短发夹RNA对头颈肿瘤细胞端粒酶活性和增殖的影响

目的:观察靶向人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的短发夹RNA(shRNA)对喉癌Hep-2细胞株和鼻咽癌NEC细胞株端粒酶活性和生长增殖影响,探讨抑制端粒酶活性途径治疗头颈肿瘤的可行性。方法:根据hTERT cDNA序列构建表达shRNA、含荧光素基因、靶向hTERT mRNA的真核表达质粒shRNA1和表达shR-NA的、含荧光素基因的、靶向非人类基因的真核表达质粒shRNA2。分别以质粒shRNA1、shRNA2、转染试剂及空白培养液处理体外培养的Hep-2细胞和NEC细胞。转染48 h后以TRAP PCR-ELISA法检测细胞端粒酶活性并行HE染色;倒置显微镜下每天观察细胞形态;MTT法检测细胞增殖活性。结果:①Hep-2细胞和NEC细胞shRNA1处理48 h后与空白对照组比较端粒酶活性下降,P<0.05。②HE染色发现shRNA1处理后Hep-2和NEC细胞胞体缩小、核固缩,同等培养条件下,细胞生长密度变稀,见许多圆形死亡细胞。③与相应时间点空白对照组细胞平均吸光度(A)值比较,shRNA1处理组Hep-2细胞和NEC细胞24,48,72 h A值均减小,P<0.05。结论:靶向hTERT mRNA的小干扰RNA能够显著降低Hep-2细胞和NEC细胞的端粒酶活性,抑制癌细胞生长增殖,并诱导细胞凋亡。     

窦口鼻道复合体区解剖变异影像分析及与鼻-鼻窦炎的关系

目的 用高分辨率CT对鼻腔鼻窦炎进行影像学分析,探讨窦口鼻道复合体(OMC)区的解剖变异与儿童鼻窦炎、成人慢性鼻-鼻窦炎的关系。 方法 回顾性分析有明显临床表现且经CT扫描确诊为慢性鼻-鼻窦炎167例的临床资料,年龄4~74岁,并将其影像学资料分为儿童组和成人组,并对其分析结果进行比较。 结果 (1)儿童组和成人组的窦腔炎症最常累及上颌窦、前组筛窦和额窦;(2)儿童组的窦口鼻道复合体区解剖变异与慢性鼻-鼻窦炎的发生没有明显关系,而成人组的窦口鼻道复合体区解剖变异与慢性鼻-鼻窦炎的发生关系显著(P<0.05)。 结论 窦口鼻道复合体区的解剖变异对儿童慢性鼻-鼻窦炎的发生不如对成人的影响大,儿童慢性鼻-鼻窦炎的诊断和手术指征不能单凭异常的鼻窦CT扫描图作为惟一依据,应该切实联系临床症状。     

局麻射频消融腭咽成形术与射频消融缩容术疗效比较

目的对局麻射频消融腭咽成形术与射频消融缩容术治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructivesleepapneahypopneasyndrome,OSAHS)的效果进行比较,为OSAHS的治疗提供客观依据。方法选用局麻射频消融腭咽成形术与射频消融缩容术分别对69例和79例OSAHS患者进行治疗,术后随访6个月和12个月,比较两种手术方法的疗效及并发症情况。结果术后6个月有效率分别为85.5%和81.0%,差异无显著性。术后12个月局麻射频消融腭咽成形术疗效优于射频消融缩容术,有效率分别为78.3%和49.3%,差异有显著性。两种手术方法均无严重并发症。结论局麻射频消融腭咽成形术较射频消融缩容术远期效果好,无严重手术并发症。在病例选择合适时用局麻方法可达到全麻手术效果。     

蛋白质的核质转位在细胞凋亡及癌变过程中的研究进展

0 引言 哺乳动物细胞中存在着数量繁多的可以通过核膜上的核孔复合体在胞核与胞质间进行交换的蛋白质,它们通过核孔复合体在胞核与胞质间进行交换的过程即称为蛋白质的核质转位.这些蛋白可以通过各种转位机制对细胞自身的生长、增殖、凋亡及癌变等各种生理和病理过程产生调控作用[1].正常的生理情况下,它们在胞核或胞质中发挥着调节细胞生长和增殖的作用,而当细胞在各种因素的作用下发生病理变化时,本应存在于胞核或胞质中的大量信号蛋白和分子便会通过核孔复合体发生异常核质转位.并以这种方式将胞质和胞核紧密联系起来,使导致细胞发生癌变或凋亡的信号蛋白和分子能够进入特定场所发挥作用[2],从而导致疾病的产生.     

