深圳市外来劳务工乙型肝炎血清学检测分析

目的了解2007~2009年深圳市外来劳务工乙型肝炎感染模式和状况,探讨乙肝5项和HBV DNA检出率之间的关系,为深圳市劳务工群体乙型肝炎的预防和控制提供科学依据。方法利用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时荧光定量PCR法对2007~2009年1 226份深圳市外来劳务工的血清标本进行乙肝5项检测和HBV-DNA测定。结果深圳市外来劳务工乙肝5项异常者的HBV DNA总阳性率为48.94%。共发现7种HBV感染模式,小三阳患者占HBV感染总例数的49.67%,大小三阳HBV DNA的检出率分别为94.11%和21.67%。20~30岁的青年劳务工乙肝感染人数在A-G感染模式中均超过该模式感染者总数的50%以上。结论深圳市外来劳务工乙肝5项异常者近半数携带HBV DNA,必须加强对大三阳和模式D组(HBsAg阳性和抗-HBc阳性)感染者以及20~30岁的青年劳务工的HBV DNA的监测,从而对外来劳务工HBV感染者的传染性进行正确的评估,为乙肝的防护和治疗提供依据。     

水体中肠道病毒监测情况

目的 了解外环境水体中EV71、CoxA16等人肠道病毒的污染情况.方法 6-8月,选择某地一个污水处理厂和2条河流作为采样对象,每月采集未经处理的污水和上、下游河水各1份,经过滤、浓缩后进行人肠道病毒核酸检测.结果 全部水样均检出EV71病毒但未检出CoxA16,其他肠道病毒的检出率亦高达46.67%.与河水相比,污水中其他肠道病毒的检出率较高.结论 外环境水体中肠道病毒的污染严重,有必要开展进一步的研究了解肠道病毒经水传播的风险.     

深圳市2009年工厂劳务工乙肝表面抗体阳性率调查

[目的]了解2009年深圳市工厂劳务工乙型肝炎病毒(HBV,hepatitis Bvirus)表面抗体HBsAb阳性率分布情况,为深圳市劳务工群体乙型肝炎病毒的预防和控制提供科学依据。[方法]采取多阶段随机抽样方法对全市7个区(包括罗湖区、福田区、南山区、宝安区、龙岗区、光明新区和坪山新区)的44家工厂1003名16～60岁工厂劳务工进行乙肝血清流行病学研究。用ELISA方法检测乙肝表面抗体,并以问卷调查的方式调查乙肝疫苗的接种情况。[结果]深圳市工厂外来劳务工乙肝表面抗体总阳性率为68%。其中16～19岁、20～29岁、30～39岁、40～59岁的人群的HBsAb阳性率分别为47.17%、70.56%、62.33%、76.47%;乙肝表面抗体阳性率在有乙肝疫苗接种史的人群中高达73.43%,高于未接种疫苗人群的60.34%。在教育水平较低、以及20岁以下的年青劳工群体中,乙肝表面抗体阳性率明显下降。[结论]深圳地区外来劳务工乙肝表面抗体阳性率水平高于2006年普查的全国平均水平,表明该人群免疫屏障已经形成,应加强对低教育水平人群以及20岁以下的外来年青劳工群体的乙肝疫苗的接种和监测工作。     

ARRDC4通过NF-κB和MAPK信号通路促进EV71诱导的IL-6产生

目的 研究含阻遏蛋白结构域蛋白4(arrestin domain-containing protein 4,ARRDC4)对肠道病毒71(EV71)诱导IL-6产生的调节作用和相关机制.方法 利用特异性靶向ARRDC4的小干扰RNA(siRNA)在THP-1诱导分化的巨噬细胞(t-M?)中干扰ARRDC4的表达,无关siRNA序列干扰作为阴性对照组,采用实时定量PCR、ELISA和Western印迹等技术观察ARRDC4对IL-6产生、EV71复制以及相关天然免疫信号通路接头分子活化的影响.结果 EV71感染时,ARRDC4表达显著上调.以siRNA靶向干扰ARRDC4的表达,能抑制EV71感染诱导的IL-6 mRNA的表达和IL-6的分泌产生,促进EV71的复制.靶向干扰ARRDC4能明显抑制EV71诱导的p-65、IκBα、ERK、JNK和p38的活化.结论 ARRDC4通过增强NF-κB和MAPK信号通路的活化,促进EV71诱导的IL-6产生,从而抑制EV71的复制,正向调控EV71触发的天然免疫反应.     

