蛋白激酶A在慢性心房颤动患者2型小电导钙激活钾通道调控中的作用

 目的：探讨心房颤动（AF）时心房肌细胞2型小电导钙激活钾通道（SK2通道）功能的改变及蛋白激酶A（PKA）相关途径对SK2通道电流的调节。方法：从体外循环手术中获取右心耳组织,应用改良的急性酶分离法获得人心房单个心肌细胞,采用膜片钳全细胞记录模式进行SK2通道电流记录。对比窦性心律（SR）组和AF组SK2通道电流密度及其在混合电流中所占比例的变化。观察PKA特异性抑制剂H-89对SK2通道电流的作用。采用BCA法和ELISA法检测心房组织总蛋白和PKA的含量。结果：（1）SR组和AF组的SK2通道电流均呈现内向整流特性。AF组SK2通道电流密度明显增高,且在混合电流中所占比例增加。在-130 mV钳制电压下,SR组和AF组SK2通道电流密度分别为(-2.61±0.14) pA/pF和(-6.21±0.59) pA/pF,在混合电流中所占比例分别为(20.01±1.44)%和(42.87±1.79)%,差异均有统计学意义（P<0.05）。（2）H-89能够降低SR组和AF组SK2通道电流密度,且对AF组SK2通道电流密度的抑制更明显。在-130 mV钳制电压下,H-89对SR组和AF组SK2通道电流密度的抑制率分别为(39.27±4.08)%和(76.32±2.94)%;SK2通道电流在混合电流中比例亦下降,抑制率分别为(37.48±4.77)%和(56.40±3.66)%,差异均有统计学意义（P<0.05）。（3）AF使PKA含量下降。SR组和AF组PKA含量分别为(511.91±7.22) ng/L和(444.09±7.88) ng/L,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：AF患者心房肌细胞SK2通道电流密度及其在混合电流中比例升高,是AF发生和维持的基础之一,电流改变参与了心房电重构过程。PKA能够通过一定途径调节SK2通道功能,且对AF心房肌细胞SK2通道的调节更为显著。     

风湿性心脏病心房颤动患者HCN2mRNA的表达

目的通过风湿性心脏病(简称风心病)心房颤动(简称房颤)患者右心耳组织超极化激活环核苷酸门控阳离子通道-2(HCN2)基因mRNA表达检测,探讨其与房颤的可能关系。方法 28例风心病患者根据是否存在房颤,分为房颤组和窦性心律(简称窦律)组,术前均行心脏彩色多普勒超声检测,术中取右心耳组织,应用半定量聚合酶链式反应技术检测HCN2mRNA表达。结果房颤组右房径大于窦律组((59.2±10.9 mm vs 41.7±15.5mm,P<0.05);HCN2mRNA表达水平高于窦律组(0.911 9±0.7052 vs 0.4735±0.3909,P<0.05)。结论HCN2mRNA表达异常增高,可能与风心病房颤的发生相关。     

奥曲肽在老年不完全性肠梗阻患者治疗中的效果观察

目的探讨奥曲肽在老年不完全性肠梗阻患者治疗中的临床效果。方法将老年不完全性肠梗阻患者120例随机分为观察组和对照组各60例,对照组给予常规治疗,观察组在对照组治疗基础上给予奥曲肽治疗。结果观察组患者治愈率和总有效率高于对照组,但差异无统计学意义（P〉0.05）。观察组患者禁食时间、肛门排气时间、症状缓解时间、住院时间均短于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。两组均无明显不良反应。结论奥曲肽的应用可提高老年不完全性肠梗阻临床治疗效果,较快缓解症状,且安全性高,值得推广。     

眼针配合腹部针刺治疗中风后便秘的临床观察

目的:观察眼针配合腹部针刺治疗中风后便秘的临床疗效。方法:将60例中风后便秘患者随机分为治疗组30例和对照组30例。治疗组采用眼针配合腹部针刺治疗,对照组采用腹部针刺治疗。治疗两个疗程后根据临床症状积分进行疗效评价。结果:两组患者治疗后临床症状积分较治疗前均明显降低(P<0.05),且眼针配合腹部针刺组症状改善程度较药物组显著(P<0.05)。结论:眼针配合腹部针刺治疗中风后便秘的临床疗效显著,且优于腹部针刺组治疗。     

