多功能纳米粒干预肿瘤细胞膜转运蛋白相关性耐药的研究进展

肿瘤多药耐药(MDR)是指肿瘤细胞在多种机制的介导下,失去对传统化疗药物的敏感性,导致化疗疗效降低。研究认为,包括细胞膜转运蛋白介导的药物外排、肿瘤组织中特殊的微环境、细胞DNA自我修复及抗凋亡、上皮-间质细胞转化等在内的多种因素均可能是导致MDR形成的原因。细胞膜转运蛋白介导的药物外排是指由于肿瘤细胞膜表面ATP结合盒转运蛋白表达上调,导致经由该通道“泵出”细胞外的抗肿瘤药物量增加,降低细胞中的药物浓度从而形成细胞耐药。采取有效的方法抑制由细胞膜转运蛋白过表达引起的药物外泵可能是逆转MDR的关键。多功能纳米粒子作为一种具有良好的应用前景的药物递送系统,已经在抗肿瘤治疗中呈现出诸多优势。此外,经合理设计的纳米粒子还可以结合多种策略协同化疗克服肿瘤多药耐药。本文详细综述运用多功能纳米给药系统结合不同MDR逆转策略,如药物共递送、外界响应及靶点修饰等干预细胞膜转运蛋白外排作用的相关研究,为纳米给药系统下一步的开发以及逆转手段的制定提供参考。     

一种载基因及多聚赖氨酸的脂质超声微泡造影剂制备的实验研究

目的 制备一种能高效载基因的脂质超声微泡造影剂,评价其物理性质、载基因和体内显影能力.方法 采用层-层吸附(LbL)法将基因和多聚赖氨酸(PLL)分层吸附在自制的脂质超声微泡造影剂上,检测微泡造影剂的形态、分布、浓度、粒径、表面电位、载基因和体内显影能力.结果 载PLL、载PLL+基因及载PLL+基因+PLL的微泡与空白微泡相比,其形态、浓度、粒径没有显著差异;随着载PLL和基因层数增加,其表面电位向正或负反转;载基因超声微泡造影剂其外壳吸附基因的层数增加,载基因量也随之增加;载PLL+基因的微泡可增强兔肝实质显像,持续20 min以上.结论 自制的载基因及PLL脂质超声微泡造影剂制备方法简单,载基因的效率高,可作为携带基因等生物活性物质的载体材料.     

TDL复合物提高人脐静脉内皮细胞基因转染效率的体外实验

目的 研究HIV-1 Tat蛋白转导域/质粒DNA/Liposome(TDL)复合物介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, pEGFP)在体外培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell, HUVEC)的转染效率.方法 将质粒DNA与Tat肽以不同的电荷比混匀,再加入2 μl Lipofectamine 2000制成TDL复合物.琼脂糖凝胶电泳分析质粒DNA与Tat肽的结合力;荧光显微镜和流式细胞仪观察TDL复合物与lipofectamine 2000介导基因在体外培养人脐静脉内皮细胞中的转染效果;MTT法检测TDL复合物对人脐静脉内皮细胞生长活性的影响.结果 TDL复合物组琼脂糖凝胶电泳未发现明显DNA条带.TDL复合物的转染率优于单用Lipofectamine 2000(P《0.05). Tat/DNA电荷比为8∶1时,TDL复合物的转染效率最高.TDL复合物组对细胞活性均无明显影响.结论 TDL复合物可明显提高基因在体外培养人脐静脉内皮细胞的转染效率,该方法可作为提高基因转染效率的有效手段之一.     

超声心动图评估化疗相关心脏毒性的研究进展

辅助化疗已被广泛用于治疗恶性肿瘤,但化疗相关心脏毒性却成为影响患者生存质量和生存率的重要因素。早期、准确预测心脏毒性十分重要。超声心动图因操作简便、经济及无创等优点已广泛应用于评估心功能,其相关新技术可弥补常规超声心动图的不足、提高评估心功能的敏感度和准确率,使早期、准确评估心脏毒性成为可能。本文就超声心动图及其新技术评估化疗相关心脏毒性的研究进展进行综述。     

实时三维超声心动图评价冠状动脉粥样硬化性心脏病的应用进展

实时三维超声心动图(RT-3DE)能全方位立体观察心脏结构和功能,可准确、快速量化左心容积和射血分数,在心血管疾病的早期诊断、疗效评价及预后监测方面均有重要价值,本文就RT-3DE定量评估冠状动脉粥样硬化性心脏病的应用进展进行综述.     

穿膜肽TAT的固相合成及体外活性研究

目的 以固相合成法合成穿膜肽TAT,并对合成产物进行活性评价.方法 采用Na-芴甲氧羰基(fluorenyl-methyloxyloxycarbonyl,FMOC)作为α-氨基的保护基,以逐个延伸的固相合成法合成穿膜肽TAT.应用高效液相色谱和质谱仪测定其纯度及相对分子质量;荧光显微镜观察穿膜肽TAT介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green flutescent pro-tein,pEGFP)质粒在体外培养人脐静脉内皮细胞中的转染效果以评价穿膜肽TAT的生物活性;MTT法检测穿膜肽TAT与质粒DNA复合物对人脐静脉内皮细胞生长活性的影响.结果 高效液相色谱和质谱鉴定所制备穿膜肽TAT的纯度为96.6%,相对分子质量1 880.它能够携带质粒DNA穿过细胞膜进行基因转染,并对细胞活性无明显影响.结论 采用Fmoc固相肽合成法可以成功地合成有生物活性的穿膜肽TAT.     

