豨莶草化学成分和药理作用及质量标志物（Q-Marker）的预测分析

豨莶草作为我国传统中草药,用药历史悠久,临床多用于风湿痹痛的治疗。豨莶草中化学成分类型丰富,主要成分为二萜类、倍半萜类、黄酮类,其二萜类成分历来被认为是主要的药效物质。对其化学成分、药理作用综述的基础上,根据中药质量标志物（quality maker,Q-Marker）理论,从化学成分特有性、成分有效性、可测成分、入血成分4个方面对豨莶草Q-Marker成分进行预测分析,豨莶苷、奇壬醇、豨莶精醇、槲皮素、黄芩苷作为豨莶草的Q-Marker,为豨莶草制定科学的质量标准提供依据。     

大型医院与社区卫生服务机构双向转诊制度的建立和实施

实施双向转诊制度对于优化卫生资源配置,降低医疗费用,解决群众"看病贵、看病难"问题具有深远的意义。通过分析常州市第二人民医院与天宁青龙社区卫生服务中心双向转诊制度的建立和实施情况,进一步分析双向转诊制度的实施现状及存在的问题,探讨建立规范的双向转诊制度,从而为健全基层医疗卫生服务体系提供参考。     

慢性铝暴露对大鼠海马细胞外调节蛋白激酶2及cAMP反应元件结合蛋白mRNA和蛋白表达的影响

目的 通过观察细胞外调节蛋白激酶2(ERK2)及cAMP反应元件结合蛋白(CREB)通路的变化,研究慢性铝暴露对大鼠学习记忆功能的影响机制.方法 将80只初断乳清洁级雄性Wistar雄性大鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和2、4、6 mg/ml三氯化铝染毒组,每组20只.采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒3个月.测定大鼠脑铝和血铝含量,采用Western Blot法和Real-time PCR(RT-PCR)法分别检测海马组织中ERK2和CREB mRNA及蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,各浓度铝染毒组大鼠血铝和脑铝含量均升高,海马组织中ERK2和CREB蛋白及mRNA的表达水平均下降,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着铝染毒浓度的升高,大鼠血铝和脑铝含量呈上升趋势,海马组织中ERK2和CREB蛋白及mRNA的表达水平均呈下降趋势.结论 慢性铝暴露可能通过抑制大鼠海马中ERK2/CREB通路而损伤大鼠的学习记忆能力.     

家庭远程监护系统的构建

目的:构建家庭远程监护系统,使患者无需到医院就诊,方便医生远程监护患者,提高就诊效率。方法:应用无线传感器网络技术,采用嵌入式网关服务器将被监护对象的生理参数(比如血压)通过互联网从客户端传输至医疗中心,医生通过数据分析,从而实现远程监护。结果:建立了一个家庭远程监护系统,使患者方便有效地得到了良好的监护,使医生方便有效地提高诊断效率。结论:监护系统可以运用在将来的医疗设备中,为患者提供方便,同时也能为医生及时地提供有效的数据,值得推广。     

肾移植术后肺部感染的诊疗

目的 探讨肾移植术后肺部感染发病特点及有效的临床诊疗措施.方法 对我院2012年1月至2016年2月49例肾移植术后发生肺部感染患者的临床资料进行回顾性分析.结果 49例肾移植术后肺部感染的患者中,细菌感染者22例,真菌感染者18例,病毒感染者7例,支原体、衣原体感染者各1例.其中31例发生于术后半年以内,28例为混合感染.住院治疗后46例康复出院,3例因重度肺部感染死亡.结论 肾移植术后肺部感染发生率和病死率高,在明确感染病原体之前可采用经验性抗感染治疗,待培养和药敏试验结果出来时及时选择有效的治疗药物.     

种植牙修复牙列缺损246例分析

目的：观察种植牙修复牙列缺损的临床效果。方法：本样本回顾分析2008-09-2010-08门诊治疗246例患者植入种植牙500颗的临床资料。结果：246例手术适应症患者,植入500枚种植体全部行义齿修复。术后3月随访,患者无不适感,咀嚼良好,无牙龈出血,X线牙片结果骨吸收均〈0.2 mm,种植体周围无透视区,与骨结合均较好。仅2例种植体脱落,成功率高达99.6%。结论：应用骨内牙种植体修复方法修复不同部位牙列缺损,能达到稳定、舒适、美观、咀嚼功能良好的效果。     

Tie2基因RNAi慢病毒载体的构建及其干预恶性黑色素瘤细胞的体外研究

目的 构建携带酪氨酸蛋白激酶受体2-小干扰RNA(Tie2-SiRNA)慢病毒载体,观察其对恶性黑色素瘤细胞的干扰作用.方法 将pSilencer 1.0-U6启动子-酪氨酸蛋白激酶受体2-小干扰RNA(pSilencer 1.0-U6-Tie2-siRNA)重组质粒经Xba Ⅰ酶切电泳鉴定后,与经Xba Ⅰ酶切电泳鉴定的带有加强绿色荧光蛋白的转移质粒(pNL-EGFP)载体连接,产生加强绿色荧光蛋白的转移质粒-u6启动子-酪氨酸蛋白激酶受体2-Ⅰ(pNL-EGFP-U6-Tie2-Ⅰ)、pNL-EGFP-U6-Tie2-Ⅱ慢病毒转移质粒,电泳筛选阳性克隆,测序鉴定.用连接成功的慢病毒转移质粒,分别与水疱性口炎病毒G蛋白(pVSVG)包膜质粒和pHelper包装质粒组成慢病毒三质粒转染系统,再共转染293T细胞,产生pNL-EGFP-U6-Tie2-Ⅰ、pNL-EGFP-U6-Tie2-Ⅱ慢病毒.收集病毒上清,测定病毒滴度.将收集的病毒上清感染恶性黑色素瘤细胞,通过实时荧光定量RT-PCR测定抑制Tie2基因表达的效率.结果 酶切电泳与测序鉴定证实成功构建了Tie2-SiRNA慢病毒载体,293T细胞测定病毒原液滴度为8.8×103/ml.实时荧光定量RT-PCR结果显示:Tie2-SiRNA慢病毒载体感染恶性黑色素瘤细胞,抑制了恶性黑色素瘤细胞中Tie2基因的表达,其中较高者可达68.55%,并且2种慢病毒载体之间差异无统计学意义(t=0.362,P＞0.05).结论 成功构建了Tie2-SiRNA慢病毒载体,体外研究显示其能抑制Tie2 mRNA的表达,为下一步进行抑制肿瘤生成的动物实验研究奠定了基础.