眼针联合头皮针治疗偏头痛随机平行对照研究

[目的]观察眼针联合头皮针治疗偏头痛疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将100例门诊患者按就诊顺序编号简单随机分为两组。对照组50例头皮针,"华佗牌"毫针(25×40mm),患者取坐位或卧位,穴位常规消毒后,取额中带、额旁1带前1/3、中1/3、后1/3各三穴并接力刺,快速斜刺进针,针与头皮呈25°~45°夹角,进针深度20mm,留针30min,1次/d。治疗组50例眼针,参照彭静山《眼针疗法》取穴:双侧上焦区、肾区、肝区、同时进行观眼视病,加取脉络形状、颜色最明显经区;取沿皮横刺法:应用于眶外,找准经区界限,穴位均距离眼眶2mm,在选好的经区,向应刺的方向沿皮刺入,可刺入真皮达皮下组织中,不可再深;一手持针,另一手按住眼睑,把眼睑紧压在手指下面,右手拇食二指持针迅速准确刺入;刺入后不行提插拾转手法,如不得气可刮针柄;留针30min,1次/d;头皮针治疗同治疗组。连续治疗7d为1疗程。观测临床症状、头痛指数、中医证候积分、不良反应。连续治疗4疗程(28d),判定疗效。[结果]治疗组痊愈20例,显效16例,有效11例,无效3例,总有效率94.00%。对照组痊愈16例,显效10例,有效10例,无效14例,总有效率72.00%。治疗组疗效优于对照组(P0.05)。[结论]眼针联合头皮针治疗偏头痛,疗效满意,无副作用,值得推广。     

CDH1基因在SD大鼠舌黏膜癌变过程中甲基化和突变的研究

目的:通过甲基化和外显子突变研究探索CDH1基因在舌鳞状细胞癌发生过程中的作用。方法:采用质量分数为0.004%的4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline-1-oxide,4NQO)饮水饲养90只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)SD大鼠以诱发舌黏膜癌变全过程,分别于第10、14、18、22、24周分批处死大鼠,取舌黏膜组织行病理分级,并提取基因组DNA。利用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MS-PCR)检测CDH1启动子甲基化水平;利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增CDH1外显子1-16,提纯后测序以检测突变。结果:病变各阶段均未检测出CDH1启动子甲基化产物,CDH1 mRNA第2106位发生碱基G→T错义突变。结论:4NQO饮水诱导SD大鼠舌黏膜癌变的发生、发展可能与CDH1外显子突变有关而与CDH1启动子甲基化无关。     

巨噬细胞自噬与动脉粥样硬化关系的研究进展

综述巨噬细胞自噬和动脉粥样硬化(AS)的相互关系及分子机制和近年来自噬药物在AS中的研究进展。AS是心血管疾病发生发展的病理基础,巨噬细胞参与了AS斑块形成和发展的全过程。自噬与肿瘤、神经系统疾病、免疫疾病和心脑血管疾病等多种疾病密切相关,自噬可作为抗AS的潜在治疗靶点。     

癌相关成纤维细胞外泌体通过抑制铁死亡促进前列癌恶性侵袭

目的 研究癌相关成纤维细胞(CAFs)外泌体通过抑制铁死亡对前列腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法 原代培养源于人前列腺癌基质CAFs及癌旁基质NFs(正常成纤维细胞),超速离心法提取CAFs外泌体(CAFs-exo)和NFs外泌体(NFs-exo),并通过透射电镜和Western blot进行鉴定。将外泌体分别和前列腺癌22rv1细胞和PC-3细胞共培养,观察细胞增殖、迁移和侵袭能力变化,检测细胞活性氧(ROS)水平、铁死亡及其相关蛋白表达。结果 CAFs高表达α-SMA、FAP和FSP-1。与NFs-exo相比,CAFs-exo可促进22rv1细胞和PC-3细胞增殖及迁移、侵袭(P<0.05),并抑制脂质ROS累积和细胞死亡,铁死亡相关蛋白呈现GPX4表达增高和NRF2、ACSL4水平下调,迁移相关蛋白N-cadherin水平增高而E-cadherin表达下调。结论 CAFs外泌体可以通过抑制铁死亡促进前列腺癌细胞增殖和侵袭。     

使用不同组织裂解液提取人心房组织膜蛋白的研究

目的:寻找一种适用于Western boltting实验的提取人心房组织膜蛋白的组织裂解液的配制方法。方法:配制两种不同的组织裂解液A、B。应用组织裂解液A、B及Bio-Rad公司提取膜蛋白的试剂盒,分别对人右心耳组织进行膜蛋白提取,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对蛋白进行分离,免疫印迹法检测SK2膜蛋白的表达,比较三种裂解方法的裂解效果。结果:三种不同的裂解方法提取的膜蛋白,其中用组织裂解液A和组织裂解液B提取的膜蛋白能满足Western blotting的实验要求,比用试剂盒提取的方法实验效果好。结论:组织裂解液A和组织裂解液B可作为人心房组织提取SK2膜蛋白的组织裂解液。