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人骨髓胚胎样干细胞向多核肌纤维诱导分化的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:比较骨髓来源的胚胎样干细胞(ELSCs)与间充质干细胞(MSCs)的体外成肌分化能力。方法:采用胚胎干细胞扩增用的无血清Knockout-DMEM培养基在明胶包被过的培养瓶中培养人骨髓单个核细胞以分离ELSCs,传统方法从相同骨髓中分离MSCs,倒置相差显微镜下观察细胞形态特征,采用免疫荧光染色鉴定多潜能抗原标志的表达。成肌分化液分别培养ELSCs和MSCs,采用免疫染色法检测肌纤维特异性抗原标志肌球蛋白重链(MHC)、成肌素(myogenin)和MyoD蛋白的表达,RT-PCR检测MHC、myogenin和MyoDmRNA的表达,计算MHC阳性肌纤维的比例以比较ELSCs与MSCs的体外成肌分化能力。结果:无血清培养基可从骨髓中分离到弱表达多潜能抗原标志Oct-4、Nanog-3和Sox-2的ELSCs,体积较小,形态纤细均一,在形态方面不同于相同骨髓来源的MSCs,后者不表达多潜能抗原标志。在成肌分化液中培养,ELSCs和MSCs均可被诱导为在蛋白和mRNA水平表达MHC和myogenin的多核肌纤维,但诱导培养10d时,ELSCs的MHC蛋白阳性肌纤维的比例为(25.7±4.1)%,MSCs为(15.8±7.6)%,ELSCs的成肌分化能力明显高于MSCs(P<0.05)。结论:骨髓ELSCs能被诱导为多核肌纤维,并具有比来自相同骨髓的MSCs更强的成肌分化能力,ELSCs是肌病治疗更理想的种子细胞。 相似文献
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目的 探讨以与血管内皮生长因子(VEGF)的主要受体KDR特异性结合的短肽K237(P)为配体制备靶向脂质体超声造影剂(P-Bio-Av-Bio-Mbs)的方法。 方法 采用生物素-亲和素桥接法构建P-Bio-Av-Bio-Mbs,流式细胞术筛选最佳配体适配剂量,光镜及荧光显微镜观察靶向微泡与KDR强阳性表达的人大肠癌LOVO细胞结合情况,计算花环形成率。分别以5、50、99 ml/h速率水流冲刷,光镜观察靶向微泡与LOVO细胞结合情况。 结果 不同亲和素剂量下(0、2、6、10、30 μg),微泡表面亲和素携带率差异有统计学意义(P<0.05)。Mavidin=6 μg时,携带率增长达平台期;不同短肽剂量下(0、30、40、50、60、70、100 μg),微泡表面短肽携带率差异有统计学意义(P<0.05),当MK237=50 μg时,微泡表面短肽携带率增长达平台期。光镜下KDR强阳性表达的LOVO细胞周围花环形成率高达90.52%,荧光显微镜下微泡外壳发出明亮绿色荧光。随冲刷速度增加,靶细胞周围黏附的靶向微泡减少,在99 ml/h冲刷速度下,靶细胞周围仍可见花环结构。 结论 通过生物素-亲和素桥连作用,短肽K237被有效装配在P-Bio-Av-Bio-Mbs表面,体外具有靶向特异性及一定稳定性。流式细胞术是筛选靶向微泡配体适配剂量的可靠方法。 相似文献
115.
相较于胰腺、直肠、空回肠等神经内分泌瘤,胃神经内分泌瘤更为少见。按中国胃肠胰神经内分泌瘤专家共识(2016年版),胃神经内分泌瘤可分为3型,1型占70%~80%,2型占5%~6%,3型占14%~25%。笔者报道了1例胃多发神经内分泌瘤,结合临床症状、内镜下表现、病理(免疫组化结果)、内分泌及免疫学指标等,诊断为罕见的2型胃神经内分泌瘤。 相似文献
116.
