羟基红花黄色素A在Caco-2细胞单层模型的转运研究

目的 研究丹红注射液中主要成分羟基红花黄色素A（HSYA）在Caco-2细胞单层模型的转运特征。方法 MTT法确定HSYA对Caco-2细胞单层模型作用的安全浓度范围;采用Caco-2细胞单层模型考察转运时间、药物质量浓度、温度、pH值以及P-糖蛋白（P-gp）抑制剂维拉帕米和能量代谢抑制剂叠氮化钠对HSYA转运的影响;RT-PCR法检测HSYA及维拉帕米对多药耐药基因（MDR1）表达的影响。结果 从顶侧（AP）到底侧（BL）（AP→BL）,HSYA的表观渗透系数（P_app）在2×10^-6～5×10^{-6 cm/s},表明其吸收性中等;HSYA的转运与其质量浓度和时间呈正相关,37℃下HSYA的P_app与4、25℃下的P_app有显著差异（P<0.01）,pH值为9.0时的P_app与pH值为5.0、7.4时的P_app值也有明显差异（P<0.01）。维拉帕米能明显下调MDR1基因的表达,但HSYA的转运不受维拉帕米的影响;叠氮化钠影响细胞能量代谢,但HSYA的转运不受能量代谢异常的影响,且P_app(BL→AP)/P_app(AP→BL)在1～1.5,HSYA的吸收过程基本符合被动扩散。结论 HSYA在Caco-2细胞模型的转运方式为被动扩散,且不受P-gp和能量代谢的影响,低温和碱性环境下不利于HSYA的吸收。     

试论《内经》对温病养阴法形成的影响

养阴法是运用生津养阴之品以滋补阴液的一种方法,属“八法”中的补法范畴。温热之邪最易耗伤阴液,而病至后期,因肝肾之阴受耗而虚象更为严重。耗伤阴液是温病的主要病理变化之一,阴液的耗伤程度,常关系到疾病的发生发展、病情的轻重及其预后等,故温病养阴法在温病学说中占有重要地位。尽管养阴法经历代医家的临床实践发展到明、清时代     

抗流感病毒中药研究概况

从中医基础理论出发，结合现代医学技术，对近年来国内外抗流感病毒中药的药理作用研究进展综述，并对其研究现状进行了分析。     

丹参-川芎有效成分配伍对氧糖剥夺海马神经元细胞保护作用研究

观察丹参-川芎有效成分(丹参素、原儿茶醛、川芎嗪、阿魏酸)配伍对体外原代培养的海马神经元细胞缺糖缺氧(氧糖剥夺)损伤的保护作用,并优选较佳组合。方法原代培养乳鼠海马神经元细胞,免疫组化法进行神经元特异性烯醇化酶(NSE)鉴定,并建立海马神经元细胞氧糖剥夺模型。MTT法确定丹参素、原儿茶醛、川芎嗪、阿魏酸及尼莫地平的非细胞毒性剂量范围,以L9(34)正交表设计安排成分配伍给药。将培养的细胞随机分为12组:对照组、模型组、尼莫地平阳性对照组及正交配伍1～9组。采用比色法、WST-1法、硫代巴比妥酸(TBA)法分别检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平,酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6水平变化,Hoechst33258荧光染色法观察海马神经元细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞早期凋亡率。采用极差分析法分析正交试验结果。结果药物正交配伍组合均可显著改善缺氧海马神经元细胞的形态,显著减弱LDH活力,增强SOD的活性以及降低MDA的水平,显著抑制细胞TNF-α的释放,降低IL-1β和IL-6的水平,明显减少了细胞的凋亡。丹参-川芎有效成分对LDH活力的影响大小依次为丹参素川芎嗪原儿茶醛阿魏酸,最佳配伍组合为丹参素(120μg/m L)、原儿茶醛(120μg/m L)、川芎嗪(80μg/m L)、阿魏酸(20μg/m L)。对SOD活性的影响主次因素依次为阿魏酸川芎嗪丹参素原儿茶醛,最佳配伍组合为丹参素(120μg/m L)、原儿茶醛(120μg/m L)、川芎嗪(80μg/m L)、阿魏酸(40μg/m L)。对MDA水平的影响主次因素依次为丹参素原儿茶醛阿魏酸川芎嗪,最佳配伍组合为丹参素(60μg/m L)、原儿茶醛(60μg/mL)、川芎嗪(80μg/m L)、阿魏酸(20μg/m L)。对TNF-α水平影响的主次因素依次为川芎嗪原儿茶醛丹参素阿魏酸,最佳配伍组合为丹参素(60μg/m L)、原儿茶醛(60μg/m L)、川芎嗪(40μg/m L)、阿魏酸(10μg/m L)。影响IL-1β水平的主次因素依次为川芎嗪阿魏酸丹参素原儿茶醛,最佳配伍组合为丹参素(30μg/m L)、原儿茶醛(30μg/m L)、川芎嗪(80μg/m L)、阿魏酸(20μg/m L)。影响IL-6水平的主次因素依次为原儿茶醛川芎嗪阿魏酸丹参素,最佳配伍组合为丹参素(120μg/m L)、原儿茶醛(120μg/m L)、川芎嗪(80μg/m L)、阿魏酸(10μg/m L)。影响细胞早期凋亡率主次因素为阿魏酸原儿茶醛川芎嗪丹参素,最佳配伍组合为丹参素(60μg/m L)、原儿茶醛(30μg/m L)、川芎嗪(20μg/m L)、阿魏酸(40μg/m L)。结论丹参-川芎有效成分配伍对氧糖剥夺海马神经元细胞的保护作用机制可能与减轻氧化应激损伤、减轻炎症损伤和抑制细胞凋亡有关,可参考实验结果为临床不同病程需要更改组方配比,指导临床用药。     

