靶向Ang2的RNAi慢病毒载体的构建及其对恶性黑色素瘤细胞中Ang2基因表达的影响

目的 构建携带促血管生成素2-小干扰RNA(Ang2-siRNA)慢病毒载体,观察其对恶性黑色素瘤细胞中Ang2基因表达的干扰作用.方法 将经XbaⅠ酶切电泳鉴定的带有加强绿色荧光蛋白的转移质粒(pNL-EGFP)载体与pSilencer 1.0-U6启动子-促血管生成素2-小干扰RNA(pSilencer 1.0-U6-Ang2-siRNA)重组质粒连接,产生加强绿色荧光蛋白的转移质粒-U6启动子-促血管生成素2-Ⅰ(pNL-EGFP-U6-Ang2-Ⅰ)、加强绿色荧光蛋白的转移质粒-U6启动子-促血管生成素2-Ⅱ(pNL-EGFP-U6-Ang2-Ⅱ)慢病毒转移质粒,电泳筛选阳性克隆,测序鉴定.用连接成功的慢病毒转移质粒、水疱性口炎病毒G蛋白(pVSVG)包膜质粒和pHelper包装质粒共转染293T细胞,产生pNL-EGFP-U6-Ang2-Ⅰ、pNL-EGFP-U6-Ang2-Ⅱ慢病毒.收集病毒上清,测定病毒滴度.将收集的病毒上清感染恶性黑色素瘤细胞,通过实时荧光定量RT-PCR测定抑制Ang2基因表达的效率.结果 酶切电泳与测序鉴定证实成功构建了Ang2-SiRNA慢病毒载体,293T细胞测定病毒原液滴度为8.0×103/ml.实时荧光定量RT-PCR结果显示:Ang2-siRNA慢病毒载体感染恶性黑色素瘤细胞,抑制了恶性黑色素瘤细胞中Ang2基因的表达(P＜0.05).结论 成功构建了Ang2-SiRNA慢病毒载体,体外研究显示Ang2-SiRNA慢病毒载体能抑制恶性黑色素瘤细胞中Ang2 mRNA的表达,为下一步进行裸鼠恶性黑色素瘤移植瘤生长的干预实验奠定基础,为肿瘤的基因治疗提供实验依据.     

艾滋病合并结核病40例临床分析

目的提高对艾滋病合并结核病的认识,降低双重感染的发病率及死亡率,提高患者的生存质量。方法对2005～2010年收治的40例艾滋病合并结核病患者进行分析。结果免疫状况：CD4＋T〉350／μl 4例（10％）,CD4＋T200～350／μl 10例（25％）、CD4＋T100～200／μl 16例（40％）,CD4＋T50～100／μl 5例（12．5％）,CD4＋T〈50／μl5例（12．5％）。影像表现：肺结核24例（60％）、结核性胸膜炎15例（37％）、原发综合症1例（3％）。转归：治愈30例（75％）、好转4例（10％）死亡6例（15％）。诊断途径：HIV／AIDS筛查结核检出17例（42.5％）、结核病发病检出HIV／AIDS23例（57．5％）。常合并多种病原菌感染。结论结核病是艾滋病病毒感染者和艾滋病病人最常见的可治愈的机会性感染,也是晚期艾滋病死亡的常见原因、结核病能促进艾滋病病程进展。对可疑结核病人进行艾滋病筛查,对HIV／AIDS患者定期筛查结核,早诊断、早治疗,能有效降低双重感染的发病率和死亡率,提高患者的生存质量。     

铅对大鼠星型胶质细胞c-Fos和c-Jun蛋白表达影响

目的探讨不同时间点低浓度铅暴露对体外原代培养的星型胶质细胞中即早基因c-Fos和c-Jun蛋白表达的影响。方法出生4～8 d Wistar大鼠脑星型胶质细胞原代培养,1.0μmol/L醋酸铅暴露不同时间后分别收集样品,应用蛋白免疫印迹法测定样品c-Fos和c-Jun蛋白表达的变化。结果 1.0μmol/L醋酸铅处理后,星型胶质细胞中c-Fos和c-Jun蛋白表达均明显降低,与对照组比较,染铅15 min时蛋白表达降低有统计学意义(P0.05),分别比对照降低33.4%和17.3%;至染铅180 min时c-Fos和c-Jun蛋白表达降至最低,均低于对照的1/2(P0.01)。结论低浓度染铅可使原代培养的星型胶质细胞中c-Fos和c-Jun蛋白表达持续降低,这可能与铅致大鼠学习记忆功能损害有关。     

改良Ivor-Lewis手术治疗62例胸中下段食管鳞癌的疗效分析

目的探讨改良Ivor-Lewis手术治疗胸中下段食管鳞癌的临床疗效。方法回顾性分析62例采用改良Ivor—Lewis手术治疗的胸中下段食管鳞癌患者的临床资料。生存率计算采用Kap／an．Meier方法。结果术后10例出现并发症,占16．1％。死亡2例,占3．2％。淋巴结转移率58．0％,上纵隔转移率最低（16．5％）,下纵膈转移率最高（40．9％）。全组平均生存时间为（52．06±3．21）个月,3、5年生存率分别为52．2％、24．5％。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者3、5年生存率分别为93．4％和70．5％、49．3％和27．5％、36．2％和12．6％。结论改良Ivor—Lewis手术具有良好的手术视野．淋巴结清扫彻底的优点,可减少术后并发症,提高患者生存期．是治疗胸中下段食管鳞癌较理想的手术方式．     

