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2.
适合中药材DNA条形码分析的DNA提取方法的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 建立适合中药材DNA条形码分析的DNA提取方法.方法 以6种富含次生代谢物质的药用顽拗植物为材料,对7种DNA提取方法进行比较.结果 CTAB法3对中药材具有通用性,操作简便、快速,提取的DNA浓度和合格率比其他对照方法高,能满足DNA条形码PCR扩增的要求.该方法主要特点:(1)用3%的CTAB浓度代替常用的2%CTAB;(2)采用1%的PVP与0.2%β-巯基乙醇共同去除杂质和防止DNA降解;(3)采用10000 r/min离心15 min去除蛋白质等杂质.结论 CTAB法3是适合中药材DNA条形码研究的DNA提取方法. 相似文献
3.
5.
目的 探究腺苷脱氨酶(ADA)、胸水结合分歧杆菌脱氧核糖核酸(TB-DNA)、结核感染T细胞斑点实验(T-spot)或联合检测在结核性胸膜炎(TBP)早期诊断的临床意义。方法 回顾性选取上虞人民医院2016年6月—2018年6月疑似TBP患者76例作为研究对象,以经皮穿刺胸膜活检确诊为TBP患者48例作为TBP组,其余非TBP胸膜炎患者28例作为非TBP组,检测并比较两组胸腔积液中ADA,TB-DNA和外周血T-spot水平。并分析单独检测和3种方法平行联合诊断的诊断效能。结果 TBP组ADA水平高于非TBP组,TBP组的TB-DNA和T-spot阳性率也高于非TBP组(P?<0.05)。ADA和TB-DNA具有较高的特异性(85.71%和96.43%),T-spot的敏感性(81.25%)高于ADA和TB-DNA(P?<0.05),其特异性低于ADA和TB-DNA(71.42%)(P?<0.05)。ADA+T-spot和ADA+TB-DNA+T-spot的敏感性(87.50%和91.67%)和阴性预测值(77.78 % 和82.61%)均高于ADA+TB-DNA(68.75%和62.50%)(P?<0.05)。而ADA+TB-DNA的特异性(89.29%)高于ADA+T-spot和ADA+TB-DNA+T-spot(60.71%和67.86%)(P?<0.05)。TB-DNA+T-spot、ADA+T-spot及ADA+TB-DNA+T-spot平行联合检测的曲线下面积分别为0.666(95% CI:0.614,0.879)、0.849(95% CI:0.802,0.989)和0.917(95% CI:0.831,1.000)。结论 ADA、TB-DNA和T-spot 3种方法各有特点,T-spot敏感性较好,ADA和TB-DNA特异性高,3种方法平行联合检测可提高TBP诊断的敏感性。 相似文献
6.
目的探讨中成药芎芍胶囊对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生作用。方法采用开胸冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死模型,清洁级(或SPF级)SD大鼠32只(雄性)分为空白组、模型组、芎芍组、丹参组,每组8只,分别用生理盐水、芎芍胶囊、丹参粉末进行灌胃给药,连续给药。6周后采集数据分离样本,通过二维超声观察大鼠心功能指标,以及大鼠心肌组织中外源性血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达。结果芎芍组、丹参组与模型组比较,左心室收缩末期内径(LVESD)、舒张末期内径(LVEED)、左心室射血分数(LVEF)差异均有统计学意义(P<0.01),芎芍组、丹参组与AMI组比较,VEGF、bFGF差异均有统计学意义(P<0.01)。VEGF、bFGF与LVEF呈正相关(r值分别为0.813、0.589,P<0.01)。结论芎芍胶囊较丹参更具有促进心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生,提高心肌梗死大鼠心功能,保护心肌缺血性损伤的作用。 相似文献
7.
8.
目的运用彩色多普勒超声心动图分析慢性充血型心力衰竭(CHF)患者的心功能指标,包括左心收缩功能左室射血分数(LVEF)以及左室舒张功能[1].通过二尖瓣(MFP)、肺静脉血流频谱(PVFP)的特点,旨在为临床诊治慢性心衰提供一项客观、量化的指标.方法按照纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级为Ⅰ~Ⅲ级的慢性充血型心衰患者52例,和31名健康对照为研究对象,采用彩色多普勒超声技术检测LVEF、MFP、PVFP的各项参数.结果慢性充血型心衰的左室收缩功能(EF>45%)正常为42例,异常(EF<45%)的10例.左室舒张功能正常的2例,异常的50例.其中1.左室弛张功能异常23例,2>E/A>1,DT延长,PVs>>PVu;2.假性正常的18例,E/A=1~1.5,DT=160~200 msec,PVs<PVd,PVa>35 m/s、左房扩大、左室肥厚;3.限制性充盈11例,E/A≥2,DT<160 msec,PVs<<PVd,PVa>35 m/s.左房、左室肥大.与正常对照组一对比均具有显著差异性.结论CHF组患者的LVEF、MFP和PVFP参数均有不同程度的异常.左室舒张功能的异常早于左室收缩功能,二尖瓣及肺静脉血流频谱相互结合,才能更准确地判断舒张功能.若收缩功能异常时,左室舒张功能一般达到中、重度,心脏并伴有器质性改变,如左房大、左室大、室间隔增厚等等. 相似文献
9.
目的探讨中成药芎芍胶囊及丹参对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生的影响。方法采用开胸结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,清洁级(或SPF级)SD大鼠24只(雌雄各半)分为3组,即模型组、芎芍胶囊组、丹参组,每组8只,分别用生理盐水、芎芍胶囊、丹参按中剂量进行灌胃给药,连续给药。6周后采集血,分离样本,并按规定保存,用免疫组化评分法、血管新生相关因子检测法;检测各组缺血心肌内皮细胞生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、表皮细胞生长因子(EGF)、转化生长因子(TGF)、血小板源生长因子(PDGF)等促血管生成因子的表达。结果芎芍胶囊组对VEGF、EGF的促进作用较丹参组、对照组有统计学意义(P<0.05),其中芎芍胶囊组、丹参组对FGF的促进作用与对照组比较均有统计学意义(P<0.05),对照组对TGF、PDGF促进作用较芎芍胶囊组、丹参组有统计学意义(P<0.05)。结论中药具有促进心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生、提高心肌梗死大鼠心肌细胞VEGF、FGF、EGF蛋白的表达、具有保护心肌缺血性损伤的作用。 相似文献
10.
目的 通过对各主要影响因素的研究,建立适于何首乌扩增长度多态性(AFLP)反应体系及银染体系. 方法 采用改进的CTAB提取方法从何首乌的嫩叶中提取获得总DNA;从酶切DNA的量、时间等考察酶切体系,并设计正交实验进行预扩体系和选扩体系的优化. 结果 酶切体系DNA的适用量为400 ng,37 ℃酶切5 h;用较优的预扩增体系和选择性扩增得到的选择性扩增产物在6%变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳,得到清晰的指纹图谱. 结论 所建立的反应体系可有效地应用于何首乌的分类鉴定和道地性鉴定. 相似文献