MCAO大鼠梗死灶对侧皮层Nogo-A的动态变化及电针干预

目的观察脑缺血再灌注大鼠梗死灶对侧皮层不同时期轴突生长抑制因子Nogo-A的动态变化,并探讨电针对梗死灶对侧皮层Nogo-A的调节作用。方法采用改良Zea Longa法制备左侧大脑中动脉闭塞再灌注模型。采用免疫组织化学染色法及透射电镜技术观察电针对IR后1、7、28d各组大鼠脑梗死对侧皮层轴突再生抑制因子Nogo-A表达及神经元细胞形态、超微结构的影响。结果 (1)电针、假穴位、模型3组大鼠与假手术组大鼠相比,在IR后1d、7d梗死对侧皮层Nogo-A的表达均升高(P<0.05),7d最明显,第28天下降至基础水平(P>0.05);电针组大鼠IR后1d、7d脑梗死对侧皮层Nogo-A的表达均低于同期模型组和假穴位组,差异有统计学意义(P<0.05),但假穴位组与模型组同期对比差异无统计学意义(P>0.05)。(2)电针、假穴位、模型3组各时间点大鼠脑梗死对侧皮层出现神经元细胞胞体肿胀、细胞器水肿、核染色质轻度溶解、毛细血管内皮细胞肿胀、管腔狭窄等轻度病理改变,以缺血再灌注后第7天最明显,28d明显减轻。上述病理改变均较同期脑缺血区病变程度明显减轻,且不足以引起支配侧肢体神经功能缺失。电针组大鼠脑梗死对侧皮层神经元细胞、超微结构的改变均较同期模型组、假穴位组减轻。结论电针治疗脑梗死的有效机制可能与其减轻脑细胞超微结构的损害、下调中枢神经轴突生长抑制因子Nogo-A的表达、诱导神经轴突再生、减轻脑梗死后的远隔损害等密切相关。     

环维黄杨星D对高血压大鼠脑缺血神经胶质原纤维酸性蛋白与神经粘蛋白表达的影响

目的 观察中药单体环维黄杨星D（CVB-D）对易卒中型肾血管性高血压大鼠（RHRSP）脑缺血再灌注不同时间神经胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）与神经粘蛋白（neurocan）表达的影响。方法 100只SD大鼠随机分成随机分为空白组10只（不作任何处理的RHRSP）、假手术组10只（仅作手术创伤分离动脉，不结扎动脉）、CVB-D治疗组40只、生理盐水对照组40只。采用环形银夹使SD大鼠的双侧肾动脉狭窄，制成RHRSP，再用线栓法制成一侧大脑中动脉闭塞（MCAO）模型。用免疫组化等方法观察CVB-D对脑缺血2h后再灌注1、7、14、30d不同时间点大鼠脑组织GFAP与neurocan表达。结果 缺血2h再灌注后．治疗组脑缺血区周围GFAP阳性表达细胞呈现先递增后减少的趋势。与对照组相比，除第1天外，第7、14、30天差异都有显著性意义（P〈0．05）。Neurocan在空白组、假手术组未见阳性细胞，缺血再灌注1d对照组出现neurocan阳性表达细胞，并且呈先递增后减少趋势。治疗组neurocan阳性表达细胞与对照组相比．除第1天外，第7、14、30天差异都有显著性意义（P〈0．05）。结论 CVB-D有促进RHRSP脑缺血损伤区神经功能的修复作用，可能与其下调神经抑制因子GFAP、neurocan的表达等机制密切相关。     

环维黄杨星D对高血压大鼠脑缺血GAP-43 mRNA表达与细胞损伤的影响

目的观察中药单体环维黄杨星D(CVB-D)对易卒中型肾血管性高血压大鼠(RHRSP)脑缺血再灌注不同时间脑组织生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA表达与细胞超微结构损伤的影响。方法采用环形银夹使SD大鼠的双侧肾动脉狭窄,制成RHRSP,再用线栓法制成一侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。用原位杂交等方法观察CVB-D对脑缺血2h后复流1d、7d、14d、30d不同时间点大鼠脑组织GAP-43mRNA表达、水含量、梗死面积百分率、行为学评分及细胞超微结构的干预作用。结果脑缺血2h复流后1d缺血区周围及海马可见GAP-43mRNA表达,7d明显增多至高峰,14d开始下降,30d时则明显减少,CVB-D治疗组在上述区域各时间点较对照组显著增加。脑缺血再灌注7d后,治疗组较对照组大鼠脑水含量及梗死面积显著降低,受损脑组织神经元和血管壁的超微结构亦明显改善。结论CVB-D对RHRSP缺血性脑细胞损伤有一定保护作用,其促进轴突的再生可能与上调脑组织GAP-43mRNA表达有关。     

