聚合酶链反应诊断单纯疱疹病毒性脑炎

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增患者脑脊液（ＣｈＦ）中病毒特异性ＤＮＡ可早期快速诊断单纯疱疹病毒性脑炎（ＨＳＥ）。１９例临床确诊的病毒性脑炎患者，经ＰＣＲ在ＣＳＦ中检出单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）１３例，全部阳性标本均经分子杂交证实为ＨＳＶ－ＤＮＡ，而１４例其他神经疾病（ＯＮＤ）对照组均为阴性，显示了这一方法的特异性。其中７例病毒性脑炎ＣＳＦ标本分别用ＰＣＲ分子杂交和病毒分离等三种方法检测ＨＳＶ；显示ＰＣＲ最为敏感。表明ＰＣＲ技术的广泛应用将提高ＨＳＥ的早期诊断水平，指导临床正确治疗。     

免疫状态对Fv—4基因抗Friend MuLV作用的影响

通过检测免疫抑制的Ｆ１小鼠和杂合子Ｆ２裸鼠对Ｆｒｉｅｎｄ小鼠白血病病毒（Ｆｒ．ＭｕＬＶ）感染的敏感性,探讨免疫状态对Ｆｖ－４基因（特别是对Ｆｖ－４基因杂合子）抗ＦｒｉｅｎｄＭｕＬＶ作用的影响,经腹腔接种Ｆｒ．ＭｕＬＶ病毒液攻击小鼠或Ｆ２裸鼠后,检查其计中Ｆｒ．ＭｕＬＶ的增主其发病情况,结果表明,免疫抑制的Ｆ１小鼠和杂合子Ｆ１裸鼠都可被Ｆｒ．ＭｕＬＶ脾脏中有病毒增殖,并用约２／３的杂合子Ｆ２裸鼠与Ｂ     

HPVl6L1蛋白血清学诊断宫颈癌临床效果观察

目的：探讨基因重组人乳头瘤病毒（HPV）16L1蛋白的血清学诊断宫颈癌的临床意义。方法：选择63例宫颈癌患者，采用PCR方法检测宫颈癌组织的HPV型别；并采用重组原核表达系统制备HPV16L1蛋白，检测其血清HPV16L1抗体。结果：宫颈癌HPV通用型DNA阳性率50．8％，HPV16DNA阳性率46％，HPV18DNA阳性率3．2％。宫颈癌组血清HPV16L1抗体阳性率44．4％，与健康对照组和尖锐湿疣组比较，差异非常显著（P〈0．01）。HPV16DNA检测法与HPV16L1ELISA血清抗体检测法两者间相关显著（P〈0．05）。结论：宫颈癌患者以HPV16感染为多见，HPV16L1血清ELISA抗体检测可用作HPV16感染的血清学诊断和宫颈癌的免疫学研究。     

哈尔滨市2006-2007年度儿童流行性感冒监测结果分析

目的了解哈尔滨市儿童流感流行特征,为制定儿童流感防治策略提供科学依据。方法采集儿童流感样病例的鼻咽拭子标本,采用MDCK细胞培养法分离流感病毒,微量血凝抑制(HI)实验进行型别鉴定,并对其流行病学及病原学监测结果进行分析。结果从2006年10月～2007年3月采集的185份儿童流感样病例的鼻咽拭中,分离到流感病毒32株,阳性率为17.30%,均为H1N1亚型。4～7岁年龄段的儿童流感病毒分离阳性率最高,为30.00%。儿童流感病毒分离高峰主要出现在12月份,阳性率高达39.47%。结论哈尔滨市2006-2007年度儿童流感流行优势株为H1N1亚型流感病毒,儿童流感流行主要集中在12月份。今后应加强儿童流感的预防与控制。     

γH2AX在HPV16阳性宫颈鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨γH2AX在HPV16阳性宫颈鳞癌组织中的表达及意义.方法 对74例宫颈鳞癌组织通过DNA提取,PCR检测,分析HPV的感染情况并筛选HPV16阳性宫颈癌组织;进而对HPV16阳性的宫颈癌石蜡组织连续切片HE染色明确组织型别,进行HPV16 DNA原位杂交检测HPV定位、免疫组化检测γH2 AX和p16蛋白的表达;最后选取30例典型的包括从正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变到宫颈原位癌渐变的组织切片,对比HPV DNA定位与γH2 AX和p16蛋白的表达,分析γH2 AX作为HPV感染导致宫颈癌发生过程中生物标记物的可行性.结果 经PCR扩增证明HPV感染率为98.65％,HPV16是最常见的型别占74.32％;原位杂交结果显示正常宫颈组织和CIN Ⅰ检测不到HPV16 DNA的存在,CINⅡ中HPV主要为游离型存在,随着宫颈病变的加重,HPV16 DNA逐渐出现整合形式;p16和γH2AX的表达均随着宫颈上皮病变级别的增加其阳性表达率增高,HPVDNA和γH2AX的表达均以颗粒细胞层和棘细胞层为主,定位具有一致性,HPV DNA和p16的表达定位不具有一致性.结论 γH2AX作为DNA损伤激活的重要蛋白,可作为HPV16感染致宫颈癌发生过程中的生物标记物.     

