33批茶多酚高效液相色谱指纹图谱的质量控制研究

 目的建立茶多酚的数字化色谱指纹谱,结合主要单体成分的含量检测,作为茶多酚质量控制的依据。方法采用Supelco Discovery C₁₈色谱柱,含0.1％甲酸的水-甲醇梯度洗脱的HPLC色谱系统,检测波长210 nm。结果依照33个批次茶多酚样品的色谱和光谱数据构建起色谱指纹谱,各项方法学考察结果良好。茶多酚产品的特征指纹检出率应在80％以上,咖啡因的相对峰面积值(100 Ar)不应超过5。结论能科学地、客观公正地反映样品的真实组成和内在品质。     

基于熵权法的多目标筛选甘草黄酮类成分纯化工艺

目的联用熵权法、Plackett-Burman设计(PBD)与Box-Behnken设计(BBD),多目标筛选甘草黄酮类成分的纯化工艺。方法在构建甘草HPLC指纹图谱的基础上,以6种黄酮类成分甘草素葡萄糖芹糖苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草素葡萄糖芹菜苷、异甘草苷和新异甘草苷的回收率为检测指标,筛选12种大孔树脂中最佳型号。熵权法赋予6种黄酮类成分的回收率客观权重,计算综合指标作为评价标准,运用PBD筛选显著性影响因素,结合BBD优选大孔树脂富集甘草黄酮的最佳工艺参数。结果 ADS-7型大孔树脂对甘草中6种黄酮类成分的富集选择性最高。最佳工艺参数为上样p H值4.5,上样质量浓度0.20 g/m L,上样量1.0 g/g,上样体积流量0.6 m L/min,6.7 BV的83%乙醇以1.0 m L/min体积流量洗脱。纯化后6种黄酮类成分的回收率为86%~97%,模型综合评价预测值为93.32%,实验所得综合评价为93.05%,相对偏差1.17%。结论联用熵权法、PBD与BBD筛选甘草黄酮类成分纯化工艺是科学可行的,可为实现中药有效成分分离纯化的多目标寻优提供借鉴。     

川芎和黄芪有效部位组合给药后川芎嗪在脑缺血再灌注大鼠体内的PK-PD结合研究

目的 探讨黄芪川芎有效部位配伍给药后川芎嗪在脑缺血再灌注大鼠体内的药动学-药效学(PK-PD)结合模型。方法 建立大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型,再灌注同时ig给予黄芪川芎有效部位配伍组方(黄芪总皂苷、黄芪总黄酮、川芎总生物碱、川芎总有机酸各100 mg/kg),给药后0.083、0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、6.0 h各时间点眼眶静脉丛取血0.5 m L。RP-HPLC测定血浆中川芎嗪的浓度,试剂盒测定大鼠血浆中乳酸脱氢酶(LDH)的活性。采用DAS 3.2.6软件拟合PK-PD结合模型,并计算药动学与药效学参数。结果 大鼠血浆中LDH活性效应值与川芎嗪血药浓度不直接相关,效应滞后于血药浓度,以效应室联结的Emax模型较优。结论 成功建立了黄芪川芎有效部位配伍给药后川芎嗪在脑缺血再灌注大鼠体内的PK-PD结合模型,可推广应用于预测其他中药配伍后主要有效成分的PK-PD研究。     

基于网络药理学研究黄芪-红花药对抗脑缺血作用机制

目的基于网络药理学研究黄芪-红花药对抗脑缺血作用机制。方法通过数据库TCMSP、TCM、STITCH以及OMIM、TTD、DrugBank分别对黄芪-红花药对的化学成分、成分靶点以及疾病靶点进行检索。将所得到的靶点导入Cytoscape 3.6.1软件,构建成分-靶点网络、成分靶点相互作用网络、疾病靶点相互作用网络、成分靶点与疾病靶点相互作用网络。通过MAS 3.0对合并所得的候选靶点进行GO富集分析和KEGG通路注释分析。结果从黄芪-红花药对中共筛选出36个化合物,所对应的成分靶点共176个,脑缺血疾病靶点164个,网络合并确定了172个候选靶点,8条相关的信号通路。结论黄芪-红花药对治疗脑缺血的机制可能与MAPK、ErbB、Toll样受体、脂肪细胞因子、GnRH、T细胞受体、Fc epsilonRI、p53等信号通路有关,其中MAPK为最主要的信号通路。此外,黄芪、红花在抗脑缺血靶点上有着较大的重复性,如CASP3、TLR4、APOB、AKT1等均为共同靶点,在这其中CASP3的度值最高为10,说明了CASP3可能是黄芪-红花药对中相对重要的靶点。     

