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目的:克隆和表达人源化小鼠抗人交联纤维蛋白单链抗体。方法:首先依照人源化单链抗体的蛋白序列设计并优化人源化单链抗体的核苷酸序列,然后在化学合成 14 条人源化单链抗体基因片段的基础上,利用二次 P C R 方法构建完整的人源化单链抗体基因,并把构建的全长人源化单链抗体基因直接克隆到表达载体上,利用表达筛选和测序验证相结合的方法挑选正确的基因,并在大肠杆菌中进行了人源化单链抗体基因的 I P T G 诱导表达。结果:构建并挑选到序列正确的全长人源化单链抗体基因,而且在大肠杆菌中实现了目的基因的高表达。结论:基因的部分化学合成, P C R构建及表达筛选是克隆基因的一种有效方法。 相似文献
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在人类的一些肿瘤中已发现存在Gsa基因突变。本研究室在白血病细胞系的研究中发现了Gsa基因的3个缺失突变体以及野生型的Gsa(分别命名为GsaL-1,500bp;GsaL-2,300bp,GsaL-3,200bp和Gsa-4,1200bp),并已在一些急性白血病患中检测到,为进一步研究这些缺失体的结构、功能和生物学意义,作将克隆了GsaL-1,GsaL-2和Gsa-4基因的质粒分别转化到大肠杆菌DH5a中,提取DNA,采用特异引物进行PCR扩增,获得相应的目的基因,分别将其克隆支pET22b(+)表达载体上,丙转化大肠杆菌进行表达。经培养,取菌体行SDS-PAGE电泳分析,研究结果:3个基因都有相应分子量的蛋白表达,且均以包涵体形式存在。这表明构建的这3个基因确具完整的基因结构,及应的蛋白表达,本研究为进一 相似文献
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淋巴结转移性多形性腺样无色素性恶性黑色素瘤一例 总被引:2,自引:0,他引:2
患者女,8岁。发现左腋窝肿物10个多月,于1991年7月15日入院。体检:神清,慢性病容,轻度贫血。左腋下触及6cm×5cm肿物,质实。临床诊断:左腋下囊肿。病理检查:4 5cm×4 0cm×3 2cm带少许皮肤结节状肿物一个,包膜完整,切面灰白略灰红,质中。镜检:肿物为淋巴结,被膜下见少量残存淋巴滤泡。淋巴结结构已破坏,由大量胞质丰富、嗜酸性大细胞所组成的病变取代。大细胞在多数区呈弥漫性排列,背景为散在的小淋巴细胞,网状纤维弥漫性增多、不成巢。在少数区大细胞形成不粘聚的细胞团如腺泡样及腺样,在个别区排列成条索状。大细胞异型性十分明显:有各… 相似文献
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小儿恶性淋巴瘤与EB病毒的相关性 总被引:1,自引:0,他引:1
1 材料和方法2 3例标本均取自 1978~ 1998年间外检标本 ,全部标本均常规制成HE切片并行免疫组化标记分型。EBV和 p5 3检测为用超敏S P试剂盒、鼠抗EBV(LMP)和突变型 p5 3蛋白单克隆抗体 ,同时取 15例 14岁及其以下病理诊断为良性淋巴组织增生的淋巴结行EBV和 p5 3蛋白检测作为对照 ,上述免疫组化试剂均购自福州迈新公司。2 结果2 .1 一般材料 淋巴瘤组 2 3例 ,男∶女 16∶7,年龄 3~ 13岁 ;EBV阳性 15例 ,男∶女 11∶4,年龄 6 5± 2 6 (岁 ) ,EBV阴性 8例 ,男∶女 5∶3,年龄 9 5± 3 31(岁 ) ,两组性别比无… 相似文献
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特异性鼠抗人交联纤维蛋白ScFv基因的克隆、表达及ScFv┐Scu┐PA┐32K融合蛋白的构建黄君健黄翠芬俞炜源军事医学科学院生物工程研究所北京100850为了获得具有导向作用的特异性抗体,采用目前最新的噬菌体抗体库技术,制备特异性抗人交联纤维蛋白单... 相似文献
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婴幼儿胃癌尸检1例黄君健,黄春鑫患者男性,1岁2个月。因进行性四肢无力伴大小便失禁9d入院。既往无"结核""外伤"史。查体:神志清,发育营养中等,贫血貌。隆孔大小正常,前囟已闭,双肺呼吸音粗糙,心脏(-)。腹软,肝脾未触及,腹部未触及肿块,脊柱无畸形... 相似文献
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肽丁胺与中药结合治疗水痘110例龙岩卫生学校石育钦龙岩第一医院黄君健水痘是儿童高度传染性的疾病,尤其是春季,常见在儿童中引起传染性皮肤病,其治疗方药虽多,但主要是对症止痒和预防感染,且短期内治愈者不多,我科用上海市第九制药厂出品的肽丁胺霜(3%)结合... 相似文献