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肺泡上皮细胞向间质细胞转型是纤维化局灶成纤维细胞的重要来源,各种刺激因子作用于细胞受体,诱导细胞通路改变,从而对上皮-间质转型进行调控。对肺纤维化中上皮-间质转型信号转导调控机制的研究,为发展新的治疗策略提供了重要信息。 相似文献
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目的:观察转化生长因子-β1 (TGF-β1) 与结缔组织生长因子(CTGF) 在高血流性肺动脉高压大鼠肺组织的动态表达变化, 探讨TGF-β1 和CTGF 在高血流性肺动脉高压过程中的作用。方法:50 只成年雄性SD 大鼠随机分成假手术组( S 组) 、右肺切除1 周组(PE1 组)、2 周组(PE2 组)、4 周组(PE4 组) 和6 周组 (PE6 组), 每组10 只。测量各组大鼠平均肺动脉压( mPAP)、右室肥大指数( RVHI) 和血管形态学指标;免疫组织化学染色和Western 印迹检测肺组织TGF-β1 和CTGF 蛋白表达;RT-PCR 检测TGF-β1 和CTGF mRNA 的表达。结果:与S 组比较, 右肺切除各时间组大鼠mPAP 和RVHI 均显著升高 (P<0.05), PE1 和PE 2 组肌型动脉(MA) 和部分肌型动脉(PMA) 占肺中小血管总数的百分比[(MA+PMA)%]、MA 的相对中膜厚度(RMT) 和相对中膜面积(RMA) 与S 组比较无明显差异, PE4和PE6 组(MA+PMA)%、RMT 及RMA 明显增高(P<0.05);免疫组织化学染色显示, 右肺切除各时间组大鼠TGF-β1和CTGF 较S 组分布广泛, 表达增强。Western 印迹结果表明, 与S 组比较, 右肺切除各时间组TGF-β1 蛋白均显著上升(P<0.01), 峰值出现在PE2 组;CTGF 蛋白在PE1 组和PE2 组较S 组升高, 但差异无统计学意义, PE4 组和PE6组较S 组明显增高(P<0.05)。与S 组比较, 右肺切除各时间组TGF-β1mRNA 表达均显著升高(P<0.01), PE2 组达峰值, PE4 组和PE6 组维持在高水平。PE1 组CTGF mRNA 增高不明显, PE2 组、PE4 组和PE6 组明显上升(P<0.01)。相关分析表明, CTGF 蛋白和mRNA 表达与RMT 和RMA 呈正相关( P<0.05);TGF-β1 蛋白和mRNA 表达与RMT 和RMA无相关性;TGF-β1 mRNA 表达与CTGF mRNA 表达之间无明显相关性。结论:TGF-β1 和CTGF 参与了大鼠高血流性肺动脉高压的病理生理过程。 相似文献
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二氧化硅对人肺泡Ⅱ型上皮细胞纤溶酶原激活物抑制因子-1和激活蛋白-1表达的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的研究SiO2对人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)中纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)及激活蛋白1(AP1)表达的影响,探讨SiO2致肺纤维化的发病机制。方法按SiO2(200μg/ml)与A549细胞共育时间的不同,实验分SiO2刺激0、4、8、16、24h组。利用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、Westernblot及免疫细胞化学SP法检测细胞PAI1mRNA和蛋白的表达;AP1(cjun/cfos)总蛋白及核蛋白表达的检测采用Westernblotting。结果SiO2刺激后,实验组PAI1mRNA及蛋白表达强度随时间延长依次增强,呈直线正相关(rmRNA=0.911,r蛋白=0.902,P<0.05),且实验组PAI1蛋白表达均高于对照组(0.36±0.03),其中24h组(0.73±0.01)表达最强;cjun和cfos核蛋白的表达亦明显高于对照组(0.52±0.02、0.15±0.01),cjun核蛋白的表达4h组(1.54±0.02)最强;cfos核蛋白表达8h组(0.36±0.01)最强;cjun和cfos核蛋白的表达均从孵育16h开始逐渐下降。AP1(cjun/cfos)总蛋白的表达各组间差异无统计学意义(P>0.05);PAI1阳性信号定位于胞浆和胞核。结论SiO2能够诱导A549细胞PAI1的表达,呈现出明显的时间-效应关系,核转录因子AP1在SiO2刺激的早期被激活。 相似文献
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[目的]探讨肝细胞癌(HCC)和癌旁肝组织中信号转导和转录激活因子3(STAT3)抑制因子(PIAS3)的表达及其临床意义.[方法]利用两步法免疫组织化学技术检测PIAS3蛋白在HCC及其癌旁肝组织的表达.[结果]PIAS3蛋白在HCC中的阳性率和阳性强度均低于癌旁肝组织(P<0.01);HCC中PIAS3蛋白的表达强度与患者的性别和肿瘤的大小无关(P>0.05),但与肿瘤细胞的分化程度明显相关(P<0.01).分化越差,表达越弱.[结论]提示检测PIAS3蛋白对判断HCC的预后具有一定意义,纠正PIAS3蛋白的表达有可能成为HCC基因治疗新策略. 相似文献
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目的:探讨Rho在二氧化硅(SiO2)诱导人支气管上皮细胞(HBECs)α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达中的作用。方法:以SiO2处理的HBE细胞为研究对象,免疫细胞化学及Western印迹检测α-SMA表达;GST pull down分析Rho的活化情况;干预实验中用Rho抑制剂Y27632处理细胞后,Western印迹检测SiO2对α-SMA表达的影响。结果:SiO2 (0,50,100,200,300 μg/mL)分别作用HBECs细胞72 h后,α-SMA表达增强,其中以200 μg/mL SiO2组α-SMA表达最强,为对照组的(5.09±1.98)倍(P<0.01);用200 μg/mL SiO2分别作用HBECs细胞1,2,6,12,24 h后,Rho明显活化(P<0.01);Rho抑制剂Y27632明显抑制了SiO2诱导的α-SMA表达,20和30 μmol/L的Y27632抑制率分别为68%和75%(P<0.01)。结论:Rho参与介导SiO2诱导的HBECs中α-SMA的表达。 相似文献
