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目的: 比较骨髓来源的胚胎样干细胞(ELSCs)与间充质干细胞(MSCs)的体外成肌分化能力。方法:采用胚胎干细胞扩增用的无血清Knockout-DMEM培养基在明胶包被过的培养瓶中培养人骨髓单个核细胞以分离ELSCs,传统方法从相同骨髓中分离MSCs,倒置相差显微镜下观察细胞形态特征,采用免疫荧光染色鉴定多潜能抗原标志的表达。成肌分化液分别培养ELSCs和MSCs,采用免疫染色法检测肌纤维特异性抗原标志肌球蛋白重链(MHC)、成肌素(myogenin)和MyoD蛋白的表达, RT-PCR检测MHC、myogenin和MyoD mRNA的表达,计算MHC阳性肌纤维的比例以比较ELSCs与MSCs的体外成肌分化能力。结果:无血清培养基可从骨髓中分离到弱表达多潜能抗原标志Oct-4、Nanog-3和Sox-2的ELSCs,体积较小,形态纤细均一,在形态方面不同于相同骨髓来源的MSCs,后者不表达多潜能抗原标志。在成肌分化液中培养,ELSCs和MSCs均可被诱导为在蛋白和mRNA水平表达MHC和myogenin的多核肌纤维,但诱导培养10 d时,ELSCs的MHC蛋白阳性肌纤维的比例为(25.7±4.1)%,MSCs为(15.8±7.6)%,ELSCs的成肌分化能力明显高于MSCs(P<0.05)。 结论:骨髓ELSCs能被诱导为多核肌纤维,并具有比来自相同骨髓的MSCs更强的成肌分化能力,ELSCs是肌病治疗更理想的种子细胞。 相似文献
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目的建立从成体骨髓中分离胚胎样干细胞的技术方法。方法采用密度梯度离心法从成体骨髓中分离单个核细胞,运用胚胎干细胞扩增用的无血清knockout-DMEM培养基在明胶包被过的培养瓶中扩增培养,光学显微镜下观察细胞形态特征,分别采用免疫荧光染色和RT-PCR方法鉴定多潜能干细胞标志的表达。结果采用无血清培养基在明胶包被过的培养瓶中培养的方法,可从成体骨髓中分离到贴壁生长的细胞,这些细胞与传统方法分离到的间充质干细胞相比体积更小、形态纤细均一,传代后均匀分布生长,不易老化,而且这些细胞弱表达多潜能抗原标志Oct-4、Nanog-3和Sox-2。结论采用扩增胚胎干细胞的技术方法可以从成体骨髓中分离到表达部分多潜能干细胞标志的胚胎样干细胞。 相似文献
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二烯丙基二硫上调p21、STAT1和CAMTA1诱导人白血病HL-60细胞分化 总被引:3,自引:2,他引:1
目的应用抑制性消减杂交(SSH)研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞分化的分子机制。方法在前期工作中,我们成功地构建了具有高消减效率的DADS诱导白血病分化的cDNA文库,本实验通过挑取文库中的30个克隆制备质粒并酶切分析、测序和同源性检索。结果18个克隆均具有100~600bp左右的插入片段,测序分析发现10个差异表达基因,分别与细胞周期、信号转导、代谢、RNA结合等有关。RT-PCR验证其中上调的3个基因:p21、STAT1和CAMTA1,结果与SSH相符。结论p21、STAT1和CAMTA1表达上调与DADS诱导白血病分化密切相关。 相似文献
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目的 观察人工全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)后并发急性低血压的临床特点,分析其原因,探讨相应的预见性的护理对策.方法 回顾性分析了290例初次行TKA患者的临床资料、术后低血压的发生情况和相关因素,以明确导致术后急性低血压的原因,并提出相应的护理策略.结果 290例行TKA患者中32例并发术后急性低血压,发生率为11.03%.其中显性失血量(术中+术后8h内)≥500 mL者术后低血压的发生率显著高于<500 mL者(P<0.01),≥60岁者高于<60岁者(P<0.05),有心血管系统病史者高于无心血管疾病者(P<0.01),腰硬联合麻醉患者高于腰麻患者(P<0.05),术中应用止血带的患者高于未使用者(P<0.01).结论 TKA术后的急性低血压具有骤然发生、极其凶险、术后4~8h为高发时间窗的临床特点,其发生主要与失血量、年龄、有无心血管系统病史、麻醉方式和术中有无使用止血带等因素有关.做好术前、术后评估、严密监测生命体征和病情变化等预见性的护理措施是早期发现、提前干预、大大降低抢救风险的关键. 相似文献
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