汉赛巴通体重组外膜蛋白Pap31的研制和抗原性分析

目的克隆并表达汉赛巴通体Pap31外膜蛋白基因,并对其抗原性进行初步分析。方法采用PCR从汉赛巴通体基因组DNA扩增外膜蛋白基因pap31,将目的基因片段插入原核表达质粒pQE30,构建重组质粒pQE30/pap31;将构建的重组质粒转化大肠杆菌M15并诱导目的基因表达,以SDS-PAGE电泳以及免疫印迹法分析表达目的蛋白。结果在SDS-PAGE电泳分析发现pQE30/pap31转化菌高效表达一重组蛋白,经免疫印迹分析发现该蛋白与汉赛巴通体免疫血清发生强烈反应;经间接免疫荧光分析发现该重组蛋白免疫血清能特异识别汉赛巴通体。结论汉赛巴通体外膜蛋白基因pap31在大肠杆菌高效表达,表达的重组Pap31外膜蛋白具有良好的抗原性。     

不同炮制方法对决明子抗菌作用的影响

对决明子古今常用炮制品抗菌作用进行研究.结果表明醋炙能增强决明子对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌的抗菌作用,酒炙能增强决明子对大肠杆菌、福氏痢疾杆菌的抗菌作用.     

不同浓度GDNF诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化研究

目的观察不同浓度胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对神经干细胞(NSCs)向多巴胺(DA)能神经元分化的影响。方法取新生鼠脑组织体外分离培养NSCs,第2代NSCs诱导培养基中分别加入0、5、10、20 ng/mL GDNF进行诱导。用逆转录-聚合酶链反应检测诱导后细胞酪氨酸羟化酶(TH)mRNA的表达,免疫细胞化学染色鉴定NSCs,检测NSCs向DA能神经元分化率。结果各诱导组均表达TH mRNA。神经球具有自我更新和表达巢蛋白的能力,诱导分化后的细胞能表达神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞特异性抗原。与空白对照组比较,GDNF诱导组TH阳性细胞率均明显升高(P<0.05);且10、20ng/mL GDNF诱导组升高幅度明显高于5 ng/mL GDNF诱导组(P<0.05),10、20 ng/mL GDNF诱导组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论从新生鼠脑组织分离出NSCs。不同浓度的GDNF均能促进NSCs向DA能神经元分化,GDNF浓度从10ng/mL提高到20 ng/mL时TH阳性细胞率无明显变化。     

耐药白色念珠菌弥散性感染小鼠模型的建立

目的为新药筛选建立耐药白色念珠菌弥散性感染小鼠模型。方法对免疫抑制ICR小鼠静脉注射临床耐氟康唑白色念珠菌CaR,通过临床症状、生存情况、组织载菌量、组织病理、细胞因子分析以及药物治疗等方法对模型评价。结果 CaR感染小鼠在接种后第1天出现死亡,相比临床药敏菌株Ca S感染组,16 d观察期内动物死亡率无显著性差异(CaR,90.7%;Ca S,86.2%,P=0.158),但观察早期CaR组死亡比Ca S组快。感染第4天,不同组织均可检测到念珠菌,并发现与Ca S组相比,肾、脑组织载菌量具有显著性差异。真菌引起的典型肉芽肿样是肾、脑、心的主要组织病理学特征。利用流式细胞仪检测肾组织细胞因子,IL-1α、IL-6、TNF-α、IFN-γ等细胞因子变化显著,与Ca S组比较,IL-1α和IFN-γ显著升高,TNF-α显著下降。CaR和Ca S感染小鼠给予10 mg/kg氟康唑治疗,死亡率分别为83.3%、37.5%,具有显著性差异。结论本研究成功建立了耐药白色念珠菌弥散性感染小鼠模型,有望成为抗感染新药研发的重要工具。     

南京市大气微生物污染情况调查

为了研究城市生物气溶胶的污染及其传播规律,于1998年春夏两季在南京大学校园的气象塔进行微生物监测.24小时内不同时间和不同高度的大气细菌和真菌浓度采样测定研究结果表明,夏季无论是细菌还是真菌平均浓度都高于春季;不论是春季还是夏季的细菌和真菌平均浓度都随高度的增加而减少;一天内4个时间的细菌、真菌样品形态特征分类.结果表明,两个季节大气细菌以革兰氏阳性菌占绝对优势,各种形态的细菌中,球菌占首位;大气真菌共鉴定出五属一科,春夏两季均以青霉属占首位.     