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目的:探讨核转录因子激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)在转化生长因子B1(transfor-ming growth factor-β1,TGF-β1)诱导人肺成纤维细胞I型胶原分泌中的作用。方法:以人肺成纤维细胞HLF-02细胞系为研究对象,给予10μg/L的TGF-β1刺激,于不同时间点收集细胞,采用RT-PCR和Wester blot检测细胞I型胶原转录和分泌;阻断实验中选用AP-1抑制剂姜黄素为阻断剂,凝胶阻滞实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测细胞内AP-1的DNA结合活性变化,同时Western印迹检测I型胶原分泌变化。结果:TGF-β1能诱导HLF-02细胞I型胶原mRNA的转录和分泌(P〈0.05);TGF-β1能提高HLF-02细胞AP-1的DNA结合活力(P〈0.05);姜黄素能明显抑制TGF-β1诱导的HLF-02细胞AP-1的DNA结合活力,抑制率分别为17.1%,17.6%,24.2%,31.3%(P〈0.05);同时,姜黄素能明显抑制TGF-β1诱导的HLF-02细胞I型胶原的分泌,抑制率分别为62.1%,58.8%,62.1%,59.6%(P〈0.05)。结论:核转录因子AP-1参与TGF-β1刺激的HLF-02细胞I型胶原的分泌调控。 相似文献
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虚拟现实技术的发展给自闭症患者的康复治疗提供了新方案,它克服了传统治疗的弊端,具有反馈性、安全性、可控性、可重复性等特点。基于此,文章提出了HTC Vive支持的"三能力、四模块"系统设计框架,并阐述了系统的开发过程和应用效果,以期为基于VR的自闭症康复系统开发提供借鉴。 相似文献
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目的 研究二氧化硅(SiO2)刺激的巨噬细胞中核转录因子(Sp1)表达和定位的动态变化.方法 将40只健康SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组各20只.采用非暴露式气管插管,实验组每只大鼠一次性注入1 ml无菌生理盐水与SiO2混悬液(0.2 g/kg);对照组大鼠注入等量的无菌生理盐水;分别于灌注后第1、7、14、21和28天各处死4只.免疫组织化学检测体内SiO2刺激的肺巨噬细胞中Sp1蛋白表达的定位及其动态变化.体外培养小鼠腹腔巨噬细胞系(RAW264.7细胞),逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测体外SiO2刺激的巨噬细胞中Sp1 mRNA的动态变化;免疫细胞化学、Western blot法检测体外SiO2刺激的巨噬细胞中Sp1蛋白表达的定位及其动态变化.结果 实验组与对照组比较,肺巨噬细胞中Sp1蛋白表达上调,于第14天达高峰;体外SiO2作用RAW264.7细胞30~960 min,Sp1 mRNA表达明显升高,呈现先升高而后下降的趋势,峰值位于240 min;Sp1总蛋白和核蛋白表达亦呈现先升高而后下降的趋势,总蛋白表达峰值位于240 min,核蛋白峰值位于480 min;Sp1蛋白于120 min开始发生明显的核移位,480 min时核移位最明显.结论 SiO2能激活巨噬细胞中Sp1,Sp1可能在矽肺的发生发展过程中起重要的调控作用. 相似文献
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目的:分析游离二氧化硅(silicon dioxide,SiO2)粉尘刺激的RAW264.7巨噬细胞源性外泌体miRNA的表达差
异。方法:以SiO2(200 mg/L)刺激RAW264.7巨噬细胞48 h(exo_48 h组)后收集上清液,超速离心法提取上清中的外泌
体;使用透射电镜扫描、纳米微粒跟踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)技术、蛋白质印迹法鉴定外泌体;提
取外泌体miRNA行高通量测序,比较exo_control组(以不含SiO2粉尘的培养基孵育RAW264.7巨噬细胞48 h)与exo_48 h
组外泌体miRNA表达差异;采用miRanda,TargetScan和starBase 3个软件进行差异miRNA的靶基因预测,对靶基因进行
GO(gene ontology)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)分析,进一步分析基因的生物学功能。结果:在透
射电镜下,外泌体为不均匀分布的、圆形或椭圆形的、脂质膜包被的、直径30~100 nm的囊泡;粒径检测显示其体积
峰度集中在40~100 nm;蛋白质印迹法显示外泌体标志蛋白质TSG101表达阳性。高通量测序筛选出148个差异表达的
外泌体miRNA。与exo_control组相比,exo_48 h组miR-219c-3p,let-7d-3p,let-7a-1-3p,miR-328-3p,miR-365-3p,miR-
7219-3p等显著上调,miR-378d和miR-5106等显著下调。靶基因预测结果、GO和KEGG分析结果显示靶基因主要富集
在mTOR信号通路、Wnt信号通路、TGF-β信号通路等。结论:SiO2诱导的巨噬细胞产生的外泌体包含丰富的miRNA,
且其表达存在显著差异,这些差异的miRNA可能参与了肺成纤维细胞的活化、上皮间质转化等过程。 相似文献
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目的 探讨 p38 MAPK 信号通路在二氧化硅(SiO2)诱导人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)上皮-间质转型(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用机制.方法 采用MAPK活性检测试剂盒检测SiO2处理HBE细胞... 相似文献