EB病毒重组抗原Rta蛋白的表达及用于鼻咽癌筛查ELISA方法的建立

目的 制备和表达EB病毒重组抗原Rta蛋白,并建立筛查鼻咽癌的ELISA方法,为鼻咽癌的早期筛查提供科学依据。方法 设计引物扩增BRLF1编码区全长序列,构建重组质粒p PICZαA-BRLF1,电转入毕赤酵母GS115,筛选His+Mut+表型转化子并用甲醇进行诱导表达和纯化;建立Ig G/Rta抗体的ELISA检测技术,用于300例鼻咽癌患者和200例健康对照者血清的筛查,对检测结果进行评价。结果 成功构建p PICZαA-BRLF1重组质粒;目的蛋白在毕赤酵母GS115中高效分泌表达(50%),蛋白电泳显示在66.0 k Da处有相应条带;同时Western-blot也证明其有良好的免疫活性;利用该重组Rta蛋白建立的ELISA检测方法对鼻咽癌检测阳性率显著高于Ig A/VCA试剂盒(P0.01)。结论 本研究构建了EB病毒重组抗原Rta蛋白的真核表达载体,表达外源蛋白产量高,免疫活性好,可用于Ig G/Rta ELISA检测技术研究,适合于鼻咽癌的大规模筛查和早期诊断。     

运用"形气神"思想治疗恶性肿瘤

"形气神"是中医认识人体的思想理论之一,是意象思维的重要体现,三者相合构成人体,三者相互关联.从形、气、神3个方面探讨对恶性肿瘤综合治疗的指导作用:治"形"是核心,为针对有形肿物所做的治疗;治"气"是基础,为针对无形功能所做的治疗;治"神"是关键,为针对心理情志所做的治疗,从而将国学原理、中医意象思维指导下的中医临床思想融入到西医临床诊疗中,以此为恶性肿瘤的治疗提供新的思路.     

PCR-毛细电泳片段分析法检测毛细支气管炎病原的临床价值探讨

目的探讨PCR-毛细电泳片段分析法（PCR-CEFA）检测毛细支气管炎病原的临床应用价值。方法选取2018年1至12月温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院儿科收治的因毛细支气管炎住院的≤24个月且喘息次数≤2次的患儿932例,采集患儿鼻咽分泌物,采用PCR-CEFA检测呼吸道合胞病毒（RSV）、鼻病毒（RV）、流感病毒（Flu）、副流感病毒（HPIV）、腺病毒（ADV）等8种病毒核酸;直接免疫荧光法（DFA）检测RSV、HPIV、Flu、ADV抗原;并收集患儿性别、年龄、既往喘息史、湿疹史、哮喘家族史、家族过敏性疾病史、总IgE、血嗜酸性粒细胞计数（B-Eos）等资料。比较两种方法、不同年龄组患儿病毒检出率及RSV组与RV组患儿流行病学资料及实验室检查结果。结果PCR-CEFA病毒检出率为88.2%,高于DFA的33.6%,差异有统计学意义（P＜0.01）。PCR-CEFA对RSV、HPIV、Flu、ADV的检出率均高于DFA,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。以DFA为参照,PCR-CEFA检测RSV、HPIV、Flu、ADV的特异度均达80%以上。≤12月龄患儿RSV检出率高于＞12~24月龄患儿,RV、ADV、HBoV检出率均低于＞12~24月龄患儿,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。RV组患儿年龄、B-Eos升高比例均明显高于RSV组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。结论与DFA比较,PCR-CEFA病毒检出率更高,病毒检测种类更多,具有良好的特异度,有利于早期明确毛细支气管炎病原。     

脊髓电刺激对大鼠癫痫脑电高频振颤活动的影响

目的 探索脊髓电刺激对大鼠癫痫发作状态脑电高频振颤活动的影响.方法 将16只SD大鼠随机分为脊髓电刺激组和对照组,各8例.采用致癫剂戊四唑诱导的强直 — 阵挛急性发作动物模型.脊髓电刺激组大鼠在致癫剂注射开始前5 min予130 Hz脊髓电刺激,刺激持续20 min.应用MATLAB的Findpeaks功能提取强直 — 阵挛发作期皮层脑电图中的快速涟波振颤(250～600 Hz)成分,通过评估总快速涟波出现次数对脊髓电刺激的抗癫痫作用及相关机制进行阐述.结果 戊四唑诱导的棘波放电与快速涟波振颤活动同步出现,与对照组相比,脊髓电刺激使总快速涟波出现次数降低了40％,差异有统计学意义.结论 高频脊髓电刺激有癫痫抑制作用,该作用与电刺激介导的快速涟波振颤相关去同步化机制有关.     

