糖尿病大鼠胃排空功能与胃组织瘦素的关系

大量文献已证实瘦素可抑制胃排空，胃排空延迟是糖尿病常见的并发症。目的：探讨不同病期糖尿病胃排空延迟与胃组织瘦素的关系。方法：40只Wistar大鼠分为对照1周组（NC1组）、对照4周组（NC2组）、糖尿病病期1周组（DM1组）和糖尿病病期4周组（DM2组）。分别于注射链佐霉素或柠檬酸缓冲液1、4周后检测大鼠胃排空、胃组织瘦素和瘦索受体OB—RbmRNA的表达。结果：与NC1组相比，DM1组大鼠胃排空明显加快（P〈0．01），胃组织瘦素表达显著增加（P〈0．01），OB—RbmRNA的表达无显著差异。与NC2组相比，DM2组大鼠胃排空明显减缓（P〈0．01），瘦素表达显著降低（P〈0．01），OB—RbmRNA的表达无显著差异。结论：随着糖尿病病期的持续，大鼠胃排空由加速转为延迟．胃组织瘦素表达反馈性由增加转为减少。     

肝移植术后新发非酒精性脂肪肝患者合并代谢综合征的初步研究

目的分析肝移植(liver transplantation, LT)后新发非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)患者及新发NAFLD合并代谢综合征(metabolic syndrome, MS)患者的临床特征, 并探讨相关危险因素。方法收集2016年1月至2020年10月于青岛大学附属医院器官移植中心接受肝移植的患者, 随访至2021年10月。将肝移植受者分为有/无新发NAFLD组, 并进一步将肝移植后新发NAFLD患者分为合并/未合并MS组, 分析肝移植后新发NAFLD患者及合并MS患者的临床特征, 通过Logistic回归分析探讨术后新发NAFLD及合并MS的危险因素。结果本研究共纳入符合标准的324例肝移植受者, 中位随访时间为2.9(2.0～4.3)年, 术后新发NAFLD的发病率为21.0%(68/324), 其中, 合并MS的发病率为44.1%(30/68)。与术后无新发NAFLD患者相比, 新发NAFLD患者的术前体重指数(body mass index, BMI)、血糖、糖化血红蛋白水平偏高, 血小板水平偏...     

靶向S区和C区基因的M1GS RNA核酶共同抑制HBV的表达

目的:研究靶向HBVS区和C区基因的M1GSRNA核酶共同作用对HBV基因表达的影响.方法:选择HBVayw亚型S区基因294nt和C区基因2333nt为切割位点,以含有编码M1RNA的DNA序列的质粒pTK117为模板,通过PCR扩增得到M1GSRNA核酶的DNA模板,并将其克隆至真核表达载体pEGFP-C1得到重组质粒pEGFP-GSS和pEGFP-GSC.将2个重组质粒共转染HepG2.2.15细胞,转染后ELISA法测细胞培养液中的HBsAg和HBeAg,RT-PCR检测HBVmRNA.结果:成功构建了分别靶向HBVS区基因和C区基因的真核表达载体.共转染HepG2.2.15细胞后,HBsAg和HBeAg的表达分别被抑制了33.2%和39.1%,HBVCmRNA和SmRNA分别被抑制了32.5%和29.7%,而HepG2.2.15细胞的增殖无明显变化.结论:靶向HBVS区和C区基因的M1GSRNA核酶共同作用可特异性抑制HBVS区和C区基因的表达.     

Notch信号通路对大鼠肝纤维化作用及药物干预价值

目的 研究Notch信号转导通路受体Notch-1、配体Jagged-1及下游因子Hes-1的表达及在大鼠肝纤维化发生、发展中的作用,并探讨扶正化瘀方干预的价值。方法 雄性Wistar大鼠58只,随机分为对照组、模型组、药物组3组。以四氯化碳(CCL4)制备大鼠肝纤维化模型,自造模始药物组即以扶正化瘀方溶液灌胃给予早期干预,8周实验结束后将大鼠处死,取部分组织行苏木精-伊红染色评价肝纤维化程度,采用实时荧光定量PCR方法监测Notch信号转导通路的受体Notch-1、配体Jagged-1及下游因子Hes-1的mRNA表达。结果 模型组肝组织表面可见颗粒状结节、汇管区假小叶形成及肝实质结构紊乱。药物组大鼠肝纤维化程度较模型组减轻。3组Jagged-1、Notch-1、Hes-1的mRNA表达比较差异有显著性(F=332.398~872.015,P<0.001);与对照组相比,模型组肝组织各因子mRNA表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,药物组大鼠肝组织各因子的表达明显下降(P<0.05)。结论 Notch信号转导通路可能全程参与肝纤维化的发生、发展及转归过程,而扶正化瘀方可通过抑制Notch信号转导通路下调Hes-1基因而抑制肝纤维化进展。     