来曲唑治疗复治性乳腺癌17例临床研究

目的 研究来曲唑治疗复治性乳癌的临床疗效和不良反应。方法 17例绝经后乳腺癌口服来曲唑每日1次，每次2.5mg，共服8周。疗前2周内及治疗8周后检测血中雌二醇（E2）水平，同时评价疗效和不良反应。结果 完全缓解（CR）2例，部分缓解（PR）3例，缓解率29.4%，主要不良反应有恶心、乏力、皮肤潮红、一般较轻、可耐受。结论 来曲唑对复治性乳癌疗效肯定，不良反应轻微，是乳癌内分泌治疗中一种有价值的药物。     

基于脑心同治理论的中药复方防治心脑血管病应用研究

心脑血管病是一类严重威胁人类尤其是老年人健康的疾病,有高死亡率、高致死率、高致残率三大特征。中药复方防治心脑血管疾病有多组分、多靶点、多途径等特殊优越性,脑心同治理论具有整体观念和辨证论治的特征。结合国内外相关文献以及本课题组的研究成果,通过药方组成、中药药效物质基础、药理作用和临床应用对基于脑心同治理论的中药复方防治心脑血管疾病的研究进行系统综述,阐明中药复方通过其药效物质基础发挥药理作用的同时,结合活血化瘀、养阴益气、通脉舒络等中医理论来防治心脑血管病。     

补阳还五汤黄酮类有效成分在Caco-2细胞单层模型的转运特征及对CYP450酶活性的影响

目的研究补阳还五汤3个黄酮类有效成分(羟基红花黄色素A、毛蕊异黄酮、芒柄花素)在Caco-2细胞单层模型中的转运特征及其在大鼠肝微粒体中对CYP450酶亚型活性的影响。方法 MTT法研究药物在Caco-2细胞单层模型的安全浓度范围,以Caco-2细胞单层模型研究黄酮类有效成分的双向转运机制,以表观渗透系数(Papp)为检测指标,考察时间、浓度以及P-gp抑制剂维拉帕米对转运的影响,利用Cocktail探针法研究药物对CYP450亚型的体外抑制作用。结果从顶侧(apical,AP)到底外侧(basolateral,BL)(AP→BL),芒柄花素、毛蕊异黄酮的Papp>10-6 cm/s,表明其吸收性良好,羟基红花黄色素A的Papp为10-6cm/s,表明其吸收性一般;且三者的转运量随浓度升高和时间延长而显著升高,BL→AP的转运量与AP→BL的转运量的比值小于1.5,其中芒柄花素、毛蕊异黄酮的转运都受到P-gp外排蛋白的外排作用;补阳还五汤黄酮类有效成分明显降低了CYP2E1、CYP1A2酶探针底物的代谢量(P<0.05)。结论 3种黄酮类有效成分在Caco-2细胞模型的转运方式均为被动转运,毛蕊异黄酮与芒柄花素明显受到P-gp的外排作用,补阳还五汤黄酮类有效成分可以增加主要通过CYP2E1、CYP1A2酶代谢的药物浓度。     