大众媒体对医患纠纷的报道及其对公众认知与行为的影响

采用方便抽样随机抽取280位北京民众、105位网民进行问卷调查,总结大众媒体报道医患纠纷的特点,分析大众媒体对公众认知与行为的影响,为进一步规范大众媒体报道方式提供建议。结果显示,大众媒体报道医患纠纷的方式呈多样化,但其可信程度参差不齐。63.56%的被调查者认为大众媒体报道医患纠纷总体真实;23.29%的被调查者认为其报道缺乏真实性,注重速度而忽视质量。98.63%的被调查者表示媒体报道对其认知医疗事件存在一定影响,其中积极影响占69.36%,消极影响占30.64%。大众媒体报道医患纠纷存在一定医学局限性,建议在尊重事实、客观报道的基础上增强医疗报道的科学性和专业性,建立医院-媒体信息沟通渠道,加强监督与规范化管理,保障医疗报道真实性,传递正能量,营造和谐医患环境。     

手术治疗椎管内神经鞘瘤58例

目的总结椎管内神经鞘瘤的手术经验。方法回顾性分析2002年3月2012年9月手术治疗的58例椎管内神经鞘瘤的临床资料,其中40例采用后正中全椎板入路,4例采用后正中半椎板入路,3例采用经后路半椎板+关节突入路部分切除,7例行经后路全椎板+关节突入路切除+内固定植骨融合术,2例行前外侧经胸+后路椎板入路切除,2例行后外侧经横突+椎板入路切除。结果肿瘤全切除55例,次全切除3例。55例术后随访6~34个月,平均18.5月;按照Frankle分级评定标准评判效果,改善50例,不变5例;肿瘤全切者无复发,肿瘤次全切除者2例复发。结论对于椎管内神经鞘瘤,手术入路的选择应根据肿瘤的位置、大小、肿瘤与脊髓之间的关系及椎管外有无侵润等综合考虑。     

人工气腹前腹腔灌洗对腹腔镜胆囊切除术后肩痛的疗效分析

目的比较腹腔充入CO₂气体建立人工气腹前、后不同时间段进行腹腔灌洗,对腹腔镜胆囊切除术（LC）术后肩痛的疗效。 方法选择2016年3月至2018年6月南方医科大学附属小榄医院诊治的LC患者120例,按照数字表法随机分为A、B、C组,每组40例。A组为对照组,术后尽量吸尽膈下气体关腹,不进行腹腔灌洗;B组术后用温生理盐水（37.5℃的0.9%氯化钠溶液）进行腹腔灌洗;C组为充入CO₂气腹前先进行膈下温生理盐水灌洗,术后再次行腹腔灌洗。比较3组患者术后6、12、24、48 h的术后肩痛评分（VAS）和中、重度肩痛发生率。 结果3组患者在术后48 h不同时间点的肩痛VAS评分比较及两两比较,差异均有统计学意义（P<0.05）,其中C组的肩痛程度最轻。A、B、C组患者中、重度肩痛发生率分别为27.5%（11/40）、7.5%（3/40）、2.5%（1/40）,整体比较差异有统计学意义（χ²=12.708,P=0.002）,其中A组发生率显著高于B组和C组（χ²=4.242、7.941,P=0.039、0.005）,而B、C两组发生率差异无统计学意义（χ²=0.263,P=0.608）。 结论温生理盐水灌洗腹腔可明显降低LC术后疼痛的发生率和减轻术后肩痛的强度,其中人工气腹前灌洗温生理盐水的患者术后发生肩痛程度最轻。     