近5年国家自然科学基金资助耳鼻咽喉科学研究结题分析及成果简介

本文总结与分析了近5年（2002-2006年）国家自然科学基金临床医学基础Ⅱ学科资助下的耳鼻咽喉科学72项结题项目完成情况并对部分研究成果做简要介绍。在基金的资助下,耳鼻咽喉科学取得了较快发展,一些项目获得较突出的研究成果并得到国际认可,为学科发展与人才培养起到了较好的推动作用。通过对结题项目情况与研究成果的回顾与分析,期望能较客观与全面地反映该领域的研究进展,为相关科研及科研管理工作者提供借鉴与参考。     

miR-214通过PTEN调控AKT信号通路抑制鼻咽癌细胞凋亡CSCD

目的探讨miR-214通过PTEN调控下游AKT信号通路激活对鼻咽癌细胞凋亡的影响。方法miR-214抑制剂转染鼻咽癌5-8F和6-10B细胞。MTT法评估细胞增殖情况。Annexin-V/PI染色法检测两种鼻咽癌细胞凋亡情况。Western blot和real-time PCR检测miR-214抑制剂对PTEN基因转录和蛋白表达以及对AKT信号通路和凋亡相关蛋白表达水平的影响。检测shRNA沉默PTEN基因转录和蛋白表达后,miR-214抑制剂对鼻咽癌细胞凋亡影响。结果miR-214抑制剂可抑制鼻咽癌细胞生长,诱导5-8F和6-10B细胞凋亡。miR-214通过靶向3'-UTR区域调控PTEN基因转录和蛋白表达。抑制miR-214可促进PTEN的表达,抑制AKT信号通路激活,进而调控下游细胞周期和凋亡相关蛋白表达。沉默PTEN基因转录和蛋白表达可逆转miR-214抑制剂对鼻咽癌细胞AKT信号通路活性和凋亡的影响。结论miR-214可通过直接靶向PTEN基因转录促进AKT信号通路激活抑制鼻咽癌细胞凋亡。     

短发夹RNA抑制喉癌细胞hTERT基因表达及诱导细胞凋亡

目的:探讨DNA载体途径的RNA干扰技术抑制人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达及诱导喉癌细胞Hep-2凋亡的作用。方法:构建靶向hTERTmRNA的质粒pshRNA1、pshRNA2及对照质粒pshRNA3、pEGFP,并将其分别转染喉鳞癌Hep-2细胞。共聚焦荧光显微镜观察质粒转染及表达情况;RT-PCR测定hTERTmRNA表达;Western印迹测定hTERT蛋白表达;末端重复片断扩增-酶联免疫吸附(TRAP-ELISA)方法测定细胞端粒酶活性;MTT法研究细胞增殖活性变化;原位细胞凋亡(TUNEL)及透射电子显微镜研究细胞凋亡。结果:①共聚焦荧光显微镜下见大量的细胞呈现绿色荧光,与其他组比较,pshRNA1、2组呈现荧光的死亡细胞显著增加。②pshRNA1、2转染细胞后hTERTmRNA及hTERT蛋白表达显著降低;其端粒酶活性明显受到抑制:转染后2 d pshRNA1组活性为:0.159±0.039、pshRNA2组活性为0.163±0.028,与空白对照组1.523±0.076比较,差异有非常显著性(P<0.005)。③pshRNA1、2转染细胞后可显著抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡。这两组细胞透射电镜可见典型细胞凋亡特征。结论:DNA载体途径的RNA干扰技术能有效抑制hTERT基因的表达及端粒酶活性并诱导癌细胞凋亡,此法可能成为抑制肿瘤细胞的新途径。     

576例变态反应性鼻炎患者变应原点刺试验结果分析

目的 了解武汉地区变态反应性鼻炎患者变应原种类,探讨不同地区变应原分布的差异和产生的原因,及其在疾病防治方面的价值.方法 将576例变态反应性鼻炎患者分为季节性变应性鼻炎组(258例)及常年性变应性鼻炎组(318例),并应用阿罗格(NHD)变应原点刺试验对患者进行变应原测试.结果 在所有病例中屋尘螨和粉尘螨阳性率最高,其后依次为艾蒿、霉菌、豚草、早春花粉、梧桐花粉、羽毛.季节性变应性鼻炎组中早春花粉阳性率(22.9%,59/258)和豚草阳性率(34.5%,89/258)高于常年性变应性鼻炎组[11.3%(36/318)、22.3%(71/318)].而常年性变应性鼻炎组中霉菌阳性率和粉尘螨阳性率高于季节性变应性鼻炎组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 武汉地区变应原分布与我国其他地区变应原分布不同,为武汉地区变态反应性鼻炎的防治工作提供了依据.     

鼻咽癌中microRNA的研究进展

鼻咽癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。目前认为其发生是多种致癌因素共同作用的结果。许多研究表明,某些抑癌性miRNA的异常低表达与促癌性miRNA的异常高表达与鼻咽癌的产生有明显的相关性和组织特异性,直接影响着鼻咽癌的发生和发展^[1,2]。因此鼻咽癌细胞中表达异常的miRNA可能是一种非常理想的肿瘤标志物。而将其作为肿瘤基因治疗的靶点,针对miRNA寻找靶向治疗的新方法,则可为鼻咽癌的治疗开辟一条新的途径。为此,本文就miRNA与鼻咽癌发生的相关机制做一综述。