GⅡ.4型诺如病毒不同变异株与HBGAs结合模式分析

目的 了解GⅡ.4型诺如病毒不同变异株与受体人组织血型抗原(human histo-blood group antigens,HBGAs)的结合模式及HBGAs在GⅡ.4型诺如病毒进化过程中的角色.方法 利用RT-PCR方法扩增5株不同GⅡ.4型诺如病毒变异株的衣壳蛋白P区序列,在原核系统中表达并纯化P蛋白.通过一组HBGAs表型明确的唾液样本与P蛋白结合,进行唾液HBGAs结合模式分析.同时,将P蛋白与人工合成的HBGAs寡糖进行寡糖结合分析.结果 唾液HBGAs结合模式分析表明,Sakai变异株几乎不结合,其他GⅡ.4变异株的HBGAs结合模式相似,与分泌型唾液(A、B、AB和O型分泌型)结合,与O型非分泌型唾液不结合.95/96US变异株和2006b变异株结合能力较高,其次是Camberwell变异株,Hunter变异株较弱.寡糖结合分析与唾液结合分析结果一致,Sakai变异株不结合,其他毒株与均与分泌型寡糖(Ley和H1)结合,与非分泌型寡糖(Lea和Lex)不结合.95/96US变异株和2006b变异株与寡糖的结合能力较强,其次是Camberwell变异株.结论 绝大多数GⅡ.4型诺如病毒变异株与HBGAs结合模式相同,但结合能力不同,结合能力强的变异株流行范围较广.     

深圳市婴幼儿腹泻中肠道腺病毒感染的流行特点调查

目的：了解深圳市婴幼儿腹泻患儿肠道腺病毒的感染情况。方法:应用聚合酶链反应技术（PCR）对195份婴幼儿腹泻标本进行腺病毒DNA检测,并使用Rsa I内切酶对扩增产物进行限制性内切酶图谱分析,以鉴别肠道腺病毒型别。结果：婴幼儿腹泻标本腺病毒DNA检测的阳性率为13.33％（26／195）。肠道腺病毒40型的感染率为2.56％（5／195）,肠道腺病毒41型的感染率为8.21％（16／195）,其他型别腺病毒的感染率为2.56％（5／195）,发热是腺病毒感染的特征性的临床表现。结论：肠道腺病毒40型和41型是引起深圳市婴幼儿腹泻的重要病原,其中又以肠道腺病毒41型感染为主。     

液相芯片检测轮状病毒和诺如病毒方法的建立

目的建立一种多重PCR结合液相芯片技术同时检测A型轮状病毒、GI型诺如病毒和GII型诺如病毒的方法。方法建立多重PCR扩增方法,将PCR产物与偶联核酸探针的微球混合物进行杂交,利用Luminex 200液相芯片检测仪来检测杂交结果。对建立的A型轮状病毒、GI型诺如病毒和GII型诺如病毒液相芯片检测方法进行灵敏度、干扰性分析,并应用该方法对68份粪便样品的核酸进行检测。结果灵敏性实验结果表明,该方法对GII型诺如病毒的检测灵敏度较高,检出限为10 pg/PCR;对轮状病毒的检出限为100 pg/PCR;该方法对GI型诺如病毒的检测灵敏度较低,检出限为1 ng/PCR。干扰性实验结果表明,轮状病毒、GI型诺如病毒和GII型诺如病毒的液相芯片检测,当病毒之间的模板量不同时(1∶1、1∶2、2∶1、1∶5、5∶1、1∶10、10∶1、1∶100、100∶1),仍能够准确检测;对68份临床粪便样品的核酸进行检测,检测出A型轮状病毒样品19份,GI型诺如病毒样品1份,GII型诺如病毒样品18份;轮状病毒和GII型诺如病毒混合感染1份,GI和GII型诺如病毒混合感染1份。结论本研究建立的轮状病毒和诺如病毒液相芯片检测方法通...     

手足口病病毒分离方法研究

目的探讨影响手足口病病毒分离培养的可能因素以及方法的改进。方法取手足口病患儿的粪便、肛拭子或脑脊液、疱疹液、咽拭子,其中以粪便为主,经Hank’s平衡缓冲液（HBSS）重悬震荡后,离心取上清液接种于横纹肌肉瘤传代细胞（RD-A细胞）,二次传代后通过肠道病毒致细胞病变效应（CPE）分析及EV71、CA16及肠道病毒通用试剂盒进行荧光定量PCR的方法来鉴定病毒分离效果。结果 RD-A细胞能够有效的分离EV71、CA16和其他肠道病毒,采样时间在发病3日内,病毒分离效果达到66.7%,3日以上,病毒分离效果仅有29.1%。未添加万古霉素、阿米卡星和制菌霉素的病毒分离,污染率达到75%,分离效率为13.6%,添加三种抑制细菌和霉菌的抗生素后,污染率达到3.93%,分离效率达到54.9%。结论采样时间在发病3日内,有效的抑制细菌及霉菌的生长,合理的细胞接种密度可以明显提高病毒的分离培养效率。     

2000年深圳市肠道病毒71型的监测

肠道病毒 71型 ( enterovirus type71 ;EV71 )的感染可导致多种临床症状 ,EV 71可以引起发热性疾病、手足口病、疱疹性咽峡炎、无菌性脑膜炎、脑炎、脑干脑炎、肺水肿、脊髓灰质炎样的麻痹性疾病多种疾病 ,甚至导致死亡。我们于 2 0 0 0年对深圳地区 62例疑似肠道病毒感染者进行了 EV71型的监测 ,现将有关情况报告如下。1　材料与方法1 .1　标本的收集　 2 0 0 0年 4月至 1 2月 ,收集深圳市疑似肠道病毒感染病例粪便标本 62份 ,保存于- 80℃。1 .2　标准毒株　 EV71的标准毒株采用 EV71 -SHZH98[1] ,其全基因组已提交国际核酸与蛋白数…