血管内皮生长因子对缺血性脑损伤的保护作用

血管内皮生长因子(VEGF)可促进内皮细胞增殖、加速新生血管形成，在缺血性脑损伤的病理生理学过程发挥重要的保护作用。最近的研究表明，VEGF除对内皮细胞有保护作用外，可能对神经元也有直接的保护作用。     

环维黄杨星D对高血压大鼠脑缺血再灌注突触生长素表达的影响

目的观察单体环维黄杨星D(CVBD)对易脑卒中型肾血管性高血压大鼠(RHRSP)脑缺血再灌注突触生长素(SYN)表达的影响。方法选择SD大鼠100只,用环形银夹使大鼠双侧肾动脉狭窄,制成RHRSP,随机分为空白组(10只)、假手术组(10只)、治疗组(40只)、对照组(40只)。后2组再用线栓法制成一侧大脑中动脉闭塞模型。免疫组织化学法、透射电镜等观察脑缺血2 h后再灌注第1、7、14、30天脑组织SYN表达。结果与空白组比较,假手术组大鼠SYN阳性表达升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,对照组第1天SYN阳性表达明显升高,第7天达高峰,第14天开始下降(P<0.05,P<0.01),第30天则明显下降(P>0.05)。与对照组相同时间点比较,治疗组SYN阳性表达均升高(P<0.05,P<0.01)。结论CVBD促进RHRSP脑缺血损伤区神经功能的修复作用,可能与其上调脑组织SYN的表达,减轻突触超微结构损伤等机制密切相关。     

电针对轴突生长与抑制因子的干预

目的:电针抗脑缺血和恢复神经功能的作用勿庸置疑,从国内外电针对脑缺血损伤后神经元轴突干预作用的研究发展现状出发,就电针对轴突生长与抑制因子干预作用等方面的进展作一综述。资料来源:应用计算机检索Medline1995-01/2006-04的与脑卒中早期神经再生相关文献,检索词“electricneedle,axongrowthandinhibitivefactor”,限定文献语种为英文;同时计算机检索CNKI数据库1999-01/2005-04期间的与电针对轴突生长与抑制因子影响的相关文献,检索词“电针,轴突生长与抑制因子”,限定文献语种为中文。资料选择:从资料中选取包括治疗组和对照组的文献,然后选择是随机临床试验的研究。纳入标准:①脑卒中早期康复治疗的随机对照临床试验。②治疗组为早期康复治疗组。③对照组为不进行早期康复治疗组。④患者年龄<80岁。⑤患者均为首次卒中。排除标准:综述类文献、没有对照组的文献。资料提炼:共收集到54篇关于脑卒中早期神经再生和电针对轴突生长与抑制因子影响的文献,29篇为随机临床试验纳入综述。排除的25篇中11篇是重复的同一研究,14篇为Meta分析研究。共32个试验包括3472例患者。资料综合:轴突生长与抑制因子在中枢神经系统神经再生的突出作用是调控轴突导向、引导轴突生长,协助构建精确的神经网络形成,在脑缺血损伤的病理生理过程发挥重要的双重功能。①脑缺血与神经再生:神经再生可以看成是成年脑内神经发育过程的重新启动,是特定条件下神经元突起的再生。轴突生长抑制性蛋白在正常发育过程中主要参与调控轴突导向、引导轴突生长,协助构建精确的神经网络。在神经损伤时表达则阻止成年动物神经再生的活性和轴突再生。轴突生长除受生长抑制蛋白调控外,还受轴突生长因子的作用,神经生长相关蛋白是其中的代表。②电针与轴突生长相关因子:针刺可增加碱性成纤维细胞生长因子、胶质细胞源性神经营养因子的表达,促进短暂性大脑中动脉闭塞大鼠血管内皮生长因子星形胶质细胞的表达和梗塞大脑血管的形成,增强急性脑缺血大鼠梗死灶周围血管内皮生长因子、Flt-1的表达。结论:神经再生是特定条件下神经元突起的再生,与生长抑制蛋白的调控和轴突生长因子的作用密切相关,电针通过调控轴突生长因子而促进中枢神经功能恢复。     

