Bcl-xL可能介导组织蛋白酶D相关的K562细胞凋亡

组织蛋白酶(cathepsin)D在氨基葡萄糖硫酸盐(ducosamine sulfate，GS)诱导的慢性髓系白血病k562细胞凋亡过程中为激活线粒体途径的可能的中介分子。为了探讨Bcl-xL在氨基葡萄糖硫酸盐诱导慢性髓系白血病K562细胞凋亡中的可能作用，在倒置显微镜下动态观察细胞生长变化，采用瑞氏-姬姆萨染色观察细胞加药前后的形态学改变，间接免疫荧光法观察GS诱导K562细胞凋亡过程中cathepsin D和细胞色素(cytoclnrome)C的转位情况，Western blot检测k562细胞凋亡过程中Bcl-xL、Bax、Bitl蛋白的表达变化。结果表明：5mmol／L氨基葡萄糖硫酸盐作用于k562细胞72小时后，细胞增殖受到明显抑制，胞浆出现空泡化；荧光显微镜显示catlaepsin D和cytoclarome C的荧光信号由颗粒状趋向弥散；Bcl—xL蛋白在GS加药组中表达减低，甚至消失，但在抑胃酶肽(pepstatin)A预处理后的加药组中表达没有明显改变，Bax和Bitl蛋白表达在凋亡前后没有明显变化。结论：Bcl-xL蛋白在GS诱导白血病K562细胞凋亡过程中可能介导catlaepsin D与线粒体途径之间的联系。     

miR-432-5p靶向调控DDX41对胃癌细胞增殖、转移和放疗敏感性的影响

目的 探讨微小RNA(miR)-432-5p对胃癌细胞增殖、转移和放疗敏感性的作用及在此过程中与DEAD-盒解旋酶41(DDX41)的靶向调控关系。方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同胃癌细胞中miR-432-5p、DDX41的表达,将HGC-27细胞进行转染并分为NC组(未转染质粒)、miR-NC组(转染miR-432-5p mimics阴性对照)、miR-432-5p组(转染miR-432-5p mimics)、miR-432-5p+pcDNA-NC组(转染miR-432-5p和pcDNA-DDX41阴性对照)、miR-432-5p+pcDNA-DDX41组(转染miR-432-5p mimics和pcDNA-DDX41)。48 h后采用qRT-PCR检测各组细胞中miR-432-5p、DDX41的表达,MTT检测各组细胞增殖活性,Transwell实验检测各组细胞的迁移能力,克隆形成实验和流式细胞术检测各组细胞的放疗敏感性,双荧光素酶报告基因实验验证miR-432-5p和DDX41的靶向关系,建立裸鼠移植瘤模型并检测肿瘤生长情况,蛋白质印迹法检测裸鼠肿瘤组织中D...     

采用OTW球囊经冠状静脉逆行灌注骨髓间充质干细胞的安全性和有效性

目的 探讨采用over-the-wire(OTW)球囊经冠状静脉逆行灌注骨髓间充质干细胞(MSCs)的安全性及有效性.方法 杂种犬12 只,体重(23.0±1.9)kg,采用开胸直视下完全结扎前降支(LAD)中段建立急性心梗模型.1 周后采用OTW 球囊将1×108 EGFP 标记的MSCs 灌注到与LAD 平行的前室间静脉(AIV)中段.所有实验动物分别在灌注后1 h(n=4)、14 d(n=4)、28 d(n=4)取材,比较LAD 结扎部位缺血心肌和LCX区域非缺血心肌组织中EGFP 阳性细胞的数量.结果 经冠状静脉逆行灌注成功率为100%(12/12),术中及术后未发生死亡、心包填塞及恶性心律失常.免疫荧光结果显示,所有时间点LAD 区域内EGFP 阳性细胞数均明显高于LCX 区域(均P<0.05),细胞在LAD 区域内的分布也更均匀.结论 采用OTW 球囊经冠状静脉逆行灌注MSCs 安全可行,靶向性高,细胞在缺血心肌内的分布也较为均匀、持久.     

