基因芯片监测拉米夫定致乙型肝炎病毒耐药突变的临床研究

目的 研究基因芯片技术在监测拉米夫定致乙型肝炎病毒(HBV)耐药突变中的临床意义。方法应用前瞻性方法,对20例经拉米夫定治疗和10例未治疗的乙型肝炎患者观察18个月,以聚合酶链反应扩增血清HBV,应用已研发的4位点拉米夫定耐药检测芯片监测YMDD相关突变。结果 基因芯片技术监测能有效分辨野生型和突变型HBV。HBV的耐药突变随用药时间延长,突变率显著增加(x~2=6.6 9,P<0.01),突变类型以M539V L515M为主,次之为M539I。HBV在YMDD突变后,继续应用拉米夫定对突变型病毒无效。结论 在应用拉米夫定时需要定期检测YMDD突变,常规的HBV DNA定性技术与基因芯片相比,可能会出现结论偏差,后者是最好的方法之一。出现耐药突变后,继续使用拉米夫定对耐药株无效,应停用或更换其它治疗方案。     

HBx-GFP DN突变子长期稳定表达抑制2.2.15细胞乙型肝炎病毒基因的表达

目的　探索和寻找更有效的乙型肝炎治疗新的靶点和新的治疗方法 ,研究其抗病毒基因表达作用。方法　运用基因工程技术 ,建立了HBx GFP及其作对照的表达野生X蛋白、绿色荧光蛋白 (GFP)的长期稳定表达细胞克隆 ,Northernblot检测细胞内的乙型肝炎病毒相关基因RNA转录 ,应用RIA检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg表达 ,观察对乙型肝炎病毒基因表达的影响。 结果所构建的X GFP突变子 ,Xwt,GFP质粒均能在 2 .2 .15细胞株中稳定高效表达并使细胞上清液中HBsAgHBeAg表达水平分别较 2 .2 .15组的 ( 10 1± 5.5)ng/ml、 ( 12 1± 8.6)ng/ml显著降低为平均( 7.6± 11.5)ng/ml、 ( 3 5± 3 .5)ng/ml (P <0 .0 1) ,细胞内的病毒 3 .5kb ,2 .1kb及 2 .4kb的RNA与各对照组比较均有显著降低 ,以 2 .1kb及 2 .4kb的mRNA下降最为显著。结论　乙型肝炎X基因DN突变子X GFP能显著抑制乙型肝炎病毒基因转录和S ,C基因的表达。提示 ,X基因亦是乙型肝炎治疗的一个靶基因     

ENBD和ERBD对胆总管结石ERCP后并发症预防作用

目的比较两种引流方法对胆管结石逆行胰胆管造影术(ERCP)后并发症的预防作用。方法将263例接受ERCP治疗的胆管结石病人随机分成3组,A组88例采用经内镜鼻胆管引流术(ENBD)治疗,B组86例采用经内镜胆管内引流术(ERBD)治疗,C组89例采用常规药物治疗。记录3组病人ERCP后胰腺炎、高淀粉酶血症及胆管感染发生率并进行比较。结果 A组ERCP后胰腺炎发生率为1.1%,B组为1.2%,C组为11.2%;A组高淀粉酶血症发生率为8.0%,B组为9.3%,C组为22.5%;A组胆管感染发生率为1.1%,B组为1.2%,C组为9.0%。A、B组以上3种并发症发生率与C组比较差异有显著性(χ2=5.491～7.744,P0.05)。3组均无穿孔、出血、死亡等并发症。结论 ENBD或ERBD可减少胆管结石ERCP后并发症的发生率,且作用相近。     

GLP-1对糖尿病大鼠胃排空调控机制的研究

目的探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对糖尿病大鼠胃排空的调控作用机制。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、GLP-1低剂量组(LG组)、GLP-1高剂量组(HG组)。腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,给药2周后采用酚红灌胃法检测胃排空情况;用酶联免疫法检测血浆和下丘脑匀浆中ghrelin和obestatin水平。结果 DM组胃排空较NC组明显加快(F=102.964,q=14.286,P0.01);血浆ghrelin和obestatin水平明显增高(F=8.360、11.626,q=3.558、2.332,P0.05)。LG组胃排空较NC组明显加快,而较DM组明显减慢(q=4.015、9.589,P0.01);血浆ghrelin和obestatin水平较NC组明显增高(q=3.911、4.918,P0.01)。HG组胃排空较NC组、DM组和LG组明显减慢(q=2.244~16.112,P0.05);血浆ghrelin和obestatin水平较DM组和LG组明显降低(q=2.719~5.232,P0.05)。DM组下丘脑ghrelin水平较NC组明显增加(F=4.091,q=2.841,P0.05),obestatin水平明显降低(F=6.084,q=3.384,P0.01),G/O比值明显增大(F=9.093,q=4.704,P0.01)。LG组下丘脑G/O比值较NC组明显增大(q=3.145,P0.01)。HG组下丘脑ghrelin水平较DM组和LG组明显降低(q=2.473、3.155,P0.05);obestatin水平较NC组明显降低(q=3.773,P0.01);G/O比值较DM组和LG组明显下降(q=3.738、2.248,P0.05)。结论 GLP-1可能直接或者通过下调血浆ghrelin水平或降低下丘脑中ghrelin/obestatin比值参与延迟胃排空。     