下丘脑中Ghrelin、Obestatin水平及其受体表达与糖尿病大鼠胃排空的关系

目的 探讨糖尿病大鼠下丘脑胃促生长素(Ghrelin)、肥胖抑素(Obestafin)水平及受体表达与胃排空的关系.方法 60只雄性Wistar大鼠随机等分为正常对照组、糖尿病组、胰岛素组.链脲佐菌素(STZ)造模,给药2周、6周后测胃排空及下丘脑Ghrelin、Obestatin、生长激素促分泌激素受体(GHSR)和孤儿蛋白受体39(GPR-39).结果 2周后,糖尿病和胰岛素组的胃排空率(%)(74±8、40±5)、Ghrelin(ng/g)(52±9、51±7)和Ghrelin/Obestatin(3.8±1.0、2.8±1.0)分别较正常组[32%±7%、(39±11)ng/g、2.1±0.8]高(均P＜0.05).糖尿病组Obestatin(ng/g)(14.2±2.0)较正常组(21.7±4.7)低(P＜0.05),而GHSR(1.26±0.46)较正常组(0.77±0.21)高(P＜0.05).胃排空率与Ghrelin、Ghrelin/Obestatin和GHSR/β-肌动蛋白(B-actin)正相关(r=0.49;r=0.63;r=0.73;P＜0.01),与Obestatin负相关(r=-0.74,P＜0.01).6周后,糖尿病和胰岛素组胃排空率(78.97%±8.13%.44.06%±5.06%)均较正常组(35.06%±3.91%)高(均P＜0.01).胃排空率与Ghrelin/Obestatin呈正相关(r=0.40,P＜0.05),未检测到GPR-39.结论 高血糖早期胃排空加速可能受Ghrelin和GHSR表达增加影响,而持续期受Ghrelin/Obestatin增大影响.     

早期全肠外营养及肠内、外混合营养对神经外科危重患者免疫功能的影响

目的探讨早期给予全肠外营养（TPN）及肠内营养（EN）、肠外营养（PN）混合支持对神经外科危重患者免疫功能的影响。方法采用前瞻性对照研究将神经外科危重患者按入院顺序随机分为TPN组及EN＋PN组,并对比营养支持前后两组CD3、CD4、CD8、CD4／CD8、CD3／CD25、IgA、IgG、IgM、血清白蛋白的变化。结果给予神经外科危重患者两种营养支持均可提高其CD3、CD4、CD8及CD3＋／CD25＋比值（P〈0．05,P〈0．01）;两种营养支持方式均可显著升高IgA、IgG、IgM、（P〈0．05）及血清白蛋白浓度（P〈0．01）。与TPN组比较,EN＋PN组CD3、CD4、CD8、CD4／CD8比值、IgA、IgG、IgM浓度及血清白蛋白水平均显著升高（P〈0．05,P〈0．01）。结论早期TPN及EN＋PN支持均可促进神经外科危重患者免疫功能的恢复及提高,EN＋PN的作用优于TPN,对于神经外科危重患者应早期给予营养支持治疗。     

GLP-1对糖尿病大鼠胃排空调控机制的研究

目的探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对糖尿病大鼠胃排空的调控作用机制。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、GLP-1低剂量组(LG组)、GLP-1高剂量组(HG组)。腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,给药2周后采用酚红灌胃法检测胃排空情况;用酶联免疫法检测血浆和下丘脑匀浆中ghrelin和obestatin水平。结果 DM组胃排空较NC组明显加快(F=102.964,q=14.286,P0.01);血浆ghrelin和obestatin水平明显增高(F=8.360、11.626,q=3.558、2.332,P0.05)。LG组胃排空较NC组明显加快,而较DM组明显减慢(q=4.015、9.589,P0.01);血浆ghrelin和obestatin水平较NC组明显增高(q=3.911、4.918,P0.01)。HG组胃排空较NC组、DM组和LG组明显减慢(q=2.244~16.112,P0.05);血浆ghrelin和obestatin水平较DM组和LG组明显降低(q=2.719~5.232,P0.05)。DM组下丘脑ghrelin水平较NC组明显增加(F=4.091,q=2.841,P0.05),obestatin水平明显降低(F=6.084,q=3.384,P0.01),G/O比值明显增大(F=9.093,q=4.704,P0.01)。LG组下丘脑G/O比值较NC组明显增大(q=3.145,P0.01)。HG组下丘脑ghrelin水平较DM组和LG组明显降低(q=2.473、3.155,P0.05);obestatin水平较NC组明显降低(q=3.773,P0.01);G/O比值较DM组和LG组明显下降(q=3.738、2.248,P0.05)。结论 GLP-1可能直接或者通过下调血浆ghrelin水平或降低下丘脑中ghrelin/obestatin比值参与延迟胃排空。     