脑微血管内皮细胞缺氧模型转化生长因子β1表达与脑溢安的干预

背景:临床及动物实验证实脑溢安能促进脑出血急性期血肿吸收及神经功能恢复,提高生活质量。目的:观察脑溢安血清对体外缺氧培养的大鼠脑微血管内皮细胞转化生长因子β1mRNA表达的影响。方法:用分离培养的大鼠脑微血管内皮细胞移入厌氧培养箱培养18h建立缺氧损伤模型,并随机分为正常组、模型组、正常血清组及含脑溢安血清组。正常组为同一批正常培养的脑微血管内皮细胞;模型组将正常培养的细胞放入厌氧培养箱内培养18h;正常血清对照组细胞在培养液中加5%正常血清后,放入厌氧培养箱中培养18h;脑溢安血清组细胞在培养液中加5%脑溢安血清后,放入厌氧培养箱内培养18h。结果与结论:缺氧培养使脑微血管内皮细胞存活数量减少,其表达的转化生长因子β1mRNA增强,而脑溢安血清能明显增加脑微血管内皮细胞存活数量,降低转化生长因子β1mRNA表达水平(P<0.05)。说明脑溢安血清下调转化生长因子β1mRNA的表达可能是其抑制脑微血管内皮细胞的凋亡对缺氧损伤脑微血管内皮细胞的保护作用机制之一。     

急性缺血性中风中经络构音障碍患者的证候特点及Frenchay评定分析

目的观察急性缺血性中风中经络构音障碍患者证候分布、Frenchay评定及其神经功能缺损程度,探讨急性缺血性中风中经络构音障碍的临床特点。方法将120例急性缺血性中风中经络构音障碍患者辨证分为5个组:肝阳暴亢、风痰阻络、痰热腑实、气虚血瘀、阴虚风动,同时根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)进行评分与Frenchay构音障碍评定。结果急性缺血性中风中经络构音障碍患者风痰阻络占30.0%、气虚血瘀占25.0%,两者占的比例最多,其次为阴虚风动(16.7%)、肝阳暴亢(15.0%)和痰热腑实(13.3%);风痰阻络、气虚血瘀的轻度、中度、重度以上构音障碍的比例分别为25.0%、33.3%、41.7%和40.0%、33.3%、36.7%,与肝阳暴亢(50.0%、38.9%、11.1%)、痰热腑实(50.0%、37.5%、12.5%)、阴虚风动(60.0%、35.0%、5.0%)的分布频率明显不同,差异有显著性意义(P<0.005);痰热腑实型的神经功能缺损明显重于其余各组,差异亦有显著性意义(P<0.05)。结论急性缺血性中风中经络构音障碍患者以风痰阻络、气虚血瘀证型为主,而且两者出现中、重度构音障碍较多;而痰热腑实型以神经功能缺损最严重。     

急性缺血性中风中经络构音障碍患者的证候特点及Frenchay评定分析

目的观察急性缺血性中风中经络构音障碍患者证候分布、Frenchay评定及其神经功能缺损程度,探讨急性缺血性中风中经络构音障碍的临床特点。方法将120例急性缺血性中风中经络构音障碍患者辨证分为5个组：肝阳暴亢、风痰阻络、痰热腑实、气虚血瘀、阴虚风动,同时根据美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）进行评分与Frenchay构音障碍评定。结果急性缺血性中风中经络构音障碍患者风痰阻络占30.0%、气虚血瘀占25.0%,两者占的比例最多,其次为阴虚风动（16.7%）、肝阳暴亢（15.0%）和痰热腑实（13.3%）;风痰阻络、气虚血瘀的轻度、中度、重度以上构音障碍的比例分别为25.0%、33.3%、41.7%和40.0%、33.3%、36.7%,与肝阳暴亢（50.0%、38.9%、11.1%）、痰热腑实（50.0%、37.5%、12.5%）、阴虚风动（60.0%、35.0%、5.0%）的分布频率明显不同,差异有显著性意义（P〈0.005）;痰热腑实型的神经功能缺损明显重于其余各组,差异亦有显著性意义（P〈0.05）。结论急性缺血性中风中经络构音障碍患者以风痰阻络、气虚血瘀证型为主,而且两者出现中、重度构音障碍较多;而痰热腑实型以神经功能缺损最严重。     

脑溢安对缺氧大鼠脑微血管内皮细胞VEGF蛋白表达的影响

目的:观察脑溢安血清对体外缺氧培养的大鼠脑微血管内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响。方法:大鼠用脑溢安浸膏连续灌胃3d后,心脏内采血分离出血清;用新生7d SD大鼠脑内分离培养的微血管内皮细胞（RCMEC）移入厌氧培养箱造成缺氧模型;MTT法测定细胞活性;免疫细胞化学及Werstern blotting研究脑微血管内皮细胞VEGF蛋白表达。结果:缺氧18h脑溢安组OD值较对照组增高（P<0.05）。缺氧损伤的脑微血管内皮细胞内VEGF蛋白表达增强,脑溢安血清组VEGF蛋白的表达水平高于对照组(P<0.01)。结论:缺氧可诱导脑微血管内皮细胞VEGF蛋白的表达;脑溢安可以上调VEGF蛋白的表达,这可能是脑溢安对缺氧的脑微血管内皮细胞的保护作用机制之一。