCB还干扰S-180细胞的有丝分裂.结论 STCB在体内外对S-180肉瘤细胞均有抑制作用,其作用机制与诱导肿瘤细胞的凋亡和干扰细胞周期有关.     

细菌内毒素体外刺激小鼠腹腔巨噬细胞分泌一氧化氮实验模型的条件优化

目的优化细菌内毒素刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生NO实验模型的条件。方法采用Hank’s液灌洗小鼠腹腔,收集腹腔留
居巨噬细胞,利用铜绿假单胞菌脂多糖（LPS）作为内毒素刺激巨噬细胞产生NO,以Griess法检测培养上清液中NO的浓度,考
察细胞浓度、LPS浓度、LPS刺激时长、培养液体积等因素对巨噬细胞产生NO的影响,优化实验条件,并用已知药物验证模型的
可靠性。结果本实验条件下,细胞浓度对NO的产生具有关键性影响,最适浓度为6×10
6个细胞/ml,96孔板中每孔100μl;LPS
浓度<1μg/ml时,NO的产生随LPS浓度的增加而增加（P<0.001）,LPS浓度>1μg/ml时,NO的增加的幅度明显下降,当LPS
浓度为10μg/ml时,NO产生达到峰值;NO的产生随LPS刺激时间的延长,其含量相应增加,24与48h之间的增加幅度大于
48h与72h之间的增加幅度（P<0.05）;培养上清中NO的含量与培养液的体积有一定关系,100μl时的NO含量最高。阿司
匹林(1mmol/L)、地塞米松(10μmol/L)、环孢霉素A(10μmol/L)均能明显抑制LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生NO（P<0.001）。
结论巨噬细胞浓度、LPS浓度、LPS刺激时长是建立内毒素刺激小鼠腹腔巨噬细胞分泌一氧化氮实验模型的主要影响因素。推
荐方案为：巨噬细胞浓度5×10
6个细胞/ml,100μl/孔;LPS浓度10μg/ml;LPS刺激时长24h或48h;培养液体积100~200μl。
     

四氢嘧啶类衍生物ZL-5015抗内毒素作用的实验研究

目的:探讨1,3-二环戊基-1,2,3,6-四氢嘧啶-4,5-二甲酸二乙酯(ZL-5015)对内毒素攻击小鼠的保护作用及机制。方法:腹腔注射脂多糖(70 mg/kg)制备小鼠内毒素中毒死亡模型和内毒素血症模型。脂多糖(10mg/L)刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生炎症相关细胞因子作为体外炎症模型。ELISA法检测细胞白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。Real-time PCR检测细胞因子mRNA的表达水平。结果:ZL-5015(100和200 mg/kg)预防性灌胃给药能小幅提高内毒素中毒小鼠的存活率和存活时间,在中毒早期能降低内毒素血症小鼠血清中IL-1β和TNF-α的水平,提高IL-10的水平。体外实验表明,ZL-5015(10、20和40μmol/L)能抑制内毒素刺激的腹腔巨噬细胞IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA的表达,促进IL-10蛋白及mRNA的表达。结论:四氢嘧啶类化合物ZL-5015能提高内毒素中毒小鼠的存活率和存活时间,但作用较弱,其作用机制可能与抑制促炎细胞因子IL-1β和TNF-α、促进抑炎细胞因子IL-10的表达有关。     

3,4′,5-三羟基芪-3-β-单-D-葡萄糖苷对血管内皮前列环素的影响与血小板聚集的关系(英文)

目的:探讨3,4′,5-三羟基芪-3-β-单-D-葡萄糖苷(polydatin,Pol)抑制血小板聚集与其使血管内皮释放前列环素作用间的关系.方法:Pol与培养的人脐静脉内皮细胞(VEC,酶消化法)孵育为内皮组,无VEC为对照组,移细胞培养液至兔血小板(洗涤法),测凝血酶诱聚后血小板聚集率(PAR,比浊法)及上清液6-酮-前列环素F_(1alpha)(6-keto-PGF_(1α)),血栓烷B_2(TXB_2)含量(放免法).结果:无VEC组Pol不减少PAR;VEC组0.41 mmol·L~(-1)10 minPAR减少(-10±10),6-keto-PGF_(1α)增加(108±30 ng·L~(-1))(各与蒸馏水组之2±12,54±20ng·L~(-1)比).结论:Pol抑制血小板聚集与其增加VEC前列环素释放有关.     

灵芝醇提物对小鼠免疫功能影响的初步研究

目的:初步探讨灵芝乙醇提取物(灵芝醇提物)的免疫调节作用。方法:MTT法检测免疫细胞的(增殖)代谢活力,二硝基氟苯诱导迟发型超敏反应(DTH)检测小鼠细胞免疫功能,兔红细胞免疫法(血清溶血素水平)检测小鼠体液免疫功能,碳粒廓清法检测单核/巨噬细胞的吞噬功能。结果:灵芝醇提物(100、50μg/mL)可显著抑制刀豆素A(Con A)和细菌脂多糖(LPS)诱导的小鼠脾细胞(增殖)代谢活力。灵芝醇提物(200、100 mg/kg)能显著降低二硝基氟苯诱导小鼠DTH反应的耳廓肿胀度,降低小鼠体内的碳粒廓清能力,提高兔红细胞免疫所致小鼠血清溶血素的水平。结论:灵芝醇提物体外抑制小鼠T细胞和B细胞的增殖反应;体内抑制小鼠的细胞免疫反应和单核/巨噬细胞的吞噬功能,增强小鼠的体液免疫反应。     

血管内皮细胞的免疫荧光显示法

近年来,由于获取、培养及鉴定内皮细胞(EC)方法的建立,为研究血管内皮细胞的功能及其与疾病间的相互关系提供了实验手段,现已广泛应用于有关实验中,而免疫荧光法显示体外培养的血管内皮细胞尚少有详细的报道。本文从方法学角度探讨免疫荧光法显示血管内皮细胞的可行性,并对应用本法     

亚硒酸钠对雄性大鼠精子生成数的影响

亚硒酸钠对雄性大鼠精子生成数的影响ＳＤ雄性大鼠３６只，体重３２０．７±２８．０ｇ。按体重随机分成亚硒酸钠（０．２ｍｇ／ｋｇ／日），甲基睾丸素（２．８ｍｇ／ｋｇ／日）和空白对照组。将药每日上午放入饮水瓶中，让大鼠自由饮用，饮完后再加入少量冷开术，连续用...     

木蹄层孔菌多糖对免疫抑制小鼠免疫功能及细胞因子产生的影响

目的 探讨木蹄层孔菌多糖(Fomes fomentarius polysaceharides,FFP,木蹄多糖)对免疫抑制小鼠单核/巨噬细胞吞噬功能、体液免疫功能及T淋巴细胞分泌白介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)的影响.方法 环磷酰胺(15 mg/kg)皮下注射,连续7d,建立免疫抑制小鼠模型,碳粒廓清法检测...