刺参粘多糖对人胰腺癌细胞株SW1990增殖的抑制作用

刺参粘多糖(stichopus japonicus acid muco-polysaccharide,SJAMP)是从中国刺参体壁中提炼出来的一类多糖类物质.该物质成分恒定,结构简单,易于克服空间位阻,增加了对黏膜上皮的穿透能力,容易被吸收.初步研究证实[1-4],刺参粘多糖具有广谱的抗肿瘤活性,能抑制肝癌、宫颈癌等恶性肿瘤细胞的增殖,诱导细胞分化.本研究观察SJAMP对胰腺癌细胞SW1990增殖、凋亡的影响,探讨其可能机制.     

pRevX-GFP DN突变体抑制HepG2 2.2.15细胞乙型肝炎病毒复制的实验研究

目的 建立pRev X-GFP及其作对照的表达野生X蛋白、绿色荧光蛋白的长期稳定表达细胞克隆，进一步研究以乙型肝炎病毒(HBV)X基因作为治疗靶，运用DN突变体技术，进行抗HBV的稳定表达对抗HBV复制的作用。方法 运用基因工程技术，分别以逆转录病毒载体pRev TRE为载体，构建表达野生型HBV X蛋白，GFP蛋白和X与GFP融合的X-GFP融合蛋白的质粒，并分别导入乙型肝炎的转基因细胞株HepG2 2．2．15细胞(简称2．2．15细胞)中，并通过长期的潮霉素抗性选择，获得能稳定表达DN蛋白的2．2．15细胞克隆。应用dot blot检测细胞上清液及细胞中HBV DNA，Southern blot检测细胞内HBV复制中间体，以观察其表达对HBV病毒复制的影响。结果 所构建的pRev X-GFP突变体、pRev Xwt、pRev GFP质粒均能在2．2．15细胞株中稳定高效表达。PRev X-GFP高效表达后，能有效地抑制或阻断细胞内HBV核酸合成及其分泌入细胞上清液。定量聚合酶链反应结果显示，pRev X-GFP组的平均每毫升HBV DNA浓度较2．2．15细胞组分别下降1．0～1．81g值，对细胞内外dot blot结果进行图像分析，其灰度值仪为对照2．2．15细胞组的7．9％，Southern blot分析则发现，X基因DN突变体对HBV复制中间体rcDNA、ssDNA及dsDNA的形成有全面抑制作用。结论 pRev X-GFP DN突变体具有显著抑制HBV复制作用。初步证实X基因是HBV治疗的一个新靶点。针对X基因的治疗，有望为HBV治疗提供一些新的思路。     

基因芯片监测拉米夫定致乙型肝炎病毒耐药突变的临床研究

目的 研究基因芯片技术在监测拉米夫定致乙型肝炎病毒(HBV)耐药突变中的临床意义。方法应用前瞻性方法,对20例经拉米夫定治疗和10例未治疗的乙型肝炎患者观察18个月,以聚合酶链反应扩增血清HBV,应用已研发的4位点拉米夫定耐药检测芯片监测YMDD相关突变。结果 基因芯片技术监测能有效分辨野生型和突变型HBV。HBV的耐药突变随用药时间延长,突变率显著增加(x~2=6.6 9,P<0.01),突变类型以M539V L515M为主,次之为M539I。HBV在YMDD突变后,继续应用拉米夫定对突变型病毒无效。结论 在应用拉米夫定时需要定期检测YMDD突变,常规的HBV DNA定性技术与基因芯片相比,可能会出现结论偏差,后者是最好的方法之一。出现耐药突变后,继续使用拉米夫定对耐药株无效,应停用或更换其它治疗方案。