血浆GLP-1水平对糖尿病胃轻瘫病人固体胃排空影响

目的 探讨糖尿病胃轻瘫(DGP)病人血浆胰高糖素样肽=1(GLP-1)水平对固体胃排空的影响.方法 应用放射性核素法对55例2型糖尿病病人及15例正常人(NC组)进行固体胃半排空时间(T1/2)测定.根据T1/2结果将糖尿病病人分为胃排空时间正常的DM组和胃排空延迟的DGP组.采用酶联免疫吸附法检测各组空腹及餐后30、...     

核酶在肿瘤基因治疗中的研究进展

核酶是一类具有酶活性的RNA分子，它可以序列特异性地定点切割靶RNA，从而阻断有害基因的表达。作为一种新的基因治疗手段，核酶技术近年来发展迅速，在基因调控、抗病毒复制和灭活癌基因方面有很大的应用潜力。本文就核酶在肿瘤的基因治疗方面的应用作一介绍。     

替诺福韦单一用药预防肝移植术后乙肝复发的疗效分析

目的探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关肝移植(liver transplantation,LT)后停用乙肝免疫球蛋白(hepatitis B immunoglobulin,HBIG)单用替诺福韦(tenofovir disoproxil fumarate,TDF)预防HBV复发的有效性、安全性及经济性。方法选取我院HBV相关LT患者,将患者分为TDF单药组和恩替卡韦(entecavir,ETV)联合HBIG用药组,收集患者临床及实验室数据并比较两种用药方案的效果、不良反应及用药花费。结果截止到2019年6月30日,本研究终纳入单药组10例和联用组28例,分别平均随访13.50个月和13.03个月,单药组1例(10.00%)和联用组2例(7.14%)出现乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)阳性复发,所有患者术后乙肝DNA(hepatitis B virus DNA,HBV-DNA)始终为阴性,联用组1例(3.57%)死亡,单药组费用明显低于联用组(490元/月比1952.55元/月,P<0.01)。结论与ETV联合HBIG相比,LT后TDF单药预防HBV复发,具有良好的有效性、安全性和经济性。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对人胰腺癌细胞株SW1990增殖的影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人胰腺癌细胞株SW1990增殖及细胞凋亡、细胞周期的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度EGCG(6.25、12.5、25、50、100μg/ml)对体外培养的SW1990细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测EGCG(25μg/ml)对SW1990细胞凋亡及不同浓度的EGCG(0、10、20、30、40、50 μg/ml)对SW1990细胞周期的影响.结果 不同浓度EGCG(0、25、50μg/ml)作用SW1990细胞24 h后,吸光度值(A492)分别为0.46±0.04、0.42±0.04、0.27±0.03,48 h后分别为0.48±0.02、0.31±0.03、0.16±0.02,72 h后分别为0.51±0.01、0.24±0.04、0.14±0.04,EGCG呈浓度及时间依赖性抑制SW1990的增殖(P＜0.01).25 μg/ml EGCG作用于SW1990细胞24、48、72 h后的细胞凋亡率分别为(8.33±1.15)%、(19.77±0.81)%、(29.17±0.75)%,而对照组相应的细胞凋亡率分别为(2.77±0.45)%、(3.20±0.26)%、(3.67±0.35)%,两组差异具有统计学意义(P＜0.01).0、20、50 μg/ml EGCG作用SW1990细胞24 h后,G0/G1期细胞分别占(57.59±0.97)%、(62.99±1.91)%、(68.87±1.88)%,随着EGCG浓度的增加,Go/G1期细胞比例明显增加,而S期和G2/M期细胞比例相应下降(P＜0.01).结论 EGCG能明显抑制SW1990细胞的增殖,其机制可能与其诱导SW1990细胞凋亡及调控细胞周期有关.     

消炎痛栓预防胆总管结石ERCP术后胰腺炎的效果

目的观察直肠应用消炎痛栓预防胆总管结石病人内镜下逆行胰胆管造影术（ERCP）术后胰腺炎、高淀粉酶血症的效果。方法将符合标准的胆总管结石病人113例随机分为2组,预防组60例,对照组53例。预防组术前1h给予消炎痛栓100mg塞肛,对照组不给予消炎痛栓。测定两组病人术前及术后6、24h血清淀粉酶水平,观察ERCP术后高淀粉酶血症、急性胰腺炎的发生率。结果预防组ERCP术后6、24h血清淀粉酶水平明显低于对照组（t=-2．31、-2．20,P％0．05）。预防组胰腺炎及高淀粉酶血症发生率明显低于对照组（χ^2=3．902、5．316,P〈0．05）。结论直肠应用消炎痛栓可以预防胆总管结石病人ERCP术后高淀粉酶血症及胰腺炎的发生。