丹参素对高脂血症大鼠脂代谢调节机制研究

目的:探讨丹参素对高脂血症大鼠脂代谢的影响。方法:选用清洁级雄性SD大鼠60只,随机选取12只为基础对照组,饲以普通饲料,其余大鼠饲以高脂饲料,造模成功后随机分为高脂对照组和注射低、中、高(10,20,40 mg·kg-1·d-1)剂量丹参素溶液(溶解于生理盐水)的试验组,2个对照组腹腔注射等体积生理盐水,每天腹腔注射1次,连续30 d。检测血清TG,TC,HDL-C及LDL-C含量及肝脏ACC1,FAS,HMGR,CPT-I的mRNA表达水平。结果:注射丹参素后,大鼠血清中TG,TC,LDL-C含量降低,肝脏FAS和HMGR的mRNA表达水平显著降低。结论:丹参素通过降低TC含量,抑制LDL-C水平,及时清扫多余的胆固醇,有效调节高脂血症大鼠血脂水平;通过降低FAS mRNA表达减少脂肪酸的合成,抑制HMGR mRNA表达来减少内源性胆固醇的合成。     

MAP30全长基因的克隆及在巴斯德毕赤酵母中的高效表达研究

目的研究毕赤酵母中高效表达全长MAP30蛋白及其生物活性。方法根据GeneBank公布的MAP30全序列设计特异性引物,以苦瓜基因组为模板,PCR扩增MAP30全长基因,将该基因插入pPIC9k载体中,经SacI酶切线性化后,电转化至GS115细胞,再通过G418筛选,最终获得了高拷贝重组GS115菌株。重组菌株在甲醇诱导下,SDS-PAGE分析表达的特异性条带,运用Pharmacia VDS图像分析软件进行条带密度扫描,得到各条带的扫描曲线图,计算出同一泳道目的蛋白条带峰面积相对于整个曲线所占的百分比,即蛋白纯度,并根据蛋白纯度和上清蛋白总量(Lowry法)计算出发酵上清液中目标蛋白含量。纯化时首先用75%的饱和硫酸铵盐析,然后用Phenyl Sepharose6FF疏水层析,再用CM-sepharoseFF阳离子层析。采用MTT法检测MAP30蛋白对人胃癌细胞株SGC7901的抑制作用。为验证重组MAP30蛋白结构的正确性,采用EDMAN降解法分析N末端8个氨基酸。结果重组菌株在甲醇诱导下,SDS-PAGE分析可见相对分子质量32000的特异性条带,重组蛋白占上清液总蛋白的67%;发酵液经硫酸铵沉淀、疏水和阳离子交换层析后,目的蛋白总回收率为32.4%。MTT法检测结果表明,重组MAP30蛋白具有明显的抑制人胃癌细胞SGC7901的活性,IC50为30μg/ml。N端的8个氨基酸测序进一步证实与理论一致。结论重组MAP30蛋白在毕赤酵母中正确表达,表达产物具有抑制肿瘤细胞的活性。     

高校教师吸烟行为调查

吸烟已成为我国较严重的社会和公共卫生问题。我国12亿人口中主动吸烟者达3亿多,被动吸烟者达4亿多[1]。高校教师作为从事高等教育的特殊群体,肩负着教书育人的重任。高校师教的吸烟行为对其他人群起着潜移默化的示范和引导作用。因此,研究高校教师的吸烟行为有着深远意义。本文对高校教师吸烟行为的心理因素进行调查分析,为高校教师的戒烟提出可鉴措施。对象与方法对象　从哈市14所高校中依据理工类、医类、师范类,各随机选定一个调查单位(分别是哈工大、哈医大和哈师大);再随机确定调查科室,以其在岗教师为调查对象(不含教辅、实验技术人…