酒石酸布托啡诺复合氟比洛芬酯用于妇科手术患者术后静脉镇痛

目的:观察布托啡诺与氟比洛芬联合应用于妇科术后的镇痛效果和不良反应。方法:全身麻醉下择期行剖腹手术的妇科患者60例,平均分为三组:Ⅰ组:单纯氟比洛芬;Ⅱ组:单纯布托啡诺;Ⅲ组:氟比洛芬加布托啡诺。记录术后生命体征、视觉模拟评分,同时记录手术后疼痛评分、镇静评分和不良反应。结果:Ⅱ组和Ⅲ组镇痛效果显著优于Ⅰ组(P0.05),Ⅰ组和Ⅲ组肛门排气延迟发生率显著低于Ⅱ组(P0.05)。结论:氟比洛芬复合布托啡诺用于妇科术后静脉镇痛可达到满意的镇痛效果并减少不良反应。     

颜面部凹陷畸形的整复治疗

引起颜面部凹陷畸形的原因很多 ,可分为骨性凹陷和软组织凹陷畸形。笔者 1986年 6月至 2 0 0 0年 6月间采用陈旧性骨折复位内固定 ,自体骨移植 ,自体骨移植 人工骨填充术 ,膨体聚四氟乙烯 (ｅＰＴＦＥ)植入及自体脂肪颗粒注射移植等方法整复颜面部骨性凹陷畸形和软组织凹陷畸形共 5 8例 ,收到较好效果 ,报道如下。1　临床资料　1.1　一般资料　本组 5 8例中 ,男 2 6例 ,女 32例。年龄 11～4 3岁。本组骨性凹陷畸形 2 3例 ,其中上颌骨、颧骨多发性陈旧性骨折凹陷畸形 4例 ,外伤性前额、颞部及眶周凹陷畸形 9例 ,外伤性鼻骨骨折鞍鼻畸形 2例 …     

基于多特征提取的遥感图像机场目标自动检测

传统的遥感图像机场跑道自动目标检测由于仅提取灰度特征常产生过分割现象,本文采用灰度特征和纹理特征相结合的方法进一步提高跑道的检测精度。利用阈值对遥感图像进行初始分割,以定位感兴趣区域（ROI）,再利用EM算法估计ROI区域训练样本,引入马尔可夫随机场（MRF）模型,分割机场跑道。实验表明MRF可以很好地描述空间连续性,可以达到精确检测机场跑道的目的。     

系统性硬化病误诊1例

患者,女,70岁,因关节疼痛、水肿4个月,吞咽困难、饮水呛咳、消瘦2个月入院。入院前4个月患者出现雷诺现象、关节疼痛及双下肢水肿。在院外查血、尿常规正常;血沉25mm／1h;肝功能示转氨酶升高（丙氨酸转氨酶93U／L,天冬氨酸转氨酶111U／L,白蛋白／球蛋白1．74）;抗链球菌溶血素“O”〈200,类风湿因子（＋）;血清促甲状腺素、游离三碘甲腺原氨酸、游离甲状腺素正常;     

东弗里升与湖羊杂交后代生产性能分析

本研究旨在探讨舍饲条件下东弗里升与湖羊杂交F1代及湖羊的生产性能.试验将舍饲条件相同,健康状况良好的东弗里升与湖羊进行杂交,选择东弗里升公羊与湖羊母羊杂交一代头胎产羔母羊22只为试验组(F1组);同时随机选择湖羊头胎产羔母羊22只为对照组(T组);F1代母羊与湖羊公羊杂交产生F2代,随机选取38只羔羊为F2组,分别测定3组羊的生产性能.结果表明:东湖F1代的泌乳量显著高于湖羊(<0.05);F1组乳品质与对照组相比,除乳脂率差异不显著外(>0.05),乳脂、乳蛋白、乳糖均差异显著(<0.05).F1、F2以及T组出生重,两两对比,差异均为极显著(<0.01);F1羔羊日增重极显著(<0.01)高于湖羊与F2;F2羔羊日增重与湖羊对比,差异显著(<0.05);F1的体尺测定结果显著优于湖羊(<0.05).因此,通过湖羊与东弗里升杂交,能够提高湖羊生产性能.     

超声弹性成像联合声触诊组织成像量化技术诊断乳腺肿瘤准确性研究

目的：探讨超声弹性成像联合声触诊组织成像量化技术（VTQ）诊断乳腺良恶性肿瘤的准确性。方法选择118例乳腺肿瘤患者,术前行 VTQ及超声弹性成像检查,测量乳腺肿瘤内部的 VTQ值,并对肿瘤硬度进行评分,以术后病理结果为金标准,计算超声弹性成像联合声触诊组织成像量化技术诊断乳腺肿瘤良恶性的准确性。结果超声弹性成像、VTQ技术单独和联合使用对鉴别诊断乳腺肿瘤良恶性与病理结果比较,差异均有统计学意义（P ＜0．05）。ROC曲线显示,以硬度评分4分为临界值,超声弹性成像诊断乳腺肿瘤良恶性的灵敏性为92％,特异性为91％。以肿瘤内部 VTQ值3．91 m/s 为临界值,VTQ技术诊断乳腺肿瘤良恶性的灵敏性为85％,特异性为97％。超声弹性成像联合 VTQ技术诊断乳腺肿瘤良恶性的灵敏性为93％,特异性为95％。结论超声弹性成像联合 VTQ技术能提高诊断良恶性乳腺肿瘤的准确性。