HPV16L1真核表达系统在哺乳动物细胞中表达的实验研究

人乳头瘤病毒 (Human Papillomavirus,HPVs)是引起人类皮肤、粘膜乳头状瘤或疣的一类肿瘤相关病毒 ,与多种肿瘤发生相关 ,至今尚无有效的预防方法。 70年代科学家们把乳头瘤病毒 (PV)分为人乳头瘤病毒 (HPV)和动物乳头瘤病毒 [1 ,2 ] ,现在已把 HPV分成 70余个型别 ,且确立了 HPV与肿瘤发生的相关性 ;把 HPV分成高危组、低危组 ,在高危组中以 HPV16、18、31、33、5 8等型为代表 ,主要引起子宫颈癌 [3 ] 、消化道癌、骨髓瘤等[4] 。Van.den B等对大量子宫颈癌标本进行检测后发现 ,HPVDNA阳性率在 90 %以上 ,HPV16型占 40 %～ 6…     

人缺血脑组织中TNF-α和IL-1β的表达

目的 :检测人缺血脑组织中TNF α和IL 1β的表达。 方法 :将 13例脑梗死的死亡病例按发病时间分成 <2d、3～ 5d、 >5d3个组 ,以非缺血侧半球作为对照 ,用免疫组化染色法检测缺血脑组织中TNF α和IL 1β的表达。结果 :人脑缺血后缺血病灶中TNF α和IL 1β呈高表达 ,与正常侧脑组织相比较有极显著差异。TNF α和IL 1β表达细胞的分布与缺血灶相一致 ,呈局灶性分布。TNF α的表达高峰在病后 2d内。IL 1β表达高峰在病后 3～ 5d。在病后 5d ,缺血侧TNF α和IL 1β的表达与正常侧无显著差异。结论 :人类脑缺血组织中TNF α和IL 1β的表达与动物实验的结果相似 ,提示TNF α和IL 1β参与了脑缺血损伤 ,有助于临床建立新的有针对性的治疗措施     

一氧化氮供体和他汀对B组柯萨奇病毒感染的实验研究

目的研究硝酸酯类和他汀类等一氧化氮（NO）供体的抗柯萨奇病毒B组3型（CVB3）的作用及其特点和机制。方法用TCID50和空斑形成实验测定CVB3的毒力；MTT法确定NO供体药物的无毒性浓度；利用细胞病变效应（CPE）抑制实验和空斑形成抑制实验分析NO供体药物对CVB3在HeLa细胞和ECV．304细胞中增殖的抑制作用；并分析硝酸甘油（GRIN）不同给药次数、NO浓度变化以及NO浓度与GTN对CVB3抑制效应间的相关性。结果硝酸酯类药物GTN、硝酸异山梨酯可明显抑制CVB3所致的CPE及空斑形成（P〈0．05），他汀类药辛伐他汀、洛伐他汀均未显示抑制CVB3所致的CPE（P〉0．05）；CVB3接种前预先与GTN作用、CVB3接种同时加入GTN两种条件下CPE抑制率差异无统计学意义（P〉0．05）；CVB3攻击后多次给予GTN的组间CPE抑制率差异无统计学意义（P〉0．05），但在CVB3攻击前不同时间点给予GTN的组间CPE抑制率差异有统计学意义（P〈0．05）；NO浓度与不同时间点给予GrIN的CPE抑制结果呈正相关（r=0．97，P〈0．01）。结论NO供体类药物硝酸酯类具有明确的抗CVB3感染作用，其抗CVB3增殖的作用与NO浓度呈正相关；他汀类药物在本实验条件下未观察到抗CVB3增殖作用，原因可能是细胞类型与他汀不匹配。     

人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白V3区对细胞结合能力的研究

目的：研究人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）不同亲嗜株包膜糖蛋白Ｖ３区结合于靶细胞的能力。方法：合成来源于不同嗜性ＨＩＶ－１Ｖ３区的生物素标记和非标记的多肽。采用流式细胞计数分析生物素化的 Ｖ３多肽对细胞的结合能力以及细胞表面的结合配体。结果：ＨＩＶ－１Ｘ４　亲嗜株ＩＩＩＢＶ３区能结合于多种细胞的表面，包括辅助受体ＣＸＣＲ４；竞争实验结果显示蛋白酶抑制剂能抑制该结合。Ｒ５亲嗜株 ＡＤＡ Ｖ３区只极微弱地结合于外周血单核细胞和表达ＣＣＲ５ 的人星形胶质细胞表面。结论：不同嗜性ＨＩＶ－１Ｖ３区结合于细胞表面的能力不同从亲嗜株Ｖ３区直接结合于细胞表面并被其自身所增强，其靶分子至少包括辅助受体 ＣＸＣＲ４和蛋白酶分子；而Ｒ５亲嗜株 ＡＤＡ Ｖ３区则不结合于 ＣＣＲ５和蛋白酶。     

香芪口服液增强非特异免疫和体液免疫作用的实验研究

目的 研究中药制剂香芪口服液对机体非特异免疫作用和体液免疫作用的影响。方法 用碳粒廓清法测定单核巨噬细胞的吞噬功能,从而研究对非特异性免疫功能的影响;用溶血空斑形成细胞测定法研究对体液免疫功能的影响。结果 香芪口服液可有效地纠正免疫功能低下,显著提高巨噬细胞的吞噬功能以及使抗体生成细胞数增多,使两者恢复至正常水平。结论 香芪口服液可有效地恢复和增强继发性免疫功能低下小鼠的非特异性免疫和体液免疫功能。