肺癌细胞株抑癌基因启动子甲基化与转录的关系

目的 通过测定3例非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中7个抑癌基因启动子甲基化与mRNA转录之间的关系,探讨启动子甲基化在NSCLC发生中的作用.方法 应用甲基化特异性的多聚酶链反应(MSP)和RT-PCR分别检测甲基化状态和mRNA的转录水平.结果 肺癌细胞株A549发生甲基化的基因包括p16INK4a、RASSF1α、CDH1、MGMT和CDH13,而DAPK和RAR-β为去甲基化状态;SH-77发生甲基化的基因包括p16INK4a、RASSF1α、CDH1和MGMT,而DAPK、CDH13和RAR-β为去甲基化状态;SPC-A1发生甲基化的基因包括p16INK4a、CDH1、 CDH13和RAR-β,而RASSF1α、MGMT和DAPK为去甲基化状态.RASSF1α、MGMT和RAR-β等3个基因发生甲基化的细胞株其mRNA转录失活,而去甲基化状态的细胞株则存在转录活性.结论 NSCLC细胞株中抑癌基因经常发生启动子CpG岛的甲基化,并且甲基化可能与抑癌基因mRNA转录失活相关.     

地高辛对冠心病合并心房颤动患者远期临床结果的影响

目的:探讨地高辛用于冠心病合并心房颤动（房颤）患者的远期安全性。方法:中国心房颤动注册研究在北京市31家医院前瞻性纳入房颤患者25 512例,排除行射频消融术,最终纳入冠心病合并房颤患者1 810例。根据是否服用地高辛分为服用地高辛组和未用地高辛组,比较两组患者的远期临床结果,并通过Cox回归分析进行校正。主要终点事件...     

药物洗脱支架与晚期支架血栓形成

药物洗脱支架(DES)的临床应用是继单纯球囊扩张术、裸金属支架置入术后,冠心病介入治疗发展史上的第3个里程碑,它似乎成为了跨越血管再狭窄历史长河的诺亚方舟,使"告别再狭窄"的梦想得以实现.然而随着时间的推移,发现DES并不完美,尤其是晚期支架血栓形成(LST)问题成为目前人们关注的焦点.     

短效长方案中GnRH-a使用时长对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的探讨在短效长方案超促排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)周期中,促性腺激素释放激素激动剂(gonadrotropinreleasing hormone agonist,GnRH-a)使用时长对体外受精-胚胎移植(in vitrofertilization and embryo transfer, IVF-ET)助孕结局的影响。方法选取2015年1月至2018年1月山东中医药大学附属医院中西医结合生殖与遗传中心采用短效长方案行IVF/ICSI-ET助孕的776例患者作为研究对象。回顾性分析776例患者接受短效长方案降调节后超促排卵患者的临床资料,根据GnRH-a的使用时长为分组依据,分为三组:A组:GnRH-a的使用天数为14d;B组:GnRH-a的使用天数为15d～17d;C组:GnRH-a的使用天数≥18d。比较各组之间临床资料、治疗情况及临床结局。结果三组患者平均年龄、体质量指数(BMI)、基础内分泌、原发性不孕比例、助孕方式、促性腺激素(Gonadotropin, Gn)使用总量、Gn使用时间、添加尿促性素(HMG,珠海丽珠制药)总量组间比较差异无统计学意义(P0.05);三组患者降调节天数、Gn启动日及HCG日内分泌、HMG使用时间、降调节费用、总费用、获卵数、优质胚胎数组间比较差异有统计学意义(P0.05);三组患者2PN受精率、新鲜胚胎移植率、移植胚胎数、胚胎种植率、临床妊娠率、流产率、卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome, OHSS)发生率比较差异均无统计学意义。结论短效长方案降调节中,在达到降调节标准的前提下,GnRH-a使用14天,即可获得满意的IVF-ET妊娠结局,GnRH-a使用时间过长反而会影响获卵数及胚胎质量,增加医疗费用。