Abstract：

Objective To construct lentivector carrying Tie2-Small interfering RNA(SiRNA),so as to study its influence on malignant melanoma cells.Methods Recombinant plasmid pSilencer 1.0-U6-Tie2-siRNA and plasmid pNL-EGFP were digested with Xbal.ligated a target lentiviral transfer plasmid of pNL-EGFP-U6-Tie2-Ⅰ or pNL-EGFP-U6-Tie2-Ⅱ,and then the electrophoresis clones was sequenced.Plasmids of pNL-EGFP-U6-Tie2-1 and pNL-EGFP-U6-Tie2-Ⅱ were constructed and combined with pVSVG and pHelper,respcectively,to constitute lentiviral vector system of three plasmids.The Lentiviral vector svstem was transfected into 293T cell to produce pNL-EGFP-U6-Tie2-Ⅰ and pNL-EGFP-U6-Tie2-Ⅱ lentivirus.Then the supernatant was collected tO determine the titer.Malignant melanoma cells were infected by both lentiviruses and identified by Realtime RT-PCR to assess inhibitory efficiency. Results The recombinant lentiviral vectors of Tie2-RNAi were constructed successfully which were analyzed with restriction enzyme digestion and identified by sequencing.And the titer of lentiviral vector was 8.8×103/ml,which was determined by 293T cell.The results of Reahime RT-PCR demonstrated that the lentiviral vectors of Tie2-RNAi could infect malignant melanoma cells and inhibit the expression of Tie2 genes in malignant melanoma cells(P＜0.01).There was no significant difference in the expression level (P＞0.05)between the two lentiviral vectors of Tie2-RNAi.Conclusions Lentivector carrying Tie2-SiRNA can be constructed successfully and inhibit the expression of Tie2 gene in vitro significantly.The study will supply the theory basis for the further research on the inhibition of tumor growth in vivo.     

pSilencer1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒的构建及其在体外人脐静脉内皮细胞中抑制Ang2.Tie2基因的表达

目的 探讨应用RNA干扰(RNAi)技术抑制Ang2、Tie2基因的表达情况,为进一步研究其在体外抑制血管生成以及抑制肿瘤血管生成的动物实验研究奠定基础.方法 构建pSilencer 1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒各2条并予以鉴定.用pSilencer 1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒转染人脐静脉内皮细胞(HUVECs),采用免疫细胞化学染色和RT-PCR方法检测各组HUVECs中Ang2及Tie2的蛋白及mRNA的表达状况.结果 成功构建pSilencer 1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒各2条,用其转染HUVECs后,免疫细胞化学染色和RT-PCR检测结果显示,Ang2、Tie2在蛋白和mRNA的表达水平均受到明显抑制(P＜0.05),并且siRNA的2条重组质粒之间均差异无统计学意义(P＞0.05).结论 pSilencer 1.0-u6-Ang2/Tie2-siRNA在体外能够抑制HUVECs的Ang2和Tie2的蛋白及mRNA的表达.     

减低剂量IA方案联合司莫司汀治疗急性髓细胞白血病的临床观察

目的 探讨减低剂量去甲氧柔红霉素、阿糖胞苷联合司莫司汀(IAS)方案治疗急性髓细胞白血病(AML)的临床疗效和不良反应.方法 将58例初诊AML患者采用随机数字表法分为两组,其中IAS组30例,DA组(柔红霉素+阿糖胞苷)28例.IAS方案具体为去甲氧柔红霉素8～10mg/(m2·d),第1～3天,静脉注射;阿糖胞苷100～150 mg/(m2·d),第1～7天,静脉滴注;司莫司汀200 mg,化疗前1d口服.DA方案具体为柔红霉素40 ～60 mg/(m2·d),第1～3天,静脉注射;阿糖胞苷100～150 mg/(m2·d),第1～7天,静脉滴注.以完全缓解率和总有效率作为疗效观察指标.结果 1个疗程化疗结束后IAS组完全缓解率为80.0％ (24/30),总有效率为86.7％ (26/30);DA组完全缓解率为57.1％ (16/28),总有效率为64.3％ (18/28),两组间完全缓解率、总有效率差异均有统计学意义(x2值分别为4.167和3.962,P均＜0.05).化疗的不良反应主要为骨髓抑制和粒细胞缺乏所致的感染,未见严重的非血液系统不良反应,两组不良反应发生率差异无统计学意义[ 96.7％( 29/30)、92.9％( 26/28),x2=0.004,P＞0.05].结论 IAS诱导方案疗效优于DA方案,不良反应可耐受,可以作为初治AML患者高效安全的化疗方案.