枢椎侧块关节前倾对寰枢椎稳定性的影响及不同重建方式的生物力学评价

目的 :探讨枢椎侧块关节前倾对寰枢椎稳定性的影响及不同重建方式的生物力学稳定性,为指导临床术式选择提供理论依据。方法:选取6具男性新鲜尸体枕颈部标本(枕骨髁基底C0～C3),年龄18～50岁,每具标本依次制作成完整状态模型(A组)、切断标本齿状突基底部造成齿状突Ⅱ型骨折制作寰枢椎不稳模型(B组)、枢椎侧块25°前倾楔形截骨模型(C组)、后路寰枢椎椎弓根钉棒内固定模型(D组)及后路寰枢椎椎弓根钉棒内固定+侧块关节间植骨模型(E组),在脊柱三维运动试验机上分别给予1.5N·m的屈/伸、左/右侧弯、左/右旋转力矩,测量不同模型的三维运动范围(ROM)。结果:A组在屈/伸、左/右侧弯和左/右旋转运动的ROM分别为10.80°±0.74°/10.90°±0.54°、9.18°±0.97°/9.06°±0.47°、23.07°±0.27°/23.15°±0.63°;B组分别为15.88°±0.56°/16.20°±0.48°、17.12°±0.35°/17.27°±0.51°、34.15°±0.38°/34.27°±0.44°;C组分别为18.93°±0.61°/20.16°±0.54°、26.18°±1.34°/25.26°±0.71°、40.86°±0.60°/41.16°±0.38°;D组分别为0.64°±0.19°/0.57°±0.11°、2.01°±0.45°/1.86°±0.34°、1.36°±0.18°/1.76°±0.13°;E组分别为0.63°±0.15°/0.51°±0.17°、1.28°±0.86°/1.42°±0.22°、0.50°±0.28°/0.59°±0.26°。在屈/伸、左/右侧弯运动中,C组的ROM最大,与其他组两两比较差异有显著性(P0.05),B组和C组的ROM均较A组明显增大(P0.05),D组和E组的ROM均较A组、B组、C组明显减小(P0.05),D组和E组比较无统计学差异(P0.05);在左/右旋转运动中,C组的ROM最大,E组的ROM最小,D组和E组的ROM均较A组、B组、C组明显减小(P0.05),D组和E组比较差异有显著性(P0.05)。结论:枢椎侧块关节前倾角度增大会明显增加寰枢椎的ROM,导致其在屈/伸、侧弯及抗旋转的稳定性明显下降,后路寰枢椎椎弓根钉棒内固定在屈/伸、左/右侧弯运动的稳定性与后路寰枢椎椎弓根钉棒内固定+侧块关节间植骨相似,但在限制寰枢椎旋转运动的能力较弱。     

术前CONUT评分预测HBV相关的HCC患者术后生存率

目的 了解控制营养状况（controlling nutritional status,CONUT）评分预测乙型肝炎病毒（HBV） 相关的肝细胞性肝癌（HCC）患者术后总体生存率的能力,并将与常用分期评分标准进行比较。方法 回顾性分析温州医科大学附属第一医院2007年1月至2013年6月收治的373例HBV相关的HCC患者临床资 料。生成受试者工作特征曲线（ROC）,并计算曲线下面积（AUC）,评估不同评分系统辨别1、3、5年存 活率的能力。再将患者分为高CONUT组（CONUT>2,n=15）和低 CONUT组（CONUT≤2,n=216）,比较两组的临床病理特征及术后总生存期（OS）的差异,通过Cox模型进行单因素、多因素分析,明确影响患 者预后的独立危险因素。结果 ROC曲线下面积比较显示,CONUT的AUC值始终较高。低CONUT组 的5年OS高于高CONUT组（P<0.05）。将临床病理特征以及CONUT和CLIP评分等进行OS的单因素和多 因素分析,结果显示,CLIP评分（P=0.004,HR 1.400,95%CI 1.113～1.762）,纤维蛋白原<1 g/L或>4 g/L （P=0.002,HR 1.976,95%CI 1.272～3.072）, TNM分期（P=0.003,HR 1.767,95%CI 1.212～2.575）和 CONUT>2（P=0.010,HR 1.697,95%CI 1.132～2.544）为患者预后的独立危险因素。结论 CONUT>2分可以 作为HBV相关HCC患者预后的独立危险因素;在与Okuda评分、CLIP评分、BCLC分期评分标准比较中, CONUT具有更好的预测价值。     

MicroRNA-218在肝细胞癌中的表达及功能

目的检测MicroRNA-218（miR-218）在肝细胞癌中的表达情况并研究其在肝癌中的功能。方法收集46例肝细胞癌及对
应癌旁组织,运用qRT-PCR技术检测miR-218 在肝癌及对应癌旁组织中的表达情况;应用miR-218 mimic转染人肝癌细胞系
HepG2,MTT和流式细胞术检测转染后细胞活力和凋亡变化,qRT-PCR和Western blot检测miR-218潜在靶点的表达变化。结
果miR-218在肝癌组织中的表达显著低于对应的癌旁组织（P<0.05）;miR-218低表达与肿瘤大小（>5 cm）和高TNM分期（Ⅲ+
Ⅳ）具有显著相关性（P<0.05）;在HepG2细胞中,miR-218抑制细胞增殖和诱导凋亡,并下调Bmi-1和CDK6 mRNA及蛋白表达
（P<0.05）。结论miR-218低表达与肝癌的恶性临床病理特征相关,miR-218可能通过下调Bmi-1和CDK6表达抑制肝癌细胞增
殖和促进凋亡。