通过回顾干针的发展和现状,包括西方针灸界的“反干针独立”运动,本文强调干针就是针灸,是一种“去经络化”的针灸。关于干针的临床实践和现代研究在过去二十年中出现了前所未有的增长,提示中医经络理论不是指导针灸的唯一理论。某些高质量的干针试验甚至可以成为针灸研究的范例,例如细化穴位内的刺激靶点,认识穴位(反映点)的反射特性,或建立标准化的刺激量指标,同时客观评估针刺疗效。与任何其他疗法一样,干针也有其缺点或局限性。在对经典针灸实施创新之际,也须继承经典针灸的宝贵经验与经络理论的合理内核。这对提高包括干针在内的针灸干预措施的疗效及拓宽针灸治疗范围和适应证至关重要。 相似文献
117.
手术联合术后立体定向放射外科(SRS)治疗提高了可切除脑转移瘤患者的总生存, 成为可切除脑转移瘤重要的治疗模式之一。与之相比, 术前SRS具有减少术中有活性的肿瘤细胞播散到治疗腔、降低照射剂量、减少对周围正常脑组织的照射、保证了围术期治疗的顺利进行等理论优势, 而且被近年的临床研究证实其可降低局部复发率、放射性脑坏死和软脑膜转移的发生率。另外, 其适应证、剂量分割及联合药物治疗等实施细节有待更多前瞻性研究证实。本文对该治疗策略的研究进展进行综述。 相似文献
118.
病例 1 ,女 ,76岁 ,因意识不清 2h于 1 998年 3月 2 8日入院。患者既往有高血压病史和冠心病史 3 0a,一直低盐饮食。入院前数天纳差 ,并有口服利尿药史 ,患脑血栓3a ,无烟酒嗜好。入院前 2h发现其意识不清 ,呼唤不醒 ,继而出现面部青紫 ,四肢抽搐 ,口吐胃内容物 ,伴乱语 ,不能认人 ,急送我院急诊室。测BP 1 6.7/1 0 .7kPa,HR 85次 /min ,心律齐 ;血钾 3 5mmol/L ,钠 1 2 0mmol/L ,氯 98mmol/L ;心肌酶谱正常 ,予补电解质无明显好转。查体 :体型肥胖 ,意识不清 ,定向力障碍 ,双肺可闻及少许水泡音 ;HR 80次 … 相似文献
119.
背景:将体细胞重编程为多能干细胞在生物医学研究领域有广泛的应用价值。目的:分析鸡卵清提取液中不同分子质量的蛋白促进293T细胞升高表达多能基因Oct-3/4和Nanog的作用。方法:分离鸡卵清提取液中大于3 ku和小于3 ku的成分,用于293T细胞共培养。实验分为4组:每孔加入1×10^5个293T细胞,总体积500μL。对照组加入500μL培养基;另外3个孔分别加500μL鸡卵清提取液、鸡卵清大于3 ku的成分和小于3 ku的成分。采用定量PCR检测多能基因Nanog和Oct-3/4的相对表达量。结果与结论:用共培养法大于3 ku的成分有促细胞升高表达多能基因Oct-3/4和Nanog的作用,但小于3 ku的成分没有促细胞升高表达多能基因的作用。提示在鸡卵清提取液中促细胞升高表达多能基因的成分是大于3 ku的蛋白质。 相似文献
120.
大鼠脊髓全横断后TrkA和NGF在运动皮质的免疫组化研究 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 探讨脊髓全横断后神经营养因子及相应受体在运动皮质内的分布规律,为临床应用神经生长因子治疗脊髓损伤提供实验依据。方法 用免疫组化方法和图像分析技术检测脊髓全横断后不同时相运动皮质内,神经生长因子(NGF)及其高亲和性受体TrkA的表达和分布。结果 各组运动皮质中TrkA和NGF阳性神经元主要分布在第5层;脊髓全横断3d后,运动皮质内TrkA表达上调,损伤后7d到达高峰,21d回到正常水平;NGF表达在损伤后7d上调,峰值出现在损伤后7d,21d回到正常水平。结论 NGF表达增高迟于TrkA,提示在损伤早期给予外源性NGF可能有利于受损的皮质脊髓束神经元的存活与再生. 相似文献