银花平感颗粒和三拗汤体内体外结合对甲型流感病毒的影响

目的通过银花平感颗粒和三拗汤两方药体内外对甲型H1N1流感病毒影响的实验研究,探讨不同方剂配伍对流感病毒的抑制作用。方法体内实验:采用滴鼻感染建立小鼠流感病毒肺炎模型,按体重分层随机分为正常对照组、病毒模型组、达菲组[21. 63 mg/(kg·d)]、银花平感颗粒组[12 g/(kg·d)]和三拗汤组[9 g/(kg·d)],灌胃给予相应药物,每天1次,连续5天。灌胃结束后,摘取肺、脾及胸腺组织,分别称重,计算各组小鼠肺指数、肺组织抑制率及免疫脏器指数;采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠肺组织病毒载量表达,苏木精-伊红(HE)染色法检测各组小鼠肺组织的病理改变。体外实验:将银花平感颗粒和三拗汤两方药作用于感染甲型H1N1流感病毒的犬肾细胞(MDCK),采用MTT法检测两方药对甲型H1N1流感病毒的抗病毒有效率及显微镜观察其引起的细胞病变效应(CPE)。结果体内实验中,与正常对照组比较,病毒模型组小鼠肺指数升高,脾指数、胸腺指数均降低,多处肺实变,炎症细胞浸润,肺组织内病毒载量高表达(P 0. 01),与病毒模型组比较,银花平感颗粒和三拗汤均降低流感病毒感染小鼠肺指数(P 0. 01),升高脾指数、胸腺指数(P 0. 05,P 0. 01),并明显减轻流感病毒肺炎小鼠肺组织病理变化,降低肺组织病毒载量(P 0. 05,P 0. 01);体外实验中,银花平感颗粒和三拗汤可以明显抑制流感病毒引起的CPE,对病毒感染也有明显的保护作用。结论银花平感颗粒和三拗汤两方药在体内外均有良好的病毒抑制作用,其抗病毒作用可能与抑制流感病毒复制、保护免疫器官、减轻肺部炎症损伤及抑制病毒引起的CPE有关,且在体内外对流感病毒的抑制方面,银花平感颗粒比三拗汤配伍更全面,疗效更好。     

养阴通脑颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的 探究养阴通脑颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。方法 建立大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型,SD大鼠随机分为假手术组、模型组、养阴通脑颗粒组。建立模型后24、48、72 h分别测定神经功能评分,术后72 h进行TTC染色并计算脑梗死体积,逆转录-聚合酶链式反应法（RT-PCR）检测大鼠脑组织中NLRP3炎性小体、信号传导与转录激活因子（STAT3） mRNA表达,酶联免疫吸附法检测血浆中白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果 养阴通脑颗粒能改善神经功能,减少脑梗死体积,显著降低IL-18和TNF-α含量,下调NLRP3、STAT3 m RNA表达。结论 养阴通脑颗粒对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与抑制炎症反应有关。     

中药学成人教育中《中药化学》的教学实践与思考

成人教育目前在规模上有了长足的发展,但办学质量、管理规范等尚存在欠缺。本文以中药学成人教育中一门重要的专业课程——《中药化学》为例,针对教学对象的特殊性和学习的阶段性,从教学内容、教学模式和手段等方面来提高学生的专业理论水平与实践能力。     

银花平感颗粒体内抗甲型H1N1流感病毒作用

为探讨银花平感颗粒(YHPG)体内抗甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)作用及其对流感病毒感染小鼠免疫功能的影响,采用滴鼻感染ICR小鼠建立流感病毒肺炎模型,感染后第3天和第7天测定各组动物肺指数并观察肺组织病理变化;采用实时荧光定量RT-PCR和流式细胞技术,观察各组肺组织病毒载量以及外周血T细胞亚群(CD4⁺,CD8⁺,CD4⁺/CD8⁺)的变化。结果表明,YHPG(15,30 g·kg^-1)剂量组在感染后第3天和第7天均能显著降低流感病毒感染小鼠肺指数和肺组织病毒载量,减轻肺组织病理变化,同时还可显著提高外周血CD4⁺ T细胞水平和CD4⁺/CD8⁺比值,降低CD8⁺ T细胞水平。说明YHPG可抑制流感病毒复制、减轻流感病毒感染小鼠肺部损伤以及调节流感病毒小鼠免疫功能下降,对甲型H1N1流感病毒感染小鼠有一定的治疗作用。     

遗传神经网络与遗传算法优选黄芪皂苷微波提取工艺条件

目的基于中心组合试验设计(central-composite design,CCD),采用遗传神经网络(genetic neural network,GNN)和遗传算法(genetic algorithm,GA)优选黄芪皂苷类成分的微波提取工艺条件。方法构建黄芪皂苷的HPLC指纹图谱,选择含量较高的7种成分(黄芪皂苷I～V和异黄芪皂苷I、II),以峰面积代替质量浓度,将通过熵权法计算得到的综合得分作为评价指标。在单因素实验基础上,运用CCD开展实验,构建遗传神经网络以建立提取工艺条件与评价指标之间的定量关系,并通过遗传算法优选微波提取黄芪皂苷成分的最佳工艺参数,并与响应面法优化结果进行比较。结果通过GNN与GA获得的最佳提取工艺条件为提取时间260s、提取功率695W、乙醇体积分数50%、液料比21.5,7个皂苷成分的综合得分为1 432.584;响应面分析法获得最佳提取工艺条件为提取时间190 s、提取功率880 W、乙醇体积分数70%、料液比18.5,7个皂苷成分的综合得分为1066.236;GNN与GA所获提取工艺条件可有效增加综合得分。结论通过熵权法以及遗传神经网络构建黄芪皂苷成分与微波提取工艺条件之间的数学模型是可行的,可为实现中药有效部位多成分提取、分离纯化的工艺优选提供一种新的模式。