PCR和DNA斑点杂交分析贝氏柯克斯体的核酸标识

目的确认贝氏柯克斯体特异的核酸标识。方法用PCR法特异扩增贝氏柯克斯体24kDa,27kDa、30kDa、34kDa、热休克蛋白B等表面蛋白基因,以及23SrRNA插入序列和16S23SrRNA间区序列等基因片段,从DNA电泳凝胶中回收纯化PCR扩增的目的DNA片段,用地高辛随机引物标记法标记目的DNA片段作探针,行DNA斑点杂交。结果PCR扩得的7个贝氏柯克斯体DNA片段探针只能与贝氏柯克斯体基因组DNA杂交而不能与其他种属的立克次体的基因组杂交,每种探针检测同源目的基因的灵敏度可达到10pg。结论这7种贝氏柯克斯体DNA片段是贝氏柯克斯体特异的DNA片段,可作为贝氏柯克斯体的核酸标识,基于它们的序列设计的引物和探针具有极高的贝氏柯克斯体种特异性。     

舒肝解郁胶囊与黛力新治疗脑卒中后抑郁的对照研究

目的:评价舒肝解郁胶囊治疗脑卒中后抑郁(PSD)的疗效和安全性。方法:将60例PSD患者随机分为舒肝解郁组和黛力新组,在治疗前和治疗后2、4、6周分别用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、神经功能缺损评分表(NIHSS)评定其疗效,并观察两者的副作用。以症状量表(TESS)评定其不良反应。结果:与黛力新组相比,舒肝解郁组HAMD评分和NIHSS评分的减分率均较高(P<0.01),且不良反应明显减少(P<0.01)。结论:舒肝解郁胶囊可明显改善PSD的症状和神经功能缺损,临床副作用少,适合PSD的急性期和长期维持治疗。     

脑梗死患者颈动脉斑块与血浆同型半胱氨酸水平及亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性的关系

目的探讨血浆同型半胱氨酸水平、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与脑梗死患者颈动脉斑块之间的关系。方法选择颈动脉系统急性脑梗死患者128例,采用荧光偏振免疫法测定血浆同型半胱氨酸水平,聚合酶链反应-限制性片长多态性技术检测MTHFR基因多态性。应用彩色超声心动仪进行颈动脉超声检查,根据超声结果将患者分为颈动脉粥样硬化斑块组(简称斑块组)和无斑块组,比较两组血浆同型半胱氨酸水平及MTHFR基因多态性。结果斑块组TT基因型(35.8%比17.0%)及T等位基因频率(58.6%比40.4%)均显著高于无斑块组(P<0.05)。斑块组血浆同型半胱氨酸水平显著高于无斑块组(22.42±11.04μmol/L比17.89±5.96μmol/L,P<0.05)。各组内MTHFR 677TT纯合子同型半胱氨酸水平均显著高于CT型和CC型者(P<0.05)。Logistic回归分析表明,校正性别、年龄、高血压、糖尿病、高脂血症、吸烟、饮酒等危险因素后,血浆同型半胱氨酸水平仍为颈动脉粥样硬化斑块的独立危险因素[OR 1.160(95%CI 1.034～1.301),P<0.05]。结论血浆同型半胱氨酸水平升高是脑梗死患...     

16例平山病临床特征分析

目的 分析平山病的临床特征,提高对平山病的认识,便于早诊断和早治疗.方法 回顾性分析16例确诊的平山病患者的临床表现、神经电生理特征及颈椎MRI资料.结果 患者均为青少年男性,平均发病年龄19.25岁.主要表现为局限于上肢远端的肌无力和肌萎缩.肌电图显示C7~T1神经支配区肌肉神经源性异常,运动单位电位时限增宽,波幅增高.屈颈位MRI显示所有病例下颈髓后方硬膜外间隙增宽,T2像可见新月形高信号影,相应脊髓受压前移变扁.结论 结合临床表现、神经电生理学及颈椎影像学检查可确诊平山病,其治疗以配戴颈托及患肢功能训练为主.     

中药牛膝杜仲合剂对糖尿病大鼠血糖代谢的影响

目的研究中药牛膝-杜仲合剂的在体降糖作用。方法通过建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型,以大鼠体质量、血糖值以及糖耐量为主要指标考察牛膝-杜仲合剂的降糖效果。结果通过注射STZ造模后,模型组血糖值与体重均有显著性变化(P<0.01)。造模成功后,模型组大鼠的饮食饮水量发生了显著性变化(P<0.01)。牛膝-杜仲组在给药8周后,与模型组相比有极显著性差异(P<0.01);给药11周后,与模型组相比各给药组大鼠的血清胰岛素含量显著升高(P<0.05),且胰岛素抵抗指数值明显降低(P<0.05)。总超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)数据分析表明,与模型组相比,二甲双胍组、消渴丸组和牛膝-杜仲高剂量组均极显著改善SOD、MDA和GSH-PX的含量变化(P<0.01)。结论糖尿病大鼠经牛膝-杜仲治疗后,与模型组相比饮食量、饮水量及体重值有一定程度的改善;血糖值、口服糖耐量水平也显著改善,表明牛膝-杜仲合剂具有一定的降糖活性,并且其降糖作用可能与促进胰岛素分泌和体内抗氧化能力密切关联。