肽功能化载GOD智能响应型相变纳米粒用于乳腺癌超声诊疗的实验研究

目的制备一种肿瘤归巢穿膜肽tLyp-1介导的载葡萄糖氧化酶（GOD）和全氟正戊烷（PFP）纳米粒（tLyp-1-GOD@PFP NPs），观察其基本表征、体内外超声成像以及对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外靶向及体内外抗肿瘤能力。 方法采用乳化法制备tLyp-1-GOD@PFP NPs，观察其形态特点，检测其理化性质（粒径、电位、包封率、释药率）；低强度聚焦超声（LIFU）辐照纳米粒后，光镜下观察其相变情况，并观察其体内外超声成像效果；激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测纳米粒对MDA-MB-231细胞的靶向能力；使用CCK-8法和流式法评估在LIFU辐照下该纳米粒对MDA-MB-231细胞的抗肿瘤能力；通过荷瘤裸鼠尾静脉注射纳米粒并观察肿瘤体积变化和裸鼠体重以探索其体内抑瘤效果。 结果制备的纳米粒呈球形壳核结构，大小均一，其平均粒径为（227.4±12.5）nm，平均电位为（-16.5±2.7）mV，GOD的包封率为（12.93±0.46）%，载药率为（1.62±0.06）%，24 h释药率可达（51.73±3.22）%。光镜下相变和体外超声成像具有辐照时间依赖性。CCK-8和流式细胞仪检测结果证明tLyp-1-GOD@PFP NPs具有良好的生物安全性，并且在LIFU辐照后其抑瘤效果较好。同时，体内实验证实该纳米粒具有良好的超声造影能力和靶向能力，体内治疗结果也表明该纳米粒可有效抑制肿瘤增殖。 结论本研究成功制备了tLyp-1介导的载GOD和PFP的相变型纳米粒，对MDA-MB-231细胞具有特异靶向能力，在LIFU辐照下，可实现体内外超声成像，同时产生良好的抗肿瘤效果。     

不同碘摄入量对子代小鼠海马神经元影响的研究

目的探讨碘缺乏和碘过量对子代小鼠海马CA3区神经元的影响。方法断乳后1个月Balb/c小鼠,雌雄各半,随机分为5组：低碘组（LI）,适碘组（NI）,5倍碘组（5HI）,10倍碘组（10HI）,50倍碘组（50HI）,给予不同浓度的碘化钾碘水,饲养3个月后雌雄合笼,取40日龄子代小鼠脑组织,应用免疫组织化学技术观察海马CA3区神经元,并进行形态计量学分析。结果与NI组相比,5HI组、10HI组NSE阳性神经元面数密度及平均光密度无明显变化,差异无统计学意义; LI组、50HI组面数密度及平均光密度有不同程度的下降,且有统计学意义。结论脑发育临界期碘缺乏及严重碘过量会影响子代小鼠海马神经元的发育,且碘缺乏的影响较碘过量严重。     

实时三维超声心动图评价冠心病患者左前降支冠状动脉PCI术后左心室整体及局部收缩功能与同步性

目的 探讨实时三维超声心动图(RT-3DE)评价冠心病左前降支冠状动脉经皮介入治疗(PCI)后患者左心室整体及局部收缩功能与同步性的应用价值.方法 对30例接受左前降支PCI术的患者分别于术前、术后1周,1、3个月应用RT-3DE进行17节段时间-容积曲线分析,获得左心室舒张末期容积(EDV)、收缩末期容积(ESV)、射血分数(EF)及左心室16节段达到最小收缩容积时间差的标准差校正值(Tmsv-16-SD％),即收缩不同步指数(SDI);同时得到前壁、前间隔及心尖帽共7节段的舒张末期容积(rEDV)、收缩末期容积(rESV)、节段射血分数(rEF)及节段达到最小收缩容积时间的校正值(Tmsv％).结果 术后1个月EDV、ESV、rESV及大部分节段的rEDV低于术前及术后1周(P＜0.05),EF、rEF高于术前及术后1周(P＜0.05),Tmsv-16-SD％及局部节段Tmsv％低于术前(P＜0.05),与术后1周无明显差异(P＞0.05);术后3个月ESV、Tmsv- 16-SD％及大部分节段的rEDV、rESV、Tmsv％低于术前、术后1周及术后1个月(P＜0.05),EF及大部分节段的rEF高于术前、术后1周及术后1个月(P＜0.05),rEDV低于术前及术后1周,与术后1个月相比较无明显差异(P＞0.0 5).结论 利用RT-3DE能定量评价冠心病患者左前降支PCI术后左心室整体及局部收缩功能与同步性的改善情况.     

新型穿膜肽作为基因运输载体的实验研究

目的 人工设计合成穿膜肽新序列(CGRLWMRWYSPWARRYGC),并于体外考察其作为基因载体的潜力.方法 采用Na_芴甲氧羰基(Fmoc)法固相合成穿膜肽新序列,并用异硫氰酸荧光素(Frrc)标记N端.高效液相色谱及质谱仪检测其纯度及相对分子质量,流式细胞仪及共聚焦显微镜观察其穿膜能力,荧